3 курс / Фармакология / Фармакогностическое_исследование_семян_льна_и_листьев_стевии_как
.pdf
41
Методика количественногогонечл определениязалин суммыйкиляноп флавоноидовскилово в стевиировта атенмирэксп листьях
ровтсДля нотецаколичественного никтвежопределения имакзнрпсуммы ивалзоьпсфлавоноидов в ывартизвлечениях ихстриз ынрстостевии миндолистьев йокжлдписпользовали яимхметод идерсдифференциальной кочупспектрофотометрии
[14, 15, 41, 57, 70, 71, 152, 161]. |
|
|
|
|
|
|
аксвенОколо 1,0 г (ылерфктоточная таʜемирпϲкэнавеска) aivetsизмельченного воестчилксырья помещалилажредос |
в ixколбу анилсо ниторак |
|||||
шлифом икдтоем вместимостью 250 тркепс мл, |
|
еындивосук прибавляли |
100 иладюбн мл ицкело спирта твец различной |
йовниеартс |
||
концентрации (40%, 70% и 95%) и |
охсувзвешивали |
с укнстиалппогрешностью |
± 0,01 г. енаб |
|||
Колбу апугрприсоединяли к еинчтобратному |
евитсхолодильнику, |
ицнерфокнагревали ерутапмна |
торсокипящей |
ыремак |
||
водяной имадлкунор бане юунчоляб при иткоабр температуре |
90°C в хывниткарсэ течение |
45 йещюудлс мин, еикснцдм периодически |
водизкгл |
|||
встряхивая ексчгиолртмдля танемирпскэсмывания тегаисодчастиц |
иктелсырья еоксвынсо йовнитмьлапстенок. |
иетрмофкспИзвлечение яинелдрпофильтровали еищюудлс |
||||
через окинчтсбумажный гоевсфильтр, раствосмоченный еинажрдостем ицакерже стеуднмокрспиртом, ваесгуотбрасывая илдовпервые 10 вотнаир мл асчфильтрата (атсераствор А). елсопИзмеряли инактоптическую nokiплотность 1 мортеаидраствора илетзакопчерез 30 хуздвоминут илвашусыпосле евитсприготовления. 2 емусмл ватсечилокраствора А сталиркпомещали в нвкиорбудмерную иланколбу еинваодлс вместимостью 25 астворммл, водыприбавляли 5 проявлниемл гладкуюалюминия истемыхлорида жилкараствора 3% в опрдлние спирте 70% и артемидчерез 10 нилвамин 2 ослкапли йынветсчакразведенной аньлкислоты азенрбоуксусной. тсемОбъем хвыоенпрти
раствора рга доводили |
стелико спиртом |
олсик этиловым (40%, |
70% |
95%) ваинрс до инвашемрп метки, |
ицкартсэ |
|||
перемешивали и оставлялиетачс |
наиктел 30 |
минутезилан |
(растворанетсл |
Б). |
|
|
|
|
отсан Оптическую |
йикстерб плотность |
гондво полученного анветсрдуго |
раствора |
Б ыдирахслоп измеряли осн на |
ысецорп |
|||
спектрофотометре еинвашркопри ixдлине окнешапволны 400 уробвынм в лутокювете с еынмвростолщиной ымуискаслоя 10 дрогимм, мыньлаоицр используя растворевитс сравненияатьлзуер дляеинчулоп испытуемогонтвеж раствораилсона .
силажрывСодержание еищюудлссуммы яинваымсфлавоноидов в aivets процентах (Х) в йвогенрлхпересчете нртоипна хыьлетичазн
цинарозид и абсолютномонебчу сухоееьшлоб × сырьееинлдрпо0 × 100вычислялийынльаоицмэхсп × 25 × 1 ×погоксдрлеб 100формулеадлсу × 100:
Х = 0 × × 2 × 1 × 50 × 25 × (100 − )
щательногде D – зафкϲирʙноптическая сноплотность стемыиспытуемого измльчныераствора; Dолсик 0 – оптическаяхывниткарсэ плотностьйотэ раствораваесгу ГСОяанёшупо цинарозидаавониел ; имареозm0 – массаыпугр ГСОымихнерап цинарозидараство , г;
m – ропческихмасса мдцнкиесырья, г;
W – потеряаджк в массеьютсоиевм прииктел высушиваниихынчетолк , %.
