- •ТЕХНОЛОГІЇ МІКРОБНОГО СИНТЕЗУ
- •Тема 2. Визначення активності
- •ВИЗНАЧЕННЯ АКТИВНОСТІ АНТИБІОТИКІВ
- •За одиницю антибіотичної активності бензилпеніциліну прийнято
- •При наявності антибіотикав в хімічно чистому вигляді умовні одиниці біологічної активності виражають в
- •Відповідність одиниць біологічної дії ваговим одиницям для деяких антибіотиків
- •При вивченні умов утворення антибіотиків і дослідженні впливу різних факторів на біосинтез антибіотиків
- •Антибіотичною продуктивністю організму називають кількість
- •Визначення антибіотичної активності мікроорганізмів
- •Визначення антибіотичної активності мікроорганізмів методом перпендикулярних
- •Метод паперових дисків
- •Недолік методу:
- •Метод агарових блоків
- •Визначення антивірусної дії антибіотиків
- •Метод з використання листків рослин
- •5. Якщо циліндр містить антибіотик – некрози не утворються
- •У разі культивування м/о на рідкому середовищі - його змішують з вірусом і
- •Визначення протипухлинної дії антибіотиків
- •Для контрольних тварин замість досліджуваного препарату використовують фізіологічний розчин. Через 10 днів мишей
- •Використання мікроорганізмів для пошуку протипухлинних антибіотиків
- •Після оброблення клітин стафілококів, кишкової палички та дріжджів було отримано мікроорганізми, коефіцієнт дихання
- •Серед усіх пухлин рослин тільки
- •Для скринінгу протипухлинних речовин використовують індукцію
- •Використання моделі індукції
- •Методи кількісного визначення антибіотиків
- •Метод послідовних розведень
- •Методом послідовних розведень отримують достовірні результати у разі:
- •Для визначення активності антибіотиків на твердих поживних середовищах найбільш популярний метод радіальної дифузії
- •Суть метода:
- •Метод з використанням металевих циліндрів
- •4. В циліндри кожної чашки вносять по 0,1 мл стандартного розчину і розчину,
- •Метод з використанням металевих циліндрів
- •Метод з використанням лунок в агарі
- •Метод з використанням лунок в агарі
- •Метод з використанням дисків фільтрувального паперу
- •Схема метода
- •Турбідиметричні методи
- •Далі буде!
ТЕХНОЛОГІЇ МІКРОБНОГО СИНТЕЗУ
ЛІКАРСЬКИХ ЗАСОБІВ
Лекцій – 38 годин, лабораторних робіт -38, диф. залік
1
Тема 2. Визначення активності
антибіотиків
Одиниці біологічної активності антибіотиків3
Визначення антибіотичної активності мікроорганізмів9
Визначення антивірусної дії антибіотиків14 Визначення протипухлинної дії антибіотиків19
Методи кількісного визначення антибіотиків
2
ВИЗНАЧЕННЯ АКТИВНОСТІ АНТИБІОТИКІВ
Одиниці біологічної активності антибіотиків
Величину біологічної активності антибіотиків
(протибактеріальної, антифунгальної і т.ін.) зазвичай виражають в умовних одиницях, що
містяться в 1 мл розчину (од/мл) чи в 1мг препарату (од/мг). За одиницю антибіотичної активності приймають мінімальну кількість
антибіотика, здатну пригнічувати розвиток чи затримувати ріст певної кількості клітин стандартного штаму тест-мікроба в одиниці об’єму поживного середовища.
3
За одиницю антибіотичної активності бензилпеніциліну прийнято
мінімальну кількість препарату, здатну
затримувати ріст золотистого стафілокока Staphylococcus aureus
(штам 209) в 50 мл поживного бульйону.
Для стрептоміцину одиниця активності буде іншою: мінімальна
кількість антибіотика, що затримує ріст E. coli в 1 мл поживного бульйону.
4
При наявності антибіотикав в хімічно чистому вигляді умовні одиниці біологічної активності виражають в одиницях маси. Так 1 мг чистого стрептоміцину еквівалентний 1000 од біологічної активності. Відповідно 1 од активності даного антибіотика еквівалентна 1мкг чистого стрептоміцину. Нині випадків кількість стрептоміцину виражають в мкг/мл чи мкг/мг.
5
Відповідність одиниць біологічної дії ваговим одиницям для деяких антибіотиків
|
Маса 1 од., |
Назва антибіотика |
мкг |
Бензилпеніциліну натрієва сіль |
0,6 |
Оксацилін (кислота) |
1,0 |
Стрептоміцин (основа) |
1,0 |
Стрептоміцин (сульфат) |
1,25 |
Хлортетрациклін (гідрохлорид) |
1,0 |
Поліміксин В |
0,1 |
Тетрациклін (гідрохлорид) |
1,0 |
6
При вивченні умов утворення антибіотиків і дослідженні впливу різних факторів на біосинтез антибіотиків
важливим критерієм оцінки активності є характеристика антибіотичної продуктивності організмів.
7
Антибіотичною продуктивністю організму називають кількість
антибіотику (в мкг або одиницях), що утворюється 1 мг сухих клітин (або міцелію) досліджуваного організму за
певний проміжок часу (1 год).
Антибіотична продуктивність організму виражається в мкг/(мг*год) або
в од./(мг*год).
8
Визначення антибіотичної активності мікроорганізмів
Антибіотичні властивості мікроорганізмів вивчають за культивування їх на твердих (агаризованих) чи в рідких середовищах. Визначення антибіотичної активності
мікрорганізмів на твердих середовищах здійснюється методом перпендикуляр- них штрихів або методом агарових
блоків, на рідких поживних середовищах
– методом паперових дисків.
9
Визначення антибіотичної активності мікроорганізмів методом перпендикулярних
штрихів (Егоров, 2004).
Час культивуваня тест-культур– 20-24 години Нечутливі культури
ростуть рядом
10