- •Введение.
- •1Этиологическая структура внебольничных пневмоний
- •1.1Полученные результаты
- •Распределение результатов обследования больных внебольничной пневмонией на монкультуру и ассоциации основных возбудителей
- •Распределение основных возбудителей внебольничных пневмоний, выделенных у больных в монокультуре и в ассоциации в группах больных первого и второго годов службы.
- •2Микробиологическая диагностика основных возбудителей внебольничной пневмонии
- •2.1Основные возбудители: краткая микробиологическая характеристика и клиническая значимость
- •2.2Забор материала
- •2.2.1Мокрота.
- •2.3Микроскопия нативного материала
- •2.3.1Бактериоскопическая диагностика
- •2.4Культуральная диагностика
- •2.4.1Среды, оптимальные для культивирования
- •2.4.1.2Среды, пригодные для культивирования s.Pyogenes.
- •2.4.1.3Среды, пригодные для культивирования h.Influenzae
- •2.4.1.3.1Шоколадный агар для выделения и идентификации h.Influenzae
- •2.4.1.3.2Шоколадный бульон
- •2.4.1.3.3Двухфазная среда для посева крови и спинномозговой жидкости
- •2.4.1.3.4Нтм агар
- •2.4.1.4Среды, пригодные для культивирования m. Сatarrhalis
- •2.4.2Идентификация выделенных возбудителей
- •2.4.2.2.1Идентификация Haemophilus influenzae
- •7.Тест на определение o-нитрофенил-бета--d-галактопиранозидазы (onpg, бета-галактозидазы)
- •8.Тест на продукцию цитохромоксидазы
- •10. Идентификация h.Influenzae с использованием X и V факторов
- •2.4.2.2.2Биотипирование h.Influenzae.
- •Биотипирование h.Influenzae
- •3Серологическая диагностика и серотипирование
- •Серотипирование выделенных штаммов пневмококка основными групповыми сыворотками (%)
- •4Резистентность к антибактериальным препаратам основных возбудителей внебольничных пневмоний
- •4.3Полученные результаты
- •Чувствительность к антибиотикам среди выделенных штаммов пневмококка, выделенных от больных
- •Частота выделения штаммов, резистентных к антибактериальным препаратам
- •5Атипичные возбудители пневмоний
- •5.1Методы диагностики пневмоний , вызванных атипичными возбудителями
- •Лабораторная диагностика инфекций, вызванных м.Pneumoniae
- •5.1.1Среды, применяемые для культуральной диагностики атипичных возбудителей внебольничных пневмоний
- •Йодометрический метод определения пенициллиназной активности микроорганизмов в бульоне.
2.2Забор материала
Материалом для бактериологического исследования при внебольничной пневмонии служат кровь, индуцированная мокрота, мокрота, полученная обычным путем (с соблюдением всех необходимых при этом правил!); жидкость бронхоальвеолярного лаважа (ЖБАЛ); экссудаты; в отдельных случаях транссудаты; резерцированные ткани и др.
Материал собирают с соблюдением правил асептики, в предварительно простерилизованную посуду; до начала антибактериальной терапии; желательно у постели больного (особенно в тяжелых клинических случаях, когда немаловажна видовая идентификация возбудителя!), в любом случае интервал между взятием материала и его посевом не должен превышать 1-2 часа.
2.2.1Мокрота.
Этот один из самых популярных в пульмонологии видов исследуемого материала должен, тем не менее, быть собран согласно определенным критериям:
Преимущество должно получать исследование индуцированной мокроты !!!
Утреннюю мокроту перед приступом кашля собирают в стерильную банку;
Перед откашливанием больной чистит зубы, полощет рот кипяченой водой с целью механического удаления остатков пищи, слущенного эпителия, микрофлоры ротовой полости,
2.2.2Жидкость бронхольвеолярного лаважа (ЖБАЛ)
Методика бронхоальвеолярного лаважа позволяет получить более значимый диагностически материал, который позволяет обнаружить возбудителя хотя бы и в меньшей концентрации по сравнению с мокротой (10-1000 раз).
2.2.3Пунктат фильтрата или абсцесса легкого
Наиболее эффективно исследовать до прорыва инфильтрата или абсцесса в дренирующий бронх. При