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
42 |
|
|
|
|
|
2) С использованиемлезур |
удельноговодизкгл |
показателятаолсик |
поглощениясырк |
рутинаолсик |
. |
||||||||||||
иктелСодержание халедрпсуммы епокамрффлавоноидов в оршпересчете иявлорпна тоыркцинарозид в еичазнпроцентах |
|||||||||||||||||
(Х) вычислялиумгас |
|
Х = |
|
А ×а100 × 25 × 100 |
|
|
|||||||||||
пооднтиарк формулемортеаид |
: |
350 × × 2 × (100 −W) |
|
|
|
||||||||||||
гдесоир : |
Aотсан – оптическаянзирт |
|
|
|
|
||||||||||||
|
|
|
|
|
плотностьартемид |
растворайинаводелс |
; |
|
|
|
|
||||||
|
350 – хывниткарсэудельный мынчоелщпоказатель готнсликпоглощения иторпкомплекса цстиачцинарозида с яиназд |
||||||||||||||||
алюминия хлоридомояемрвп |
приенилд |
длинеиетрмофксп |
волныстейокдиж |
400 нмiloc ; |
|
|
|
|
|
||||||||
|
амодте |
– однавеска сырьяйынрве |
, г; |
|
|
|
|
|
|
|
|||||||
|
Wраство |
– влажностьямиослу |
сырьяокюдру |
, %. |
|
|
|
|
|
|
|
||||||
Методика тслонйколичественного бктмирваопределения ыдержвалисуммы myxocusфенилпропаноидов в липдостевии признако листьях
опрдлениДля устьица количественного опдани определения прходил суммы прсченых фенилпропаноидов в между извлечениях рхидно из лбдева стевии очищеная листьев дной использовали оста метод дектировал прямой помещали спектрофотометрии [49, 58, 69].
госкраднСодержание яхвиослусуммы амгртохфенилпропаноидов в йонльаицмэхсппересчете ытолсикна окешрчхлорогеновую гончешик
кислоту и беликоабсолютно многихсухое чтвеносырье в листпроцентах×25×100×100(Х) ществычисляли ослепо ланидоформуле:
Х = ×497×0,5×(100− )
гдеялетирапс , D – оптическаяйиксечтарб плотностььетсил испытуемогооракм раствораяинелдпо ; m – массаюьлец сырьяорданкел , г;
W – рсоденияпотеря в сбормассе отическапри ужлоавысушивании результамисырья (разтиявлажность), %;
497 – удельныйосн показательымус поглощениягондй хлорогеновойьтсонвикефэ кислотыьяхтсил прихывнитка 330 нмвкутозаго .
Методика торыколичественного даныопределения итмесуммы иактнойдитерпеновых методикагликозидов в стдарны стевии семянлистьях
стенкамиДля летиюколичественного дфрециальнойопределения радкевичсуммы нализедитерпеновых зимнгликозидов в имеют извлечениях признка из играют стевии евности листьев цнрозида использовали цетона метод метод прямой бственго спектрофотометрии [10, 99].
Рекомендовано к изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/
43
едапзОколо 1,0 г (ындвиточная иявлорпнавеска) авонитмьлпизмельченного юускечитпосырья ямвиослупомещали в окнечсколбу росбсо еиксчдотм шлифом однтиарквместимостью 250 уксвеанмл, еинажрдосприбавляли 100 евитсмл теракхспирта 95% и рствовзвешивали с атечсрпогрешностью ± 0,01 г. snaremolgКолбу seicpприсоединяли к йгварпобратному енабхолодильнику, рк нагревали наеымврос кипящейеьшлобиан водяноййоничле банетеажро пригондво температурейоксир 90°C в течениеьесил 45 минутонведрп , гоензелпериодически йынжамубвстряхивая ыдионапрлефдля ыдинвоалфсмывания веатсочастиц илансырья хищюуедслсо еинлдрпостенок. гоственрадуКолбу с имытянрп содержимым окстиуискусственно водинапрлефохлаждали йынсебдо янмескомнатной йыбалстемпературы. тисонебПосле еичазн охлаждения ватсещсодержимое амусколбы азилнохлаждали гонрялипакдо икшерчкомнатной munil температуры и анотец доводили 95% имялосэтиловым воскспиртом хындивоалфдо еоьнлаирткбметки и ылаиретмперемешивали. зыитрепскэИзвлечение яанёшупо фильтровали мищюуделсопчерез опаркбумажный яинечзвлфильтр, смоченныйояемрвп йонбркимтатем однтиаркже онтяпспиртом, еывонотбрасывая евитспервые 10 олсичмл гоьнтеластирфильтрата (екидотмраствор А). ицнерфокИзмеряли олкоптическую ьющомпплотность 1 яинелпрк раствора илавортьфчерез 40 амзеонрчминут нотецапосле тюяремзиприготовления. 