МЕТОДЫ ИЗУЧЕНИЯ НОРМАЛЬНОЙ МИКРОФЛОРЫ
Вид материала для исследования зависит от исследуемого биотопа и предполагаемого количества микроорганизмов в нем. Материалом для исследования часто являются отпечатки кожи и слизистых, зубной налет, слизь из верхних дыхательных путей, испражнения, влагалищное содержимое. При взятии материала соблюдают правила асептики.
Методы взятия материала для изучения микрофлоры:
–получение естественных экскретов (слюна, моча, испражнения);
–метод аппликаций (отпечатков) — снятие микроорганизмов с помощью бумажных фильтров определенной площади и перенос отпечатков фильтров на поверхность агаровой среды;
–соскоб со слизистых;
–метод смывов увлажненным стерильным ватным тампоном с кожи или слизистых;
–аспирационный метод (из межзубных пространств, гингивальных карманов, из верхних и средних отделов дыхательных путей).
–взятие материал из желудка и кишечника с помощью зондов.
Методы исследования микрофлоры:
1.Микроскопический метод имеет самостоятельное значение для биотопов, в которых обитает большое количество различных микроорганизмов: полость рта, кишечник, вагина. Мазок окрашивают по Граму и изучают морфологические и тинкториальные свойства микроорганизмов.
Метод дает общее представление о численности микроорганизмов, позволяет получить общее представление о составе микрофлоры (преобладание Грам+ или Грам– бактерий определенной формы, наличие грибов), а также выявить микроорганизмы, которые не культивируются на питательных средах.
2.Культуральный метод используется для биотопов с широким спектром микроорганизмов, выполняется с учетом данных бактериоскопии.
Основные принципы культурального метода при исследовании микрофлоры:
– материал лучше исследовать сразу, при невозможности немедленного исследования материал доставляют в лабораторию в пробирке с консервантом в течение 2 ч, т. к. при более длительном хранении значительно нарушаются взаимоотношения между видами;
– первичный посев материала проводят без предварительного обогащения, т. к. обогащение нарушает количественные соотношения видов;
– используют большой набор питательных сред, различные условия
культивирования (аэробные, анаэробные, атмосфера СО2);
– в клиническом образце определяют соотношение анаэробов и аэробов, качественный (видовой) и количественный (соотношение разных видов) состав микроорганизмов в микробиоценозе конкретного биотопа.
Качественное обнаружение даже единичных особей патогенных микроорганизмов свидетельствует о крайнем неблагополучии в биотопе.
Для количественного подсчета УПМ в исследуемом материале готовят ряд разведений материала (10–2, 10–4, 10–6) в стерильном физрастворе и производят
343
количественный посев этих разведений на сектора чашек с различными питательными средами. Для выделения энтеробактерий используют среду Левина, для выделения энтерококков — желчно-кровяной агар, для синегнойной палочки — фурагиновый агар, для грибов — среду Сабуро. Микроорганизмы идентифицируют общепринятым способом: УП бактерий обычно идентифицируют до вида, грибы — до рода.
Количество микроорганизмов определяют по формуле:
КОЕ/мл (г) = количество колоний на определенном секторе × фактор разведения × 20, где 20 — индекс пересчета на 1 мл при посеве 1 капли (0,05 мл) разведения материала.
–определяют наличие факторов патогенности у выделенных штаммов (гемолизинов, плазмокоагулазы, капсулы).
–через 5–7 дней целесообразно провести повторное микробиологическое исследование на дисбиоз.
Микробиологическое заключение базируется на сравнении полученных результатов с установленной нормой для данного биотопа с учетом возраста обследуемого.
344
ЛИТЕРАТУРА
1. Атлас по медицинской микробиологии, вирусологии и иммунологии / под ред. А. А. Воробьева, А. С. Быкова. М. : Медицинское информационное агентство, 2003.
236с.
2.Гранитов, В. М. Хламидиозы / В. М. Гранитов. М. : Медицинская книга, 2000. 192 с.
3.Корнев, И. И. Стерилизация изделий медицинского назначения : справочное руководство / И. И. Корнев. СПб. : Человек, 2003. 156 c.
