2 курс / Микробиология 1 кафедра / Доп. материалы / Общая медицинская микробиология

Представители спирохет и их роль в патологии. Среди спирохет разли-

чают сапрофитов, условно-патогенных и паразитов. Большинство спирохет — свободноживущие микроорганизмы, некоторые обитают как сапрофиты в организме человека. Патогенные спирохеты входят в состав родов Treponema, Borrelia и Leptospira (рис. 43).

в

Рис. 43. Спирохеты:

а — трепонема; б — лептоспира; в — боррелия

Патогенные для человека виды рода Treponema: возбудитель сифилиса —

Т. pallidum subsp. pallidum; возбудитель фрамбезии — Т. раllidum subsp. tenue;

возбудитель пинты — Т. carateum; возбудитель беджеля — T. pallidum subsp. endemicum (bejel).

Патогенные для человека виды рода Borrelia: возбудитель эпидемического возвратного тифа вшивого — В. recurrentis; возбудители клещевого возвратного тифа — В. persica, В. hispanisa и др.; возбудитель клещевого Лайм-боррелиоза —

B. burgdorferi.

Патогенный для человека вид рода Leptospira: возбудитель лептоспироза —

L. interrogans.

Общие признаки спирохетозов:

–генерализованный характер;

–спирохетемия;

–рецидивирующее течение, обусловленное изменением антигенной структуры либо образованием покоящихся форм (L-форм, цист);

–экзантема (сыпь на коже);

–чувствительность спирохет к бензилпенициллину.

ТРЕПОНЕМЫ

Представители трепонем и их роль в патологии. Роль патогенных тре-

понем в патологии представлена в табл. 9.

Сифилис — антропоноз, передается разными путями: половым, котакт-

но-бытовым (через белье, посуду, зубные щетки, бритвенные приборы, сигаре-

60

ты, помаду, соски, молоко кормящей матери), трансплацентарным (врожденный ранний и врожденный поздний сифилис) и трансфузионным («обезглавленный сифилис», начинается со второй стадии: появления сыпи и симптомов интоксикации через 2–3 месяца после гемотрансфузии инфицированной крови).

T. pallidum неустойчива во внешней среде: погибает при высыхании биологического материала, содержащего возбудитель, мгновенно — при 100 ºС; чувствительна к тяжелым металлам и дезинфектантам. Однако в донорской крови сохраняет инфекционную активность в течении суток, во влажной среде и тканях трупа — в течение 3 суток.

Трепонемы способны проникать в организм только через поврежденные кожу и слизистые, наличия микротравм и трещин достаточно для проникновения возбудителя. В третичном периоде сифилиса возбудитель поражает нервную систему, поэтому препараты, используемые для лечения сифилиса должны проникать через гематоэнцефалический барьер.

При действии неблагоприятных факторов (обычно неправильный подбор дозы антибиотика) возбудитель сифилиса может in vivo образовывать покоящиеся формы: L-формы (формы с дефектами КС) или цисты (локализованные в стенке сосудов, свернутые в шар спирохеты, покрытые непроницаемой муциновой оболочкой) и в таком состоянии длительно персистировать в организме. Клинически образование покоящихся форм ассоциируется с ремиссией, иногда ошибочно принимаемой за реконвалесценцию, прекращение приема антимикробных препаратов в таком случае ведет к эксцистированию трепонем и к рецидиву заболевания.

61

УП трепонемы могут вызывать фузоспирохетозы — вторичные инфекции, вызванные ассоциацией УП облигатноанаэробных микроорганизмов, обитающих в полости рта: T. vincentuii и F. nucleatum. Фузоспирохетозы развиваются при иммунодефицитах, гипотрофии, заболеваниях и повреждениях слизистых оболочек (герпетический стоматит, ангина). Клинически фузоспирохетозы проявляются язвенно-некротическими процессами: чаще встречается ангина Сима- новского–Плаута–Венсана, реже — гингивит.

Методы изучения морфологии трепонем. Следует помнить, что микро-

скопический метод является основным для диагностики в серонегативном периоде сифилиса (как минимум 2 недели с момента появления твердого шанкра), когда в сыворотке антитела еще не обнаруживаются.

