- •Лабораторная диагностика ВИЧ-инфекции
- •Согластно данным Федерального Центра по борьбе со СПИД, число
- •Возбудитель ВИЧ-инфекции – вирус иммунодефицита человека, поражающий клетки иммунной и нервной системы. ВИЧ
- •ВИЧ включает две основные структуры – оболочку и нуклеоид/нуклеокапсид. Оболочка вируса представляет собой
- •Внутри под оболочкой находится матриксный каркас, состоящий из белка
- •Вышеизложенное строение характерно для ВИЧ-1. Строение ВИЧ-2 идентично строению ВИЧ-1. Но поверхностный
- •Клинико-лабораторная диагностика ВИЧ-инфекции
- •Установление инфицированности ВИЧ,
- •Специфические показатели ВИЧ-инфекции имеют определенную динамику.
- •Антиген р24 может быть выявлен в крови уже через 1-2 недели после заражения
- •Содержание IgМ и IgG к р24, gp41, gp120 и gp160 повышается в течении
- •Ранняя диагностика ВИЧ-инфекции в условиях нарастающей эпидемии в России стала важной проблемой для
- •До 2001 г, основой диагностики ВИЧ-инфекции являлся ИФА, направленный на выявление антител к
- •Внедрение в тесты определения р24 позволило повысить чувствительность в
- •При высокой чувствительности диагностикумы не обладают достаточной специфичностью.
- •Позитивный в вестерн-блоте образец должен содержать полосы, по меньшей мере, для двух или
- •Если результат вестерн-блота нельзя отнести ни к положительным ни к отрицательным, его рассматривают
- •Альтернативным методом подтверждения неопределенного результата является определение РНК ВИЧ.
- •Чувствительность применяемых в настоящее время тестов для выявления РНК ВИЧ составляет примерно 50
- •Провирусная ДНК также может выявляться в
- •Диагностика ВИЧ у новорожденных
- •Диагностика ВИЧ у новорожденных
- •Алгоритм диагностики ВИЧ-инфекции
- •ВИЧ в мононуклеарных лейкоцитах
- •Лица, подлежащие обязательному обследованию на ВИЧ- инфекцию
- •Заключение
- •Факторы, влияющие на результаты исследования
- •Благодарю за внимание
Чувствительность применяемых в настоящее время тестов для выявления РНК ВИЧ составляет примерно 50 копий/мл.
Определение концентрации РНК ВИЧ позволяет определять инфекционность и является биологическим маркером эффективности антивирусной терапии.
При подозрении на раннюю ВИЧ-инфекцию определение РНК ВИЧ позволило бы на ранних сроках назначить оптимальную терапию.
Качество амплификации РНК ВИЧ в современных тестах не зависит от субтипа ВИЧ.
В случае негативного или неопределенного результата тестирования на РНК ВИЧ, анализ на ВИЧ-инфекцию должен подтверждаться стандартными методами (вестерн- блот через 2-4 месяца).
Провирусная ДНК также может выявляться в
мононуклеарах периферической крови с
помощью ДНК ПЦР-теста.
В настоящее время этот метод предназначен
только для научных исследований и применяется при отсутствии РНК ВИЧ в
сыворотке крови.
Чувствительность определения провирусной
ДНК очень высокая
(1 копия/100000 клеток).
Диагностика ВИЧ у новорожденных
По официальным данным МЗ РФ с 1987г по 2004г зарегистрировано 9 154 ребенка, инфицированных и больных ВИЧ/СПИД.
Возрастает количество детей, рожденных ВИЧ-положительными женщинами.
Диагностика ВИЧ у новорожденных
Скрининговые методы определения анти-ВИЧ1/ВИЧ2, основанные на ИФА, не приемлемы для выявления ВИЧ-инфекции у новорожденных.
Вследствие пассивной передачи антител к ВИЧ от матери к ребенку, диагностическое значение имеет только определение р24 или РНК ВИЧ.
Результат теста может становиться положительным через недели и даже месяцы после рождения ребенка.
Позитивный результат указывает на ВИЧ-инфекцию у новорожденного.
Алгоритм диагностики ВИЧ-инфекции
С учетом динамики маркеров ВИЧ-инфекции на
практике целесообразно придерживаться
определенных схем лабораторной диагностики у взрослых.
Три основных этапа первичной лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции:
скрининговый
референтный
экспертный
ВИЧ в мононуклеарных лейкоцитах
Лица, подлежащие обязательному обследованию на ВИЧ- инфекцию
доноры крови, биологических жидкостей, органов и тканей-при каждом взятии донорского материала;
больные с подозрением или подтвержденным диагнозом ряда заболеваний (наркомания, ЗППП, Т- клеточный лейкоз, генерализованные вирусные инфекции, анемии различного генеза и т.д.);
работники отдельных профессий, производств, предприятий, учреждений и организаций, при проведении обязательных предварительных при поступлении на работу и периодических медицинских осмотров;
лица, находящихся в местах лишения свободы;
иностранные граждани и лицам без гражданства, прибывающие в Российскую Федерацию на срок свыше трех месяцев;
беременные.
Заключение
После открытия в середине восьмидесятых годов ХХ века ВИЧ получил широкое распространение по всему миру, несмотря на усилия, принятые для сдерживания распространения этого смертельного заболевания. С одной стороны, произошел прогресс в понимании данного заболевания, его диагностике, в том числе тестировании нуклеиновых кислот и антивирусной терапии, которая увеличила продолжительность жизни инфицированных пациентов. С другой – антиретровирусная терапия послужила причиной появления новых заболеваний, не наблюдавшихся при изначальном течении ВИЧ-инфекции. Борьба с ВИЧ-инфекцией продолжается, новые разработки требуют со временем изменения рекомендаций по диагностике и терапии.
Факторы, влияющие на результаты исследования
Ранняя стадия ВИЧ-инфекции. Уровень антител еще очень низкий.
Поздняя стадия ВИЧ-инфекции. Уровень антител очень низкий из-за нарушения процесса антителообразования.
Кросс-реактивность между ВИЧ-1 и ВИЧ-2. высокая степень гомологии – до 60% по gag (p24) и pol (p31)- регионам и до 40% по области env (gp41).
Кросс-реактивность с другими антигенами, не связанными с ВИЧ: аутоиммунные заболевания и др.