4.Коротяев, А. И. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология / А. И. Коротяев, С. А. Бабичев. СПб. : Специальная литература, 2002. 591 с.
5.Красильников, А. П. Справочник по антисептике / А. П. Красильников. Минск : Выш.
шк., 1995. 367 с.
6.Лобзин, Ю. В. Практика лабораторных исследований при инфекционных заболеваниях / Ю. В. Лобзин, Ю. П. Финогеев, В. Ф. Крумгольц. СПб. : Элби-СПб, 2005. 274 с.
7.Маянский, А. Н. Микробиология для врачей / А. Н. Маянский. Нижний Новгород :
НГМА, 1999. 393 с.
8.Медицинская микробиология, вирусология и иммунология / под ред. А. А. Воробье-
ва. 2-е изд., испр. и доп. М. : Медицинское информационное агентство, 2008.
704с.
9.Общая и санитарная микробиология с техникой микробиологических исследований/ под ред. А. С. Лабинской, Л. П. Блинковой, А. С. Ещиной. М. : Медицина, 2004. 576 с.
10.Поздеев, О. К. Медицинская микробиология / О. К. Поздеев ; под ред. акад. РАМН В. И. Покровского. М. : ГЭОТАР-Мед., 2001. 768 с.
11.Страчунский, Л. С. Современная антимикробная химиотерапия : рук. для врачей / Л. С. Страчунский, С. Н. Козлов. М. : Боргес, 2002. 436 с.
12.Современные методы коррекции дисбиоза кишечника у детей : учеб. пособие / Н. И. Урсова [и др.]. М. : Моники, 2000. 48 с.
13.Brooks, G. F. Medical Microbiology / G. F. Brooks, J. S. Butel, S. A. Morse. 24th ed. NY : McGraw-Hill, 2007. 832 p.
14.Harley, J. P. Laboratory Exercises in Microbiology / J. P. Harley, L. M. Prescott. 5th ed. The McGraw-Hill Companies, 2002. 860 p.
15.Kayser, F. H. Medical Microbiology / F. H. Kayser. Thieme, 2005. 466 p.
16.Manual of Clinical Microbiology / еd. P. Murray. 8th ed. Washington DC : Americanh Society of Microbiology, 2003. 2322 p.
17.Talaro, K. P. Founndation in Microbiology / K. P. Talaro. 4th ed. The McGraw-Hill Companies, 2002. 698 p.
18.http://www.asm.org. Дата доступа 18.03.2010.
345
ОГЛАВЛЕНИЕ |
|
Список сокращений.............................................................................................. |
3 |
Разделы микробиологии...................................................................................... |
5 |
Этапы развития микробиологии....................................................................... |
6 |
Особенности микроорганизмов ......................................................................... |
11 |
Систематика бактерий......................................................................................... |
13 |
Морфология бактерий ......................................................................................... |
20 |
Структура бактериальной клетки .................................................................... |
22 |
Капсула ........................................................................................................... |
22 |
Жгутики .......................................................................................................... |
25 |
Фимбрии (пили) ............................................................................................. |
31 |
Клеточная стенка ........................................................................................... |
32 |
Периплазматическое пространство ............................................................. |
42 |
Цитоплазматическая мембрана.................................................................... |
43 |
Мезосомы ....................................................................................................... |
45 |
Цитоплазма..................................................................................................... |
46 |
Нуклеоид......................................................................................................... |
46 |
Рибосомы........................................................................................................ |
48 |
Включения...................................................................................................... |
49 |
Эндоспоры...................................................................................................... |
51 |
Систематическое положение, морфология, |
|
роль в патологии и методы изучения спирохет, |
|
актиномицетов, риккетсий, хламидий, микоплазм....................................... |
57 |
Спирохеты (трепонемы, боррелии, лептоспиры)....................................... |
57 |
Актиномицеты ............................................................................................... |
66 |
Риккетсии ....................................................................................................... |
69 |
Хламидии........................................................................................................ |
72 |
Микоплазмы................................................................................................... |
82 |
Обмен веществ и энергии (метаболизм) у прокариот ................................... |
88 |
Химическая структура и питательные потребности бактерий ................. |
90 |
Питание микроорганизмов ........................................................................... |
93 |
Конструктивный метаболизм ....................................................................... |
98 |
Пути получения энергии у прокариот ......................................................... |
99 |
Энергетический метаболизм ........................................................................ |
101 |
Метаболическое направление эволюции микроорганизмов..................... |
106 |
346
Рост и размножение микроорганизмов ............................................................ |
