4 курс / Общая токсикология (доп.) / Ядовитые_и_потенциально_опасные_растения_В_А_Куркина_2022_учебное

ГлаваРазработанные4. Подходы к анализув последнеетоксичныхвремясоедфизиконений-химическиев составе ЛРме...-

тоды (спектрофотометрия, фотоэлектроколориметрия, а также хроматографические методы) часто дают результаты, отличные от результатов биологических испытаний. Так, спектрофотоме- трическое определение суммы сердечных гликозидов в пересче- те на цимарин при длине волны 490 нм (в присутствии раство- ра пикриновой кислоты) применяется для препаратов адониса. Для анализа сердечных гликозидов может использоваться высо- коэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ). Этим мето- дом в настоящее время проводят определение конваллотоксина в некоторых препаратах ландыша. Работа по поиску объектив- ных методов анализа продолжается по сей день. Следовательно, процесссозданияновыхлекарственныхпрепаратов,содержащих сердечныегликозиды,следуетпродолжать.

Необходимоотметить,чтонерешеннойпроблемойявляется не только анализ сердечных гликозидов — опасных и ядовитых веществ.Сложностивозникаютприанализеидругихстероидных веществ, таких как сапонины, экдистероиды и др. Причиной это- гоявляетсяхимическаяинертностьиоптическаянейтральность этихсоединений.Поэтомуметодомколичественногоанализаяв- ляется спектрофотометрия с применением концентрированной серной кислоты, раствором трихлоруксусной кислоты и других опасных реактивов. Следовательно, в этом случае проводится определениепродуктовреакциистероидов.

Алкалоиды4.2. Методыявляютсяанализаоченьазотистыхсложной длясоедфитохимическогонений анализа группой веществ. Анализ алкалоидов в лекарственном растительном сырье представляется сложной и во многом, к со- жалению, не до конца решенной задачей. Прежде всего следует отметить их низкое содержание в лекарственном сырье. Поэто- му для алкалоидов используется специфичная схема выделения из лекарственного растительного сырья. Для работы с алкалои- дами требуются определенные навыки. Работа проводится с со- блюдением мер безопасности, учитывая ядовитость этих ве- ществ.

– 61 –

Рекомендовано к изучению разделом по профилактике заболеваний сайта https://meduniver.com/

ЯдовитыеАлкалоидыпотенциальноиз сырьяопасныевыделяютрастенияв форме оснований или со-

лей. Для выделения алкалоидов в форме солей используют во- дныйрастворкислоты(хлористоводороднойилисерной)испирт этиловый. Соли алкалоидов хорошо растворяются в полярных растворителях. Для выделения алкалоидов в форме оснований используютрастворщелочи(водныйрастворКОН,NaOHилиам- миака) и органический растворитель (например, хлороформ или диэтиловый эфир). Экстракцию проводят путем перемешивания в делительной воронке. Обычно это делают уже после экстрак-

форме солей. Органическую вытяжку потом можно ото- гнатьции вподвакуумомиполучитьочищеннуювытяжкуалкалоидов излекарственногорастительногосырья.

1Методами. Качественныекачественногореакции. анализа алкалоидов являются:

2. ТСХ.

3. ВЭЖХ.

4.2.1. Качественные реакции на алкалоиды (проби-

рочные)

Проводятсяа) Общие реакциина неочищенномна алкалоидыкислотном(реакции осажденияизвлечении).. Таким образом,например,контролируютполнотуизвлеченияалкалои- довизлекарственногорастительногосырья.

Дляэтихцелейприменяютсяследующиереактивы:

1. Реактив Майера (раствор дихлорида ртути и йодида ка- лия) приводит к образованию осадков белого или жел- товатогоцвета.

2. Реактив Вагнера-Бушарда (растворы йода в йодиде ка- лия)приводиткобразованиюосадковкоричневогоцвета.

3. Реактив Драгендорфа (раствор нитрата висмута основ- ного и йодида калия с добавлением уксусной кислоты) приводиткобразованиюосадковоранжевогоцвета.

4. РеактивМарме(растворйодидакадмияврастворейоди- дакалия)приводиткобразованиюосадковбелогоцвета.

– 62 –

Рекомендовано к изучению разделом по профилактике заболеваний сайта https://meduniver.com/

наяЯдовкислотатые приотенагреваниициально опасныеспоследующимрастенияприбавлениемраство- ращелочи)приналичиигиосциаминаобразуетсяфиолетовоеокра- шивание,приэтомстрихниндаеткрасно-фиолетовоеокрашивание.

Проводятся) Микрокристаллоскопическиенапредметномстеклереакциивкапле. реактивов.Каплю раствора алкалоидов и каплю реактивов соединяют стеклянной палочкойирассматриваютформуобразующихсякристалловпод микроскопом. По форме кристаллов проводят идентификацию алкалоидов.

Дляэтихцелейприменяютсяследующиереактивы: 1. Пикриноваякислота.