0,5 тсачмл анраствора А йиксылабрпомещали в ахазцрбо мерную говоеаколбу торсовместимостью 50 аьфлмл, ебчуразбавляли в 30 иетрмофкспмл стюачизлрспирта 95%. иланОбъем атсо раствора мортеаиддоводили дзиоранцспиртом андвеорпэтиловым 95% йлтеирвосадо имыярпметки и йискечфагролбоставляли хыьнлатркепсна 30 sinelahcминут (растворюинелдпо Б). ымусОптическую ымусплотность сторполученного хынещсаилопраствора Б хынаворзилцепсизмеряли нотиемна воестчилк спектрофотометре соруепри йиксечтландлине окнвеирволны 203 мотэнм в ктосукювете с еоксчгиламрфтолщиной тежомслоя 10 тсонжавлмм, гончиазлр используя растворюунелдпо сравненияткобзр длягото испытуемогойелбтс раствораехтр [4].
Содержаниезилс акимед суммы окилеб дитерпеновых йонищлт гликозидов в йикснялоп процентах (Х) в моьнлтеисар
пересчете наиктел стевиозидеикчголб и абсолютноицкер × × 100сухоеяинеарх × 50сырьейикьлопаврт × 1 ×вычисляютяьрыс × 100 поублок формулетисонеб :
Х = 0 × × 20 × 0,5 × 25 × 25 ×Р(100 − )
софиягде D – аствормоптическая семянплотность введняиспытуемого бетскийраствора;
Dйоджак 0 – оптическаяьетсил плотностьеинваодлс раствораваедуб рабочегоатоеп образцаакитсрех ; ноицдлваm0 – массанептс рабочегоинешотс образцанилва , г;
m – слекцимасса тевисырья, г;
W – потерямотэ в массеалс притуослик высушиваниихынчилзар , %.
Методика оптичесаколичественного vitroопределения фстеридокаротиноидов в полиащеныстевии картноиды листьях
остаДля пргвайколичественного рисункеопределения днмикакаротиноидов в сырьеизвлечениях соденийиз фзикосырья эстракцистевии нераствоимйиспользовали прмышленосспектрофотометрический стоящийметод. спирнтаДля длинеэтого 5 г междунарлистьев опрдеяли
44
стевии (яинелдрпоточная inotreb навеска, воестчилкстепень ынечтмоизмельчения – 1 лидворпмм) охсупомещали в ыванокшрпколбу зьилс вместимостью 100 еиназдмл и иетрмофкспэкстрагировали с 25 моркмл йистенаргексана иляедрпопри стимдвозрпперемешивании 1,5 ч. авотпиЗатем йтосанфильтровали ювуогенрлхчерез лизвопбумажный кчсоуфильтр. ытолсикОтбирали 2 илдоврпмл акитслпизвлечения
вцетковмерную вмеиостьюколбу долина 25 добренымл и слдованиедоводили зучниегексаном белкодо оверстиметки. такимОпределяли ислдуемых оптическую мсаплотноcть эсрктана орекциспектрофотометре спкфометриСФ-104 цантофлвипри осавляетдлине травыволны 450 кромнм,
воптическуюкювете с налитолщиной клвидноеслоя 10 помещалимм, льнаотносительно растительнгогексана. сикагелвуюПараллельно данго относительно наукводы различныхочищенной мслаизмеряли змерялиоптическую бычномплотность рспективыраствора ысушваниРСО
ювуогенрлхкалия ятвизарбихромата, который тарднсготовили |
в вуатсосоответствии с хаборпФС–42–1730–86, а |
|||||
именно: 0,3600 г (точнаягоаемчузи |
навескаскчгиолбра |
) калиярство |
бихроматаслвазопи |
растворялихынчетолк |
в водеотнарипс |
в мернойасерт |
листаколбе змеравместимостью 1 л и прделахдоводили микрообъем блогческидо содржаниеметки отлчиеводой; ситораствор покзателипо азмерыокраске
хвыториспсоответствует окзифраствору, |
тсдерсодержащему |
0,00208 |
апугрмг β-каротинаоеразм |
в 1 яинечулопмл. В стеузирках |
|||||||||||||||
качестве растворайоньлаеим |
сравнениятомеваижы |
использоваливатсйо |
водухищюазурбоесл |
очищеннуюсн |
[81]. |
|
|||||||||||||
ртнецСодержание гоьнтеластирсуммы |
росбкаротиноидов в йлтеирвосасырье атлиемстевии (Х) в аньлпересчете иголнхетна β - яинелдрпо |
||||||||||||||||||
|
|
|
= 1 |
× 0,00208 × 25 × 25 × 100 × 100 |
|
|
|||||||||||||
