4 курс / Акушерство и гинекология / Ботвиньева_И_А_Иммунорегуляторные_белки_и_цитокины_при_беременности

91

Глава 6. СООТНОШЕНИЕ СОДЕРЖАНИЯ ИЗУЧЕННЫХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ В РАЗЛИЧНЫХ БИОЛОГИЧЕСКИХ

ЖИДКОСТЯХ В НОРМЕ И НА ФОНЕ НОСИТЕЛЬСТВА АНТИТЕЛ К

CHLAMYDIA TRACHOMATIS

Для уточнения роли изученных показателей, особенно иммунорегуляторных белков в развитии процессов, приводящих к рождению ребенка с признаками внутриутробного инфицирования на фоне антителоносительства к хламидийным антигенам во время беременности, необходимо изучить взаимосвязи уровней данных белков и цитокинов в различных биологических жидкостях. Для этого использовалось как обычное парное сравнение, так и коррелятивный анализ показателей.

Установлено, что содержание а2-МГ в околоплодных водах было значительно ниже (табл. 17), чем в сыворотке крови матери и пуповинной сыворотке крови плода.

Таблица 17

Достоверность различий между уровнями изученных белков в сыворотке матери, пуповинной сыворотке и околоплодных водах

Пояснения: р1-отличия от сыворотки крови матери, р2-отличия от пуповинной сыворотки плода, Х – показатель не изучался в данной биологической жидкости.

92

В норме отличия от ОВ составили 69 раз для сыворотки матери (ВС) и 77 раз для ПС. Содержание а2-МГ в венозной и пуповинной крови в соответствующих подгруппах было практически одинаково.

Напротив, содержание ЛФ (рис.13, табл.17) было выше всего в околоплодных водах (в 2 раза меньше в ВС и в 2,6 раза в ПС контрольной группы; соответственно; в 1,4 и 1,7 раза ниже в группе антителоносительниц, родивших здоровых детей; а при наличии ПВИ у новорожденного ниже в 1,5 раза в ПС, и практически столько же, сколько в ВС). Отличия его содержания в ВС от ПС в контроле и в группе женщин, родивших детей без ПВИ составило 1,2 раза, а при наличии признаков внутриутробного инфицирования – 1,6 раз.

Рис.13. Соотношение содержания ЛФ (слева, мг/л) и а2-МГ (справа, г/л) в различных биологических жидкостях в норме и при антителоносительстве.

Уровень альбумина, как и уровень а2-МГ, был значительно ниже в околоплодных водах. Отличия в контрольной группе составили 18,5 раз для сыворотки матери и 18 раз для ПС, а при рождении здорового ребенка от антителоносительницы в 22 раза и в венозной сыворотке и в ПС. Однако при рождении ребенка с признаками внутриутробного инфицирования,

94

рождении здоровых детей превышение составило соответственно в 4,5 раза и в 12,3 раза, а при рождении детей с ПВИ – в 3,6 раз и в 5,8 раза.

Содержание цитокинов в биожидкостях было подвержено значительной индивидуальной вариабельности. Наибольшие различия между подгруппами установлены при сравнении околоплодных вод с ВС и ПС (табл.19). Исключение составил IL-18, где концентрация в ОВ была ниже, чем в сыворотке крови женщины и плода, и TNF-α, уровень которого в группе здоровых детей, рожденных от матерей-антителоносительниц, был сопоставимым в ВС и ОВ.

Таблица 19

Достоверность различий между уровнями изученных цитокинов в сыворотке матери, пуповинной сыворотке и околоплодных водах

95

В случае иммунорегуляторного IL-6 его содержание в ВС контрольной группы было в 3 раза выше, чем в ПС и в 20 раз ниже, чем в ОВ. При рождении здорового ребенка на фоне антителоносительства отличия содержания в ВС от ПС были минимальными (от ОВ – в 10 раз), а при рождении ребенка с ПВИ его уровни в ВС были в 1,9 раза выше, чем в ПС и в 9 раз ниже, чем в ОВ.

Концентрация TNF-α в крови рожениц и в пуповинной сыворотке плода достоверно не различалась. При сравнении данных установлено, что наибольшая концентрация провоспалительного цитокина TNF-α была в ОВ в контрольной группе и в группе детей с ПВИ. Так, содержание TNF-α в норме определялось ниже в ВС в 9,5 раз, а в ПС в 7 раз. При рождении детей с ПВИ уровень TNF-α в ОВ значительно превышал уровень данного цитокина в сыворотке матери и пуповинной сыворотке плода (соответственно в 4,1 раза и в

3,9 раза).