2. Пикролоноваякислота.

3. Стифниноваякислота.

4. РеактивВагнера-Бушарда.

5. Реактив Марме (раствор йодида кадмия в растворе йо- дидакалия).

Так, при проведении микрокристаллической реакции с ре- активом Марме при наличии в исследуемом растворе алкалои- довморфинаикодеинаобразуетсябелыйосадок.Однакоприна- личии морфина образуются кристаллы игольчатой формы, при этомкодеиндаетпризматическиекристаллы.

Метод4.2.2. Ттонкослойнойкослойнаяхроматографиихроматографиявозможно применить к анализу алкалоидов в сырье и препаратах. В качестве пласти- нок можно использовать пластинки «Сорбфил» и системы рас- творителей, используемые для разделения гликозидов. В каче- стве проявляющего реагента чаще всего используется реактив Драгендорфа. Кроме того, некоторые алкалоиды можно обна- ружить, просматривая пластинку в УФ-свете при длине волны 254 нм (кофеин). Этот метод используется при анализе алкалои- доввомногихвидахлекарственногорастительногосырья,атак- жевпрепаратахраувольфиизмеиной.

– 64 –

Глава 4. Подходы к анализу токсичных соединений в составе ЛР ...

Метод4.2.3. УФ--спектрофотометрииспектрофотометрияиспользуется для определе- ния подлинности алкалоидов пассифлоры инкарнатной и тер- мопсисаочередноцветковоговпрепаратах.

Методами4.2.4. Методыколичественногоанализаого нализаалкалоидовалкалоидовв лекар-

ственном растительном сырье и препаратах являются следу- ющие:

1. Спектрофотометрия (часто используется для произво- дныхтропанаиизохинолина).

2. Фотоэлектроколориметрия (может применяться для окрашенных алкалоидов, например, берберина, но в настоящее времянеиспользуется).

ское)3.. Титрование (чаще не индикаторное, а потенциометриче- 4. ВЭЖХиспользуетсядляпрепаратовбезвременникавели-

колепногоитермопсисаочередноцветкового.

5. ГЖХописанакаквозможныйметоддлялетучихалкалои- дов(алкалоидыболиголовапятнистого).

6. Гравиметрия суммы алкалоидов применяется для табле- токраунатинаитермопсиса.

4.2.5. Некоторые методики судебно-химической

экспертизыОсобую сложностьалкалоидовпредставляети их производныхсобой судебно-химический анализалкалоидовиихпроизводных.Алкалоидымогутбытькак причиной наркотической зависимости, так и стать причиной пи- щевыхотравленийлюдей.

НаиболееКачественныепоказательнымреакцииявляютсяна алкалоидыхимические экспресстесты на производные морфинана. Данное исследование может быть осуществлено при помощи набора экспресс-тестов, кото- рыйпозволяетпроводитькапельныецветныереакции:

– 65 –

Рекомендовано к изучению разделом по профилактике заболеваний сайта https://meduniver.com/

Ядовитые и потенциально опасные растения

1. Реакции образования окрашенных соединений врезультате конденсации идругих процессов— в анализе, выполняемыепроизводныхсредеморфинанаконце трироос-

новнымиван ой сернойреакциямислотыэтой категории можно назвать реакции соб- щеалкалоидными реактивами Марки (смесь концентрированной серной кислоты и формальдегида), Фреде (раствор молибдата ам- мония вконцентрированной серной кислоте), Манделина (раствор ванадата аммония в концентрированной серной кислоте), Мекке (раствор селеновой кислоты в концентрированной серной кисло- те),Эрдмана(смеськонцентрированныхазотнойисернойкислот);

реакция2. Цветныеморфинаокислительносгескацианоферратом-восстановительные(III)калия(таблреакции.1). —

Все экспресс-тесты носят предположительный характер и не могут быть интерпретированы в качестве безусловных иокончательныхзаключений.

Таблица 1

Характер окрашивания опиатов с некоторыми общеалкалоидными реактивами*

. В соответствии с химическимХимическиестроениемэкспресскокаин-тестыосаждаетсяна кокаинвсеми общеалкало- идными реактивами: реактивом Вагнера, реактивом Драгендор- фа, реактивомЗонненштейна (фосфорномолибденоваякислота),

– 66 –

реактивомГл ва 4. ПодходыМайерак,анализуреактивомксичныхШайблерасоединений(фосфорновольфрамосоставе ЛР ...-

ваякислота),пикриновойкислотойисольюРейнеке.

В то же время кокаин не взаимодействует с концентриро- ваннымисернойиазотнойкислотами,реактивомМарки,реакти- вомФреде,реактивомЭрдмана,реактивомМанделина.

На присутствие кокаина в образце могут указывать следую- щиепризнаки:

1) Характерный запах метилбензоата, образующегося при нагревании образца с концентрированной серной кислотой или при контакте порошка кокаина с метанольным раствором на- триягидроксида(рис.81).