каротин в мгебнаутр % рассчитывалиеинаждос |
поеынчилсам |
формулемодте |
: |
|
|
|
|
|
|
|
|||||||||
гдедотем |
Dеиншотс 1 – оптическаялсик |
|
D |
× m × 2 × (100 −W) |
|
|
|||||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
плотностьылостериф 0 |
испытуемогоахмроф |
растворанугр ; |
|
|
||||||||
Dтангерскэ 0– оптическаяхынриж |
плотностьрактоф |
раствораогвникс |
РСОанитур |
калияйистенар |
бихроматаулсам ; |
|
|||||||||||||
0,00208 – имекглколичество β-аросбкаротина, узиракхмг, в ацтьисурастворе, гончиазлрсоответствующем тркепспо йонвс |
|||||||||||||||||||
окраске растворумонд |
РСОоякдуелш |
калияйоскечиганр |
бихроматавотнаир |
; |
|
|
|
|
|
|
|
|
|||||||
m – навескаазил |
|
шротатюачервс |
, г; |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||
Методика количественного определения каротиноидов льна посевного семян
Для количественного определения каротиноидов в льна семенах использовали спектрофотометрический метод [81, 99]. При анализе снимали спектр раствора масла в петролейном эфире в интервале 400-500 нм, вычисляли оптическую плотность при длине волны наиболее интенсивного максимума и определяли содержание каротиноидов в граммах в пересчете на β-каротин
Рекомендовано к изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/
45
Методика опрделениколичественного пректопределения методысуммы идельсвуютритерпеновых верзилина сапонинов в тгостевии видомлистьях
белыхДля оествиколичественного рискойопределения необхдимсапонинов в образцизвлечениях запхиз высокимсырья истемой стевии банеиспользовали блочкиспектрофотометрический кличственгометод, результатооснованный фланидона общейреакции с виетс концентрированной миескчтрофп кислотой ониелтс серной, с ьнед последующим оякдуелш измерением ицаредф оптической азилнплотности [105]. гоьнтеластирПараллельно мрафизмеряли евитсоптическую яьрысплотность акимед раствора атсоРСО ызокюлголеаноловой имытнсзвекислоты в яьрысаналогичных йыбалсусловиях тсилэксперимента. однтиарк Получены ымусспектры мазорбпродуктов апугрреакции ндвосуммы ексчгиолртмтритерпеновых йонемрвссапонинов ейщбо стевии и стандартавеато олеаноловойстияемрвп кислотыолсам с серноййынтицома кислотойуан [4, 105]. аникру
змльченостиСодержание результатысуммы кчноститритерпеновых условисапонинов в покзателилистьях сравнеиястевии в рзово пересчете йикстербна аневлтсдрполеаноловую ялопкислоту и лесамабсолютно юунермсухое окюдрусырье в еичлтопроцентах (Х) йелбтс
вычисляли поеинарх формулерство |
: |
× 0 ×250×25×1×100×100 = |
× 0×500000 |
|
||||||||||||||
|
|
|
|
Х = |
|
|||||||||||||
|
D – оптическаяйнтыᴨ |
0× ×5×20×1×25×(100− ) |
|
0× ×(100− ) |
|
|||||||||||||
гдемишьне |
плотностьводил |
испытуемогоащтселб |
раствораватсо ; |
|
|
|||||||||||||
Dмырк 0 – оптическаяказнирп |
плотностьторсо |
растворамаство |
РСОюицаутс |
олеаноловойамгртох |
кислотыолси |
; |
||||||||||||
m – массагонветсчак |
сырьямынежарв |
, г; |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||
mтюувсбоп 0 – массаицзано |
РСОеинажрдос |
олеаноловойяинечьлзм |
кислотыгонечьлзми |
, г; |
|
|
|
|
|
|||||||||
W – влажностьйоньлетирд |
сырьяыйтвенчилок |
, %. |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||||
|
|
|
|
|
|
|
2. |
Фотоэлектроколориметрия |
|
|
||||||||
Количественный анализ токоферолов производили по Эммери - Эпгелю, то есть по окрашенным продуктам, которые образуются при восстановлении токоферолами хлорного железа и последующего взаимодействия двухвалентного железа с α,α1-дипиридилом [31, 99]. Оптическую плотность окрашенного раствора при длине волны 520 нм.
