Биопроба

Проводят одновременно с посевом материала на питательные среды. Исследуемый материал суспендируют в небольшом объеме стерильного физиологического раствора, 0,2-0,5 мл взвеси вводят двум белым мышам подкожно в область спины или 0,5-1,0 мл двум морским свинкам подкожно в область живота Наблюдение за животными ведуг в течение 10 суток, гибель в положительных случаях обычно наступает через 1-3 суток. Павших ЖИВОтнЫХ подвергают полному бактериологическому исследованию.

Гибель хотя бы одного из двух зараженных лабораторных животных и выделение культуры возбудителя из его органов является основанием для постановки положительного диагноза.

Если чистая культура возбудителя получена ранее гибели животных, зараженных исследуемым материалом, то, не дожидаясь результатов биопробы, проверяют патогенность выделенной бактерии путем заражения двух белых мышей срочной бульонной культурой

При исследовании материала от свиней, с учетом штаммовьтх вариаций по вирулегтгност, необходИМО заразить до О мышей, а наблюдение продолжать за зараженными животными до 1020 дней.

у штаммОВВ. anthracis вирулентность может варьировать в широких пределах. Для оценки свойств штаммов представляют интерес критерии по определению типа B.anfhracrs, предложенные Dong Shulin (цит. по Бакулову ИА. и соавт., 2001). Те или иные свойства штамма связаны с присутствием в клетках плазмид, детерминирующих синтез факторов вирулеттгности С зрения диагностики существенны следующие фенотипические признаки B.anlhracis, обусловливаемые плазмидами: наличие капсулы, токсина, патогенность для животных и форма кОЛОНИЙ. С целью установления типа штамма испытуемую культуру засевают на плотную и жидкую питательные среды с 500 о сыворотки крови барана или кролика и 0 90/0 NaHC03. Посевы ињ-убируот при 370 С в атмосфере 10-120/0 СО2В течение 24 часов. На плотных средах, в зависимости от характеристик штамма, могут формироваться колонии R-, S- и М-формы, клетки бактрий мотуг быть капсулированы или нег, в культуральной жидкости может присутствовать или отсутствовать экзотоксин, культуры могут быть патогенными или непатогенными для жИВОТНЫХ Согласно Dong Shulin штаммы по этим критериям подразделяются на четыре типа.

1-й тип Вирулентный штамм Колонии М-формы, есть капсула, токсин (культуральный фильтрат при внутрикожном введении кроликам или морским свинкам вызывает образование отека) выявляется в РДП, культура патогенна для животных. Такие свойства обусловлены наличием плазмид рхО1 и рхО2.

2-й тип Вакцинный штамм. Колонии Г<-формы, капсулы нет, токсин есть, культура не патогенна для животных. Имеется плазмлда рхО 1

3-й тип Авирулентный штамм. Колонии М-формы, есть капсула, токсина нет, культура патогенна для жИВОТНЫХ. Присутствует плазмида рх02.

4-й тип. Непатогенный штамм. Колонии Чормьт, капсулы и токсина нет, культура не патогенна для животных Плазмиды отсутствуют.

Диатостика

Микробиологическая диагностика сибирской язвы, Принципы микробиологической диагностиКИ сибирской язвы. Бактериоскопический, бактериологический, биологический, кожноаллергичесютй метод диагностики сибирской язвы. Для микробиологической диагностики сибирской язвы берут содержимое пустулы, гнойное отделяемое из кат“ункула, кровь, мочу, мокроту испражнения и рвотые массы. При патологоанатомическом исследовании забиракуг кусочки органов ијш целые органы. Все образцы следует помещать в герметичные сосуды и транспортировать закупоренными в опломбированные боксы или деревянные ящики Выделение возбудителя сибирской язвы. Проводят окраску материала по Граму и посев на обычные питательные среды. Затем определяют подвижность микроорганизмов из выросших колоний изучают их биохимические и культурштьные свойства. Серологические исследования проводяг для распознавания бОЛЬНЬГХ и реконвалесцентов. Возбудитель сибирской язвы можно выявлять АТ, меченными флюоресцеинами (особенно в смешанных культурах), диффузией в геле, в РСК, РИГА и ИФХ Кожные пробы применяют для ретроспективной диагностики при эпидемиологических исследованиях. Проводят внутрикожное введение 0,1 мл бактериального илертена (антраксина).

Реакция термопреципшации по Асколи имеет большое значение, так позволя<г идентифицировать возбудителей сибирской язвы при отрицательных результатах бактериологических исследований Для прижизненной же диагностики эта реакция не имеет серьезных преимуществ перед вышеуказанными бактериологическими и серологическими методами. Фаготипирование сибирской язвы. Для дифференциальной диагностики предложены высокоспецифические литические сибиреязвенные баюрриофаги «ВА-9» и «Саратов». Биологическая проба при диагностике сибирской язвы. Заражение лабораторных животных проводят одномоментно с посевом на питательные среды. Материал можно вводить белым мышам (по 0,1-0,2 мл в спину), кроликам и морским свинкам (по 0,2-0,5 мл в область живота). ОбЫЧНО мыши погибают через 1-2 сут, морские свинки и через 24 суг. При выживании животных наблюдение за ними продолжают в течение 10 дней. У павших животных исследуот печень, селезёнку, лимфатические узлы, почки, кровь из полостей сердца и места введения заразного материала. Затем проводят посев исследуемого материала на питательные среды