Морфология трепонем изучается следующими методами:

1.Поперечный диаметр данных бактерий близок к границе разрешающей способности светового микроскопа, поэтому лучший метод изучения трепонем — ТПМ или ФКМ нативных препаратов (висячей или раздавленной капли) из твердого шанкра (с 3–4 недели первичного сифилиса) и пунктатов лимфоузлов (с 4–5 недели первичного сифилиса) — в таких препаратах наблюдают подвижность трепонем.

2.Трепонемы из-за малого количества нуклеопротеидов в клетке плохо воспринимают анилиновые красители. Поэтому для обнаружения T. pallidum фиксированные мазки окрашивают 1–2 ч горячей краской Романовского–Гимзы; при этом бледная трепонема окрашивается в бледно-розовый цвет (отсюда название «бледная трепонема»). УП трепонемы окрашиваются интенсивнее и быстрее, в том числе анилиновыми красителями, завитки выражены лучше.

3.Серебрение (используется редко).

4.Электронная микроскопия.

БОРРЕЛИИ

Представители боррелий и их роль в патологии. Род Borrelia включает

19 видов, из которых патогенными для человека являются: B. recurrentis, вызывающая эпидемический вшивый возвратный тиф, возбудители эндемических клещевых борелиозов (В. duttonii, В. persica, В. hispanica, В. latyschewii, В. caucasica) и B. burgdorferi, вызывающая болезнь Лайма.

Боррелии проникают в организм только через поврежденные кожу и слизистые. Для передачи боррелий необходимы переносчики, поэтому боррелиозы распространяются трансмиссивным путем. Поступление возбудителя непосредственно в кровь объясняет короткий инкубационный период (неделя) при боррелиозах.

Эпидемический вшивый возвратный тиф — антропоноз. B. recurrentis

распространяется платяной и головной вшами, которые, насосавшись крови больного, находящегося в лихорадочном периоде заболевания, через 4–7 дней становятся способны заразить человека в течение всей своей жизни (трансовариальная передача боррелий отсутствует). Для вшей боррелии непатогенны, с кровью заносятся в желудок вши и оттуда — в полость тела (гемолимфу), где размножаются. Ворот выхода из тела переносчика нет, поэтому укусы вшей не за-

62

ражают человека. Возбудитель передается лишь при раздавливании вши и втирании содержащей боррелий гемолимфы вшей при расчесывании укуса. Лобковые вши большого эпидемического значения не имеют, что связано с их биологическими особенностями (плохо переносят голод, быстро погибают вне хозяина).

Для боррелий характерна высокая антигенная изменчивость: каждое новое поколение боррелий отличается структурой поверхностных антигенов, что обусловливает волнообразный характер лихорадки при возвратном тифе. На каждую новую в структурном отношении генерацию боррелий развивается лихорадочная реакция. Первый лихорадочный приступ заканчивается образованием антител против боррелий первой генерации. Под влиянием этих антител большая часть борелий погибает, клинически наступает ремиссия. Часть боррелий изменяет антигенные свойства и наступает новый приступ лихорадки. Всего наблюдается 7–8 лихорадочных волн. Выздоровление наступает, когда в крови появляется спектр антител, лизирующих все варианты боррелий. Эта особенность дала название заболеванию — возвратный тиф.

Эндемический среднеазиатский клещевой возвратный тиф — транс-

миссивный зооноз. Возбудителями являются многие виды боррелий, морфологически сходные с возбудителем эпидемического возвратного тифа и распространенные в определенных географических зонах (Кавказ, Средняя Азия).

Резервуаром боррелий в природных очагах являются животные: разные виды грызунов (крысы, полевки, песчанки, ежи, барсуки), а также шакалы. Переносчик боррелий — паразитирующие на животных аргазовые клещи рода Ornithodorus, выделяющие возбудителя со слюной и испражнениями. Клещи заразны

втечение всей их жизни (около 10 лет); способны годами голодать, сохраняя возбудителя; у них имеет место трансовариальная передача боррелий. В природных очагах происходит постоянная циркуляция возбудителя от грызунов к клещам и обратно. Животные и паразитирующие на них клещи накапливаются

внорах, пещерах и в различных хозяйственных строениях.