2.2.5. Гравиметрические методы
Методика количественного определения суммы полисахаридовв льна семян
Для количественного определения суммы полисахаридов в семенах льна использовали методику ГФ РФ XIV издания [36].
46
Методика определения слизеобразующей способности льна семян
Для оценки динамики гидратации семян льна использовали 1- миллилитровые медицинские шприцы, в которые помещали семена объемом 0,30 мл и заливали дистиллированной водой до 1 мл. Затем через временные промежутки: 1, 2, 3, 4, 24, 48, 72 часа - проводили определение степени слизеобразования по увеличению объема выборки семян каждого сорта. Количественное определение гидратированных полисахаридов осуществляли взвешиванием семян до и после помещения в воду [179].
Методика определения влажности лекарственного растительного сырья
Влажность лекарственного растительного сырья определяли фармакопейным методом ГФ РФ XIII, ГФ РФ XIV [33, 35].
Методика определения экстрактивных веществ
Методика используется для определения содержания экстрактивных веществ в лекарственном растительном сырье, которые в последующем подвергаются процессу однократной экстракции по методике ГФ РФ XIII
издания [33, 56, 78].
2.2.6. Капилярный электрофорез
Изучение аминокислотного состава листьев стевии и семян льна проводили методом капиллярного электрофореза [80].
Навеску пробы № 1 массой (100,0±0,2) мг помещали в виалу для гидролиза, добавляют 10 см3 соляной кислоты, герметично закрывали завинчивающейся крышкой и перемешивали.
Навеску пробы № 2 массой (100,0±0,2) мг помещали в фарфоровую чашку, добавляют 5 см3 свежеприготовленной окислительной смеси и выпаривали при постоянном перемешиваний в струе теплого воздуха при температуре 60 ºС досуха. Сухой остаток количественно переносили в виалу для гидролиза, используя 10 см3 соляной кислоты. Виалу герметично закрывали завинчивающейся крышкой и перемешивали.
Рекомендовано к изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/
47
Навеску пробы № 3 массой (100,0±0,2) мг помещали в виалу для гидролиза, добавляли 5 см3 горячего раствора гидроксида бария. Виалу герметично закрывали завинчивающейся крышкой и перемешивали.
Устанавливали виалу в сушильный шкаф. Гидролиз проводили при температуре 110 º С в течение 14-16 ч.
Подготовленные для анализа растворы переносили в пробирки и центрифугируют в течение 5 мин при скорости врощения 5000 об/мин.
Подготовливали капилляр к работе. Для каждого раствора регистрировали не менее двух электрофореграмм.
Массовую долю каждой =аминокислоты100× × ×(СX, %) вычисляли по формуле:
гидр кон изм
1000× × ал ,
X – массовая доля аминокислоты в пробе, %;
Сизм – измеренное значение массовой концентрации аминокислоты в подготовленном растворе, мг/дм3;
m – масса навески пробы, мг;
Vгидр – общий объем гидролизата, см3;
Vкон – объем конечного (анализируемого) раствора, см3;
Vал – объем аликвотной порции гидролизата, взятый для получения ФТК-производных, см3;
100 – множитель для выражения результатов в процентах;
1000 – коэффициент согласования размерности единиц измерения объема.
2.2.7. Титриметрические методы
Методы иктсреах титриметрии нептс использовали отнюлсаб для йвотак установления avlf содержания вонипас свободных ктопорганических говнисеткислот с йцзиопмкпомощью дзиоранцалкалиметрии, ыьнлтеиапсвосогласно ьломметодики ГФадви РФатисрвену XIVнорф изданиялумроф [36].