2) СпецифическоеРис. 81. хема реакциипурпурноеобразованияокрашиваниеметилбензоата, образующееся при нагревании кокаина с концентрированными серной и азот- ной кислотами и последующей экстракцией продуктов хлоро- формом из нейтральной среды. После выпаривания растворите- ля сухой остаток обрабатывают ацетоном в присутствии щелочи (реакцияРатенасин-кана).

3) Красное окрашивание, образующееся при нагревании образца с реактивом Эрлиха (0,5% раствор -диметиламино­ бензальдегидавсмесиэтанол—сернаякислотавсоотношениип 3:2).

4)Характерноеокрашиваниедиазосоединений,получаемых после нитрования кокаина смесью азотной и серной кислот с по- следующимвосстановлениемегонитропроизводныхдосоответ- ствующих аминов с помощью солей олова (II), диазотированием иазосочетаниемсβ-нафтолом.

Использование вышеприведенных реакций во внелабора- торной практике ограничено по причине присутствия в них опе- рацийнагревания,упаривания,экстракции.

– 67 –

Рекомендовано к изучению разделом по профилактике заболеваний сайта https://meduniver.com/

ношениеГлава 4. Подходыв реакционнойанализусмеситоксионовч ыхкобальтас единенийроданидв составе-ионовЛР ....

Выявленные особенности протекания реакции позволяют до- статочно просто проводить дифференциацию между образцами кокаина гидрохлорида, основания кокаина и крэка. Например, при соотношении вышеуказанных ионов, равном 1:4, соответ- ственно, и слабокислом значении рН среды в хлороформ экстра- гируются комплексы всех перечисленных модификаций кокаина без каких-либо различий. Однако при изменении соотношения ионов кобальта и роданид-ионов до 1:0,3, и том же значении рН среды в хлороформ переходит комплекс, образующийся исклю- чительно с образцами кокаина гидрохлорида. Указанная особен- ностьпозволяетне толькопростодифференцироватьоснование от соли кокаина, а также во внелабораторных условиях оцени- ватьихсоотношениевкаждомконкретномобразце.

КокаинII. Цветныесо многимиэкстракционныекислотнымиреакциииндикаторами. образует соли, которые экстрагируются из водных растворов в хлоро- форм в широком интервале значений рН. Однако устойчивость комплексов кокаина с кобальта роданидом выше, чем у его ком- плексов с метиловым оранжевым или тропеолином 00. Важным с практической точки зрения является тот факт, что из раство- ров, содержащих одновременно кобальта роданид и кислотный красительвзависимостиотконцентрациироданид-ионов,вхло- роформ может переходить либо голубой комплекс кокаина с ко- бальта роданидом,либозеленыйкомплекс кокаина с кислотным красителем.

Методы количественного. Возможныанализварианты ациди-

метрическогоТитриметрическпрямого илий методобратного титрования с потенциоме- трическойфиксациейточкиэквивалентности.

Ден-

Исследование производных морфинана методом высо

ситометриякоэффективнойУФ-тонкослойнойобласти света хроматографическиххроматографии(ВЭТСХзон,).полу- ченных на пластинках для высокоэффективной тонкослойной хроматографии, а также некоторые методические подходы к на-

– 69 –

Рекомендовано к изучению разделом по профилактике заболеваний сайта https://meduniver.com/

несениюЯдовитыепробыи потенциальнопозволяютопасныепроводитьрастенияпомимо идентификации иколичественноеопределениепроизводныхморфинана.

Дляразделенияопиатовнапластинкахфирмы«Merck»мар- ки HPLTC G60 используются следующие хроматографические си- стемы:

1)толуол—ацетон—этанол—аммиак(45:45:7:3);

2)хлороформ—ацетон—этанол—аммиак(20:20:3:1);

3)толуол—диэтиламин—этанол(9:1:1).

После удаления остатков растворителя пластинки денсито- метрируют при длине волны 280 нм на приборе «TLC-SCANNER III» фирмы«CAMAG»(Германия).Разработанаметодикадляопределения героина икомпонентов опия вышеуказанным методом, результаты определения при использовании которой совпадают впределах 5% ошибкисрезультатамигазохроматографическогоисследования.

Морфин можно анализировать методом ВЭТСХ на уровне долейнг,послеобработкидансилхлоридомдляполученияфлуо- ресцирующих продуктов (рис. 82). Количественное определение производится на основании сравнения интенсивности флуорес- ценции хроматографических зон, анализируемого и стандартно- гообразцов,визуальноилисприменениемденситометра.

Рис. 82. Реакция образования дансилморфина

Получениедансильныхпроизводныхморфинаможетпроиз- водиться несколькими способами: дансилирование сухих остат- ков после экстракции исследуемых объектов; прямое (непосред- ственное) дансилирование водных растворов; экстрактивное дансилирование.

– 70 –