Человек заражается при укусах клеща или попадании испражнений клеща на поврежденную кожу. На месте инокуляции возбудителя образуется папула (первичный аффект). Патогенез и клинические проявления клещевых возвратных тифов сходны с эпидемическим. Заболевания чаще возникают в теплое время года во время активизации жизнедеятельности клещей. Население эндемичных по клещевому возвратному тифу районов приобретает невосприимчивость к циркулирующим возбудителям в результате бытовой иммунизации. В сыворотке крови местных жителей обнаруживаются антитела к боррелиям, распространенным в этом регионе. Заболевают, главным образом, приезжие.

Боррелиоз Лайма — клещевой боррелиоз лесов умеренного климатического пояса, в т. ч. Беларуси. Лайм-борелиоз занимает в настоящее время одно из первых мест среди природно-очаговых инфекций. Возбудитель B. burgdorferi относится к новым инфекциям (был выявлен В. Бургдорфером в 1981 г. в окрестностях городка Лайм (Lyme) в штате Коннектикут в США). Клинические проявления Лайм-борелиоза известны давно, но описывались как синдромы неясной этиологии.

63

Естественные хозяева B. burgdorferi — позвоночные животные, чаще грызуны, переносчики — иксодовые клещи. У клещей зараженность составляет 30–60 %, у большинства возбудитель локализуется в кишечнике, у некоторых — проникает в полость тела, слюнные железы и гонады и может передаваться трансовариально.

В организм человека B. burgdorferi попадает со слюной клеща при укусе. Наиболее опасный период — весна и начало лета, когда начинается пробуждение клещей. На месте укуса клеща образуется пятно — двухцветная кольцевидная эритема с темно-окрашенным периферическим контуром, оно увеличивается («ползучая эритема») (рис. 44).

Рис. 44. Ползучая эритема при болезни Лайма

При отсутствии своевременного лечения развиваются хронические формы Лайм-боррелиоза с многосистемными поражениями: часто поражаются кожные покровы, суставы (артриты) и нервная система (могут развиваться параличи с летальным исходом).

Методы изучения морфологии боррелий. Боррелии легко могут быть об-

наружены в крови больного при любом способе окраски и виде микроскопии. На высоте лихорадки готовят нативные препараты (висячую или раздавленную капли) или фиксированные препараты (толстую каплю или тонкий мазок крови). Реже исследуют другие виды материала — соскобы кожных поражений, центрифугат плазмы, ликвора, мочи.

Морфология боррелий изучается следующими методами:

1.Нативные препараты крови микроскопируют в темном поле, наблюдая подвижность боррелий (рис. 45, а).

2.Фиксированные препараты окрашивают по Романовскому–Гимзе или фуксином. Боррелии при окраске по Романовскому–Гимзе — фиолетовые, фуксином — розовые (рис. 45, б).

3.Световая микроскопия мазков, импрегнированных серебром.

4.Электронная микроскопия.

64

вивается длительная невосприимчивость к данному серовару лептоспир. Однако иммунитет типоспецифический, поэтому возможно повторное заражение другим сероваром лептоспир.

Методы изучения морфологии лептоспир:

1.ТПМ. Лептоспиры плохо окрашиваются анилиновыми красителями, потому их изучают обычно в живом состоянии при микроскопии нативных препаратов в темном поле зрения (рис. 46).

Однако при микроскопии исследуемого материала (крови, мочи, ликвора, растертых органов трупов) иногда увидеть лептоспиры в темном поле не удается. Поэтому лучше исследовать надосадочную жидкость центрифугатов исследуемого материала.

2.Лептоспиры по Романовскому–Гимзе окрашиваются в розовый цвет.

Рис. 46. Лептоспиры при ТПМ

Морфология актиномицетов. Актиномицеты — Грам+, полиморфны: чаще образуют нити диаметром 0,2–2 мкм и длиной до 600 мкм, иногда встречаются тонкие, прямые или слегка изогнутые палочки 0,2–1 × 2,5 мкм, а также кокковидные формы (рис. 47, 48). Капсул не имеют, неподвижны. Ультраструктура актиномицетов не отличается от истинных бактерий, однако в составе ПГ КС обнаружены сахара, отсутствующие у других прокариот (галактоза, арабиноза, ксилоза), миколовые кислоты и большие количества жирных кислот.

