Билет № 4.
Роль микроорганизма в развитии инфекционного процесса. Понятия «патогенность» и «вирулентность» микробов. ( билет 3 , вопрос 1)
Анатоксины. Способ получения анатоксинов. Особенности формирования иммунитета. Характеристика вакцины АДС.
Анатоксины (от лат. ana — обратно) — это экзотоксины бактерий, обезвреженные воздействием формалина (0,3—0,4%) и выдерживанием при температуре 37 °С в течение 3-4 нед. При этом происходит потеря токсических свойств, но сохранение иммуногенных. В настоящее время получены и применяются анатоксины из токсинов возбудителей дифтерии, столбняка, ботулизма и др. Анатоксины очищают от примесей питательных сред (балластные белки) и сорбируют на веществах, которые всасываются медленно из места введения.
АДС В ПРОТОКОЛЕ
Реакция непрямой агглютинации: механизм, методика, учет, практическое использование. Реакция непрямой или пассивной гемагглютинации (РПГА или РНГА) - в качестве а/г используется эритроцитарный диагностикум. Реакция ставится не в пробирках, а в лунках полистиролового планшета. Этапы постановки РПГА такие же как и при РА. Учет результатов проводится тоже по 4-х крестной системе: ++++ все эритроциты агглютинированы и равномерно осели на дне лунки в виде «зонтика»; +++ почти все эритроциты агглютинированы и осели на дне лунки виде зонтика, но на их фоне имеется едва заметное кольцо из неосевших эритроцитов; ++ наряду с зонтиком имеется осадок из неагглютинированных эритроцитов в виде маленького колечка (пуговки); + большинство эритроцитов неагглютинированы и осело на дне лунки в виде колечка с неровными краями; - эритроциты неагглютинированы и сели на дне лунки в виде колечка с ровным краями.
ПЦР- механизм, назначение реакции, учёт. На чем основан метод ПЦР Основой полимеразно-цепной реакции является многократное удвоение (амплификация) определённого участка ДНК или РНК при помощи ферментов в лабораторных условиях. В результате образуется то количество ДНК или РНК, достаточное для визуального анализа. В ходе исследования копируется только тот участок, который подходит под заданные условия, и только в ситуации присутствия его в исследуемой пробе. Например, материал для исследования, в котором предполагается наличие фрагментов ДНК или РНК возбудителя (слюна, кровь, моча, выделения из половых органов), помещается в специальный реактор (амплификатор). Далее к нему добавляются специфические ферменты, которые связываются с ДНК или РНК патогена, и происходит синтез ее копии. Это копирование идет в несколько этапов по типу «цепной реакции», и в конечном итоге из одной копии генетического материала могут образоваться сотни и тысячи копий. Затем идет анализ и сравнение результата с имеющейся базой данных о строении различных возбудителей. Посредством ПЦР можно не только выявить тип возбудителя, но и выдать количественный результат анализа, то есть как много возбудителей в организме человека.
БИЛЕТ № 5.
Динамика и формы инфекционного процесса.
1. Инкубационный период начинается от момента проникновения возбудителя в организм человека до появления первых симптомов болезни. Продолжительность этого периода составляет от нескольких часов до десятков лет в зависимости от нозологической формы. Больной в этот период не является опасным, поскольку не выделяет возбудитель в окружающую среду. Антитела к возбудителю не определяются. Возбудитель адгезируется на чувствительных клетках. 2. Продромальный период - это период возникновения первых неспецифических симптомов заболевания. Возбудитель колонизирует чувствительные клетки, не выделяется в окружающую среду (исключение - корь, коклюш, вирусный гепатит А и некоторые другие болезни). Антитела к возбудителю не определяются. 3. Разгар болезни - период проявления специфических симптомов заболевания. Микроорганизмы интенсивно размножаются и выделяются в окружающую среду. В крови появляются специфические иммуноглобулины М в небольших титрах. В конце этого периода происходит замещение иммуноглобулинов М на иммуноглобулины А и G. 4. Реконвалесценция - период выздоровления. Происходит прекращение размножения или разрушение возбудителя. Нормализуются функции больного. Выделение возбудителя прекращается или формируется микробное носительство. Происходит нарастание титра антител классов иммуноглобулинов G и А. При ряде заболеваний формируется реакция гиперчувствительности замедленного типа.
Иммунные сыворотки. Классификация по назначению. Применение антитоксических лечебных иммунных сывороток в медицине. Билет 4 вопрос 2
Иммунные сыворотки получают от иммунизированных животных и людей, а также от лиц, перенесших инфекционную болезнь, в крови которых содержатся соответствующие антитела (сыворотки реконвалесцентов
Все сывороточные препараты делятся на две группы: гетерологичные, полученные из крови животных, и гомологичные, получение из крови человека. Эти различия имеют принципиальное значение, так как гетерологичные препараты являются для организма человека чужеродными антигенами, их применение сопровождается развитием антител, которые могут не только нейтрализовать действие препарата, но вызвать в организме тяжелые аллергические и иммунокомлексные реакции.