Содержание хемокина IL-8 в норме было выше (в 1,7 раза) в ВС, чем в ПС и не различалось практически в группе женщин с антителами к Ch. trachomatis. В околоплодных водах напротив, концентрация IL-8 была существенно выше во всех исследованных группах. Так, в контрольной группе содержание IL-8 в ОВ относительно ВС было выше в 3,3 раза, а в ПС – в 5,7 раз. В группе детей, родившихся с признаками внутриутробного инфицирования, различия составили соответственно 3,8 раза и 5,5 раз, а в группе здоровых детей, матери которых имели IgG-антитела к Ch. trachomatis, - 3,1 раза и 2,3 раза.

При сравнительном изучении содержания IL-10 наименьшее содержание наблюдалось в ПС, а наибольшее в ОВ. Так, различия ПС-ОВ в подгруппе детей с ПВИ составили 2,4 раза, а в группе здоровых детей от антителоносительниц – 1,9 раз. Значения IL-10 в контрольной группе в ОВ также достоверно отличались от его содержания в ВС и ПС (выше в 3,7 раза и

7,1 раз).

96

Содержание INF-γ также было наибольшим в ОВ, причем максимальные значения получены в контрольной группе. В ВС и ПС его уровни были ниже в 6,2 раза и в 4,1 раза в норме, как и в подгруппах женщин, имеющих IgG антитела к Ch. trachomatis при рождении ребенка с благоприятным и неблагоприятным течением раннего перинатального периода (меньше, чем в ВС в 4 раза и 2,8 раза). При сравнении содержания INF-γ в ВС и ПС, более низкая концентрация была в ВС подгрупп женщин-антителоносительниц, как при рождении здорового ребенка (в 2,7 раза), так и ребенка с ПВИ (в 3,2 раза).

При сравнении содержания IL-18 в биологических жидкостях установлено, что значительно более высокая концентрация определялась в ВС во всех исследованных группах: как в контрольной (выше в 2,7 раза), так и в подгруппе женщин, имеющих IgG антитела к Ch. trachomatis, родивших здоровых детей (больше в 2,4 раза), и женщин, родивших детей с клиническими признаками внутриутробного инфицирования (выше в 2,5 раза) относительно ПС. Уровень IL-18 в ОВ был практически сопоставим с уровнем данного цитокина в ПС, за исключением группы здоровых детей от матерейантителоносительниц, в которой он был ниже в 1,8 раз. Соответственно уровни IL-18 в ОВ были ниже, чем в ВС в контрольной группе, группах здоровых детей и детей с ПВИ матерей-антителоносительниц (соответственно в 5 раз, 4 раза и 2 раза).

Наиболее высокая концентрация IL-1RА определялась в ОВ: по сравнению с ВС в 9,2 раза выше, а с ПС - в 8,5 раз.

Различия с уровнями данного цитокина в ОВ в подгруппе антителоносительниц, где родились дети с ПВИ, составили 11,1 раз и 4,5 раза для ВС и ПС соответственно, а среди родивших здоровых детей - 6,5 раза и 4,5 раза. Содержание IL-1RА в ПС и в ВС всех групп достоверно не различалось.

Для того, чтобы определить, является ли совокупность выявленных нами изменений направленным взаимосвязанным процессом мы воспользовались

97

методом парного межгруппового исследования коррелятивных взаимосвязей между изученными показателями, а именно взаимосвязей уровней иммуномодуляторных а2-МГ и ЛФ с содержанием ряда цитокинов и классических острофазовых белков в различных биологических жидкостях

(табл.20).

Уже из первой представленной таблицы очевидно, что активность синтеза а2-МГ и других взаимодействующих с ним прямо или косвенно показателей в подгруппах кардинально различаются. Так, в норме обнаруживается отрицательная взаимосвязь а2-МГ (как негативного реактанта воспаления) с ЛФ (позитивным реактантом). Таблица

20

Выявленные коррелятивные взаимосвязи уровней сывороточного а2МГ с изученными показателями в норме и на фоне носительства антител к

Chlamydia trachomatis в зависимости от состояния новорожденного.

98

Пояснения: r – коэффициент корреляции; р – достоверность, курсивом отмечены недостаточно значимые различия.

Отсутствие взаимосвязей с уровнями иммунокомплексов несколько выбивается из общей картины, но может быть объяснено небольшим количеством исследований по сравнению с другими показателями. Напротив, отсутствие взаимосвязей с содержанием цитокинов в крови при физиологической беременности вполне логично, поскольку их избыток в общей циркуляции сам по себе не норма и, при отсутствии выраженной патологии, не следует каким-то определенным тенденциям.