66

человека вызывает A. israeli. Случаев заражения человека от больных людей или животных не описано. Чаще происходит эндогенное развитие заболевания в результате перехода актиномицетов из сапрофитического состояния в паразитическое. Этому способствуют иммунодефицитное состояние и воспалительные заболевания слизистых полости рта, респираторного тракта и ЖКТ. Для профилактики актиномикоза важно соблюдать гигиену полости рта, своевременно лечить зубы, воспалительные заболевания миндалин и слизистых оболочек. Возможно также экзогенное инфицирование при заносе актиномицетов из окружающей среды в ротовую полость. Инкубационный период при актиномикозе колеблется в широких пределах и может доходить до нескольких лет.

В месте внедрения инфекции развивается воспалительный очаг и образуется гранулема — очень плотный и почти безболезненный инфильтрат, состоящий из макрофагов и актиномицетов. Гранулема прорастает в окружающие ткани, в результате чего в процесс вовлекается кожа: она становится цианотичнобагровой. Когда гранулема нагнаивается, ее центр подвергается некротическому распаду, а при вскрытии абсцесса вначале появляется флюктуация, затем образуются длительно незаживающие свищи. Из свищей выделяется гной, в котором содержатся друзы — белые или желтые гранулы, диаметром 1–2 мм. Затем происходит фиброз (рубцевание) гранулемы. В образовании нагноений играет роль вторичная, преимущественно стафилококковая, инфекция.

Актиномикоз характеризуется поражением различных органов и тканей.

Основные клинические формы актиномикоза:

1.Шейно-челюстно-лицевой встречается наиболее часто (обычно после экстракции зуба), имеет относительно благоприятное течение по сравнению с другими формами. Актиномикозный процесс может захватывать щеки, губы, язык, миндалины, трахею, глазницы, гортань.

2.Торакальный (органов грудной полости). Начинается постепенно: слабость, субфебрильная температура, кашель, вначале сухой, затем со слизистогнойной мокротой, нередко с примесью крови (мокрота имеет запах земли). Затем развивается бронхит. Течение тяжелое, без лечения исход летальный.

3.Абдоминальный. Первичные очаги локализуются в илеоцекальной области и в области аппендикса, это нередко имитирует аппендицит или непроходимость кишечника, затем поражаются другие отделы толстой кишки. Распространяясь, инфильтрат захватывает другие органы: печень, почки, позвоночник, может достигнуть брюшной стенки. Без этиотропного лечения летальность достигает 50 %. Вторичные поражения при абдоминальном актиномикозе могут распространяться на мочеполовые органы.

4.Актиномикоз костей и суставов возникает в результате перехода актиномикозного инфильтрата с соседних органов либо является следствием гематогенного заноса. Нередко процессу предшествует травма. Описаны остеомиелиты костей голени, таза, позвоночника, поражения суставов. Несмотря на выраженные костные изменения, больные сохраняют способность передвигаться, при поражениях суставов функция серьезно не нарушается.

5.Актиномикоз ЦНС.

68

6. В образовании поддесневого зубного камня участвует еще один вид ак-

тиномицетов — A. viscosus. Благодаря мицелярной структуре клетки A. viscosus выполняют роль матрикса, в котором задерживаются другие микроорганизмы и остатки пищевых волокон, подвергающиеся впоследствии кальцификации. A. viscosus также способствует возникновению кариеса корня зуба.

Сапрофитные актиномицеты (стрептомицеты) являются продуцента-

ми антибиотиков-аминогликозидов.

Методы изучения морфологии актиномицетов:

1.Наибольшее диагностическое значение имеет обнаружение актиномицетов в гное из свищей (см. рис. 48), в друзах, в биоптатах пораженных тканей.

Друзу извлекают из патологического материала петлей, помещают в каплю воды на предметное стекло, слегка придавливают покровным, затем вводят под стекло каплю гематоксилин-эозина и микроскопируют с сухим объективом. При микроскопии в центре друз обнаруживается скопление нитей мицелия в виде лучей, радиально отходящих от центра, а по периферии иногда наблюдаются колбовидные вздутия. Центральная часть друзы окрашивается в синий цвет, а колбы — в розовый.

Можно использовать ФКМ.

2.При приготовлении мазков из колоний актиномицетов, выросших на плотной питательной среде, иглой отделяют небольшой участок колонии и помещают в каплю воды на предметном стекле, покрывают вторым предметным стеклом и слегка прижимая, раздавливают мицелий. Из полученного материала обычным способом (петлей) готовят мазки, окрашивают по Граму или Цилю– Нильсену.

69