48
2.2.8. Определение физико-химических констант жирного масла
Такие схрафизико-россихимические лкарственыхконстанты, ркоендациямкак аблюдниейодное прсхождениячисло, мпатуреэфирное аблюдениячисло, обадали перекисное лбночисло, прводилчисло зоныомыления, расительныиндекс пензаокисленности, прямыхустанавливали гласно методами, ывленаяпринятыми таблицеГФ гаврисюкРФ россиXIII профлатческихиздания и в пдготовленуюсоответствии с дтермнациГОСТ стевиРИСО
3961–2010 [26, 30, 33, 35, 123].
Определение зучние неомыляемых colpix веществ, качстве летучих оставлени веществ, здровых примесей albus парафина, ужловавоска, форму смоляных и слойминеральных эксргентамасел, листьецианиды, фланидосинильная ударственго кислота кличственгоустанавливали суаметодами, одинпринятыми можетГФ влнияРФ йдноеXIII мтаболческхиздания [33, 35].
2.2.9. Микробиологические методы анализа
Индикация йонльаицмэхсп антимикробного ебнаутр эффекта ьнед сока, еиншотс настоя и иголнхет спиртового хыьнлтеисар экстракта изцан лекарственногоювуогенрх сырьяиневлато стевиииетрмофкп проводиласьмеинщлоту путемlifbros диффузииицакер в агаряьрыс наватсо гоьнтелси питательной еонмврс среде с цельюинвашусы определения юазурбо чувствительности икашч микроорганизмов к янмесантибиотикам. В онсаглэксперименте иреткиспользовали 10 аньлчистых йокентс культур евыолсич микроорганизмов стимдвозрп различного тюеми таксономического аклижпроисхождения: акидотем
Escherichia компентcoli, прдолжающиMyxococcus редкоspecies, пензаStaphylococcus ществspecies (требованиямalbus), сырьеBacillus сушильном species (льнаanthracoides). волскиПосев в пмощьюопытах глкзидовосуществляли акивноспрямыми органческихрадиальными стеви штрихами и методкисплошным формыгазоном, жирныеколичество сумывносимого в цветачашки времяПетри листье материала растительнгонаходилось главена кислтнгоуровне 102...103 пршинаколониеобразующих паралельноединиц. В сдячий лунки аксительнойдиаметром 8 нмодлрующиймм синеговносили укзанияпо 0,10 витамнмл общейнастоя, потехинаспиртового птанияэкстракта полаили нализе сока. методкиКонтроли: I - выржалсстерильная reubdina вода, пигментовII - 95 % жветкинэтиловый сортоспирт, ктуальныхIII - стевибез фильтр добавления хлоридаизвлечений и рбалыскийконтрольных цльныежидкостей. нализеКультивирование групаосуществляли рутинапри пврнотемпературе 36°С. успешноУчет болерезультатов рамнпроводили гордевачерез 16-18 исплзочасов давлние путем фдева определения харитон диаметра дфрециальной зон пвряемо задержки (скво подавления, минут угнетения, кличственго отсутствия) жирныхроста, чрехарактера выбранроста оставилпо сдвиштриху. имеютОпределение тошениантимикробного спьзовали действия звлченияпроводили в листьесравнении расительныхинтенсивности кнтролроста содержаниюизучаемых сменахкультур в покзал присутствии и в ртоотсутствии содержанизвлечений кентавриз цнрозидсырья пглощениястевии [21, 33, 65, 79, 83].
Рекомендовано к изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/
49
2.2.10. Фармакологические методы анализа 2.2.10.1 . Исследование влияния настоя из сбора «Стелинол» на
выживаемость и уровень глюкозы крови крыс с экспериментальным сахарным диабетом
Для оценки влияния настоя на основе растительного сбора "Стелинол" на состояние углеводного обмена у животных с сахарным диабетом использовали пероральный глюкозотолерантный тест с последующим определением в крови уровня глюкозы [18, 90, 126].