При антителоносительстве без развития ПВИ у новорожденного, взаимосвязи несколько меняются. В частности, зависимость между а2-МГ и альбумином исчезает, а в случае ЛФ и вовсе меняется на обратную. В то же время обнаруживается не выявляемая в норме взаимосвязь между уровнями а2МГ и ряда цитокинов – IL-10 и IL-1RА (прямая), IL-8, IL-18 (обратная) и TNF-α (тенденция к прямой, приближающаяся к достоверной), а также взаимосвязь между общими концентрациями а2-МГ и содержанием его иммунокомплекса с

IgG.

Подобные взаимосвязи свидетельствуют о том, что в организме происходит ряд патологических изменений на молекулярном уровне (рассогласование синтеза некоторых регуляторных белков, активация таких функций а2-МГ, как транспорт и регуляция синтеза цитокинов, повреждение молекул а2-МГ и формирование аутоантител к ним, задержка части поврежденного а2-МГ в циркуляции тем большая, чем выраженнее повышение ЛФ - высокочувствительного маркера воспаления) даже в том случае, когда клинические проявления при беременности отсутствуют. Однако ряд зависимостей сохраняется, некоторые негативные процессы корректируется изменениями цитокинового профиля и развивающиеся патологические процессы (в большей степени воспалительные, чем аутоиммунные, судя по

99

изменениям) не оказывают выраженного негативного влияния на плаценту и плод, сохраняя их неповрежденными и защищенными от патогенной инвазии.

Совсем другие тенденции наблюдаются в подгруппе женщинантителоносительниц, родивших детей с признаками внутриутробного инфицирования. Происходит тотальное рассогласование синтеза а2-МГ и других регуляторно-транспортных белков. Выявляется обратная взаимосвязь с СРБ и четкая прямая взаимосвязь с содержанием провоспалительных цитокинов, но исчезает зависимость с противовоспалительным IL-10, а также с IL-18 обнаруживаемая при антителоносительстве без ПВИ у ребенка. Очевидно, что подобные корреляции свидетельствуют как о большей активности негативных процессов и дисбалансе синтеза регуляторных и транспортных соединений, происходящих в организме беременной антителоносительницы при развитии ПВИ, так и об активном участии а2-МГ в данных патогенетических механизмах.

Изучение взаимосвязей концентрации иммунорегуляторного а2-МГ с другими показателями в пуповинной сыворотке (ПС, табл.21) продемонстрировало в чем-то сходные, а в чем-то кардинально противоположные корреляции.

Таблица 21

Выявленные коррелятивные взаимосвязи уровней а2-МГ в пуповинной сыворотке с изученными показателями в норме и на фоне носительства

антител к Chlamydia trachomatis в зависимости от состояния новорожденного.

100

Так в норме зависимости, выявляемые в крови матери отсутствовали, но выявлялась прямая взаимосвязь между концентрацией а2-МГ и IL-6, IL-8, и обратная с уровнями иммунокомплексов. В ПС антителоносительниц, родивших здорового ребенка, как и в венозной крови перед родами, уровни а2МГ негативно коррелировали с IL-8. Другие взаимосвязи также утрачивались, но обнаруживалась достоверная обратная корреляция с содержанием TNF-α, IL- 6, IFN-γ, IL-1RА. Судя по этим данным, при антителоносительстве с последующим рождением здорового ребенка, а2-МГ в ПС ведет себя и как поздний реактант классического воспаления и как компонент аутоиммунного – чем больше выражен «классический» воспалительный процесс, тем активнее синтезируются цитокины и тем быстрее расходуется а2-МГ, чем активнее аутоиммунный – тем дольше а2-МГ задерживается в циркуляции и тем хуже он способствует активации синтеза цитокинов.

При анализе коррелятивных взаимосвязей содержания а2-МГ в ПС ребенка с ПВИ, сходные с венозной кровью зависимости выявляются только для IL-8. В отличие от ПС здоровых детей контрольной группы, обнаруживается достоверная негативная корреляция а2-МГ с содержанием ЛФ, TNF-α, INF-γ и позитивная – с альбумином, исчезает выявляемая в норме взаимосвязь с IL-6 и иммунокомплексами. Это свидетельствует о том, что при развитии ПВИ воспалительные процессы выражены сильнее. Однако, судя по тому, что средний уровень а2-МГ в ПС этой подгруппы не отличается от контрольных показателей, здесь достаточно активны и аутоиммунные процессы, способствующие задержке части а2-МГ в циркуляции, что маскирует его