Реакция агглютинации. Механизм, назначение, ингредиенты, учет, оценка. Реакция агглютинации. - это реакция склеивания и выпадения в осадок микробных клеток под действием антител и в присутствии электролита (физ.раствора). Существует две модификации РА: - ориентировочная РА ( на стекле)- чаще ставится с целью сероидентификации; - развернутая РА (пробирочная) – чаще ставится с целью серодиагностики. Ориентировочная РА. - на обезжиренное предметное стекло наносится диагностическая иммунная сыворотка, затем в каплю сыворотки петлей вносится чистая культура микроба и тщательно растирается в капле. При положительной реакции- капля становится прозрачной и в ней выпадают хлопья. При отрицательной реакции- капля остается мутной без хлопьев. Развернутая РА. Ставиться в 2 этапа: - на первом этапе в рабочих пробирках готовятся двукратные разведения исследуемой сыворотки ( напр., от 1/100 до 1/1600) и 2 контроля-контроль сыворотки (КС= исследуемая сыворотка 1/100) и контроль диагностикума (КД= физ.раствор); - на втором этапе – во все рабочие пробирки и в КД вносятся по 2 капли бактериального диагностикума. Штатив с пробирками ставится в термостат при 37 град. на 2 часа или оставляется при комнатной температуре на 20-24 часа. Реакция оценивается по 4-х крестной системе: ++++ на дне пробирки выпадает четкий агглютинат (осадок), а надосадочная жидкость остается прозрачной; +++ агглютинат меньше и надосадочная жидкость слегка мутноватая; ++ агглютинат еще меньше и надосадочная жидкость мутноватая; + едва заметный агглютинат и надосадочная жидкость мутная; - агглютината нет, надосадочная жидкость мутная.
ПЦР-механизм, ингредиенты, применение в медицине.
Билет 4 вопрос 4
БИЛЕт № 6.
Антитела. Понятие, классы иммуноглобулинов, их функция.
Убитые вакцины. Способы получения, преимущества, недостатки убитых вакцин. Характеристика убитой полиомиелитной вакцины.
Убитые вакцины — культуры микроорганизмов, инактивированные действием высокой температуры, химических веществ (фенол, формалин, спирт, ацетон), УФ-лучей и др. При этом подбирают такие факторы воздействия, которые полностью сохраняют иммуногенные свойства микробных клеток. Вакцина в протоколе
Иммунофлюоресцентный метод. Постановка, учет, назначение. 1 билет 3 вопрос
БИЛЕТ № 7.
Классификация инфекционных болезней по Громашевскому.
По механизму передачи возбудителя инфекционные болезни были разделены Л.В. Громашевским на 4 группы: 1. Кишечные инфекции. Механизм передачи - фекально-оральный, пути передачи - водный, пищевой, контактно-бытовой. 2. Капельные инфекции (инфекции дыхательных путей). Механизм передачи - аэрогенный, пути передачи - воздушно-капельный, воздушно-пылевой. 3. Кровяные инфекции. Механизм передачи – трансмиссивный (через кровососущих насекомых). 4. Инфекции внешних покровов. Механизм передачи - перкутанный (чрезкожный), пути передачи - половой, парентеральный, контактный (ослюнение при бешенстве).
2.Иммуноглобулины. Понятие, классификация, практическое применение. Нативные иммунные сыворотки содержат ненужные белки (альбумин), из этих сывороток выделяют и подвергают очистке специфические белки- иммуноглобулины.
Иммуноглобулины, иммунные сыворотки подразделяют на:
1.Антитоксические - сыворотки против дифтерии, столбняка, ботулизма, газовой гангрены, т.е. сыворотки, содержащие в качестве антител антитоксины, которые нейтрализуют специфические токсины.
2.Антибактериальные - сыворотки, содержащие агглютинины, преципитины, комплементсвязывающие антитела к возбудителям брюшного тифа, дизентерии, чумы, коклюша.
3.Противовирусные сыворотки (коревая, гриппозная, антирабическая) содержат вируснейтрализующие, комплементсвязывающие противовирусные антитела.
Методы очистки: осаждение спиртом, ацетоном на холоде, обработка ферментами, аффинная хроматография, ультрафильтрация.
Активность иммуноглобулинов выражают в антитоксических единицах, в титрах вируснейтрализующей, гемагглютинирующей, агглютинирующей активности, т.е. тем наименьшим количеством антител, которое вызывает видимую реакцию с определенным количеством специфического антигена.
Иммуноглобулины создают пассивный специфический иммунитет сразу после введения. Применяют с лечебной и профилактической целью. Для лечения токсинемических инфекций (столбняк, ботулизм, дифтерия, газовая гангрена), а также для лечения бактериальных и вирусных инфекций (корь, краснуха, чума, сибирская язва). С лечебной целью сывороточные препараты в/м. Профилактически: в/м лицам, имевшим контакт с больным, для создания пассивного иммунитета.
Метод введения лечебно-профилактических иммунных сывороток по Безредко.
За полчаса до внутримышечного или подкожного введения необходимой дозы пациенту делают внутрикожную пробу путем введения 0,1 мл разведенной 1:100 сыоротки и только при полном отсутствии местной или общей реакции вводят полную дозу препарата (по Безредке). Даже при отрицательных кожных пробах соблюдают все меры предосторожности
ПЦР-механизм, ингредиенты, применение в медицине.
Билет 4 вопрос 4