Исследование проводили на базе ООО НПП «Белкор». Испытание хыьнлтеисар проводилось ирбсна 72 инептснелинейных еинлдрпобелых юуньлискрысах тсилженского йонбркимтапола нугрмассой 180-280 г, юускечитпосодержавшихся в йинечзвлстандартных воестчилкусловиях есамвивария яьрыспри йоничлвесвободном ветсчакдоступе к аксечтипо воде и ссиорпище. мрофниВсе муискаманипуляции с оньлетирвадпживотными госевнпосуществлялись в аксномрсоответствии с кнстиалпПравилами ватсоЕвропейской мбсопконвенции лидворппо монветсраклзащите мыволитэпозвоночных ымусживотных, акнецо используемых илважурнбо для такрсэ экспериментальных и йовтрипс иных однтиарк научных анипскодр целей и вкутозаго были дво одобрены локальнымонтяп этическимыдеиахтр комитетомьʜед .
Животные первой группы (N=18) получали стандартный рацион в течение всего эксперимента (45 суток) и являлись интактными. Крысам второй группы (N=18, контроль) моделировали сахарный диабет аллоксаном, вводимым в дозе 137 мг/кг однократно внутрибрюшинно после предварительной 24-часовой депривации пищи при сохранном доступе к воде [100]. Животным третьей (N=18) и четвертой (N=18) групп проводилась фитотерапевтическая коррекция углеводного обмена водным извлечением из фитокомпозиции «Стелинол»: крысам третьей группы «Стелинол» вводили за 1 сутки до моделирования экспериментальной патологии и далее на протяжении всего эксперимента; крысам четвертой группы «Стелинол» вводился, начиная с 1-ых суток от начала формирования экспериментального сахарного диабета и до окончания эксперимента.
50
2.2.10.2 . Исследование психоэмоциональной активностинастоя из сбора «Стелинол
Оценивали сырьявлияние стевинастоя пензана близкгооснове растительного сбора расит «Стелинол» феольных на фрмакенойпсихоэмоциональный лстенафон хактеркрыс [18, 90, 126].
меиншотс Проводили ьютсоиевм исследование нвкиорбуд двигательной и ытрдвак психоэмоциональной еичлто активности иктелкрыс в йещяпиктесте «иневлатсоОткрытое окиньлемполе» [129]. говоториспСогласно хынрижметодическим йонльатемирпскэ рекомендациям, нлвонами ацилбтиспользовалась аторепквадратная еинчзукамера (1х1 м) йонралпиз ыртоктемного ыамгроп пластика с хыьнеталнижней яиетгнустенкой, окужрасчерченной трипсна яьрысквадраты (10х10 есопсм), с акнецобоковыми отсан стенками хевс высотой 50 тсещ см, в нижней части которых имелись отверстия диаметром 0,8 см, предназначенные для изучения норковых реакций. одиналф Освещение соруе производилось с евитс помощью ссиор лампы охсу мощностью 75 воск Вт, ыьнлтеиапсво находившейся мвогазона ыртоквысоте 1,5 м ухитршнад ьетсилцентром одиналфполя. В еищюудлсопходе 3-ыневлоатсуминутного илавортьфтеста огнбркимтана ояемрвпоснове емъбовизуального ьтатылезурнаблюдения стиояемявлрпрегистрировались мортеаидследующие ынловпоказатели: ыдирахслоп количество лумрофпересеченных йволеансторон хынветсраклквадратов йоникамеры (в аньлцентре йыньледуарены и икдтоемна хяинелдрпо периферии) – ьяхтсилгоризонтальная мидхбеонактивность, еывнисгропвставание онветсукина онрсфзадние омзиганрклапы (оякелбобычные и йыбалспристеночные тсемстойки) – овалетствертикальная вокюдруактивность, йыбалснорковые ьерысреакции – яьрыс исследовательская активностьйицкер [18, 126].
Повышение горизонтальной и вертикальной активности расценивалось как показатель увеличения стрессоустойчивости животных в новых для них условиях, которые воссоздает тест «Открытое поле». Количество эпизодов груминга, дефекации и замирания, а также длительность эпизодов замирания расценивались как показатели эмоционального состояния крыс: возрастание данных показателей интерпретировались как увеличение тревожности и беспокойства, снижение - как показатель анксиолитического действия исследуемого фитопрепарата [18].
2.2.10.3. Изучение острой токсичности настоя из сбора «Стелинол»
Оϲтрую хынатуерилтокϲичʜоϲть ониелтснастоя еискчмхобсбора «очелпСтелинол» ьяхтсилизучали ʜа 20 ыдотембелых атсил беϲпородʜых рго полоʙозрелых ижусл крыϲах раство мужского йонулп пола илватычср маϲϲой 200-220 г. лесам
Рекомендовано к изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/