107 |
Рост ................................................................................................................. |
107 |
Размножение .................................................................................................. |
109 |
Покоящиеся формы микроорганизмов........................................................ |
113 |
Противомикробные мероприятия..................................................................... |
114 |
Стерилизация ................................................................................................. |
115 |
Дезинфекция .................................................................................................. |
131 |
Антисептика................................................................................................... |
142 |
Асептика......................................................................................................... |
157 |
Противомикробный режим........................................................................... |
158 |
Генетика бактерий ............................................................................................... |
159 |
Наследственность бактерий ......................................................................... |
159 |
Изменчивость бактерий ................................................................................ |
172 |
Медицинская биотехнология и генная инженерия .................................... |
185 |
Геномика......................................................................................................... |
187 |
Учение об инфекционном процессе................................................................... |
188 |
Инфекционные заболевания в патологии человека................................... |
188 |
Инфекционный процесс и факторы, влияющие на него ........................... |
190 |
Классификации инфекционных заболеваний............................................. |
194 |
Периоды инфекционного заболевания........................................................ |
202 |
Патогенность.................................................................................................. |
206 |
Вирулентность ............................................................................................... |
208 |
Факторы патогенности.................................................................................. |
210 |
Синдром системного воспалительного ответа ........................................... |
232 |
Химиопрофилактика и химиотерапия инфекционных заболеваний ........ |
235 |
Этапы становления химиотерапии .............................................................. |
235 |
Классификация антимикробных средств.................................................... |
235 |
Группы химиопрепаратов............................................................................. |
236 |
Антибиотики .................................................................................................. |
240 |
Экологическая микробиология ......................................................................... |
270 |
Экология микроорганизмов.......................................................................... |
270 |
Экологическое направление эволюции микроорганизмов ....................... |
271 |
Экологические понятия ................................................................................ |
271 |
Концепция микробной доминанты.............................................................. |
272 |
Роль микроорганизмов в круговороте веществ в природе........................ |
273 |
347
Микробиологические аспекты охраны внешней среды ............................ |
275 |
Экологические связи ..................................................................................... |
275 |
Экологические факторы абиотической среды............................................ |
277 |
Экологические среды микроорганизмов..................................................... |
282 |
Эумикробиоз и дисбиоз........................................................................................ |
287 |
Общая характеристика нормальной микрофлоры тела человека............. |
287 |
Значение нормальной микрофлоры............................................................. |
289 |
Онтогенез нормальной микрофлоры........................................................... |
293 |
Эубиоз различных биотопов организма человека...................................... |
293 |
Дисбиоз (дисмикробиоз)............................................................................... |
304 |
Методы изучения нормальной микрофлоры .............................................. |
314 |
Литература............................................................................................................. |
316 |
348
Учебное издание
Шабан Жанна Георгиевна Канашкова Татьяна Александровна Крылов Игорь Александрович Молочко Валерия Анатольевна
ОБЩАЯ МЕДИЦИНСКАЯ МИКРОБИОЛОГИЯ
Учебно-методическое пособие
Ответственная за выпуск Т. А. Канашкова В авторской редакции
Компьютерная верстка Н. М. Федорцовой Корректор Ю. В. Киселёва
Подписано в печать 23.06.11. Формат 60×84/16. Бумага писчая «Zoom». Печать ризографическая. Гарнитура «Times».
Усл. печ. л. 18,6. Уч.-изд. л. 19,9. Тираж 500 экз. Заказ 804.
Издатель и полиграфическое исполнение:
учреждение образования «Белорусский государственный медицинский университет».
ЛИ № 02330/0494330 от 16.03.2009. ЛП № 02330/0150484 от 25.02.2009.
Ул. Ленинградская, 6, 220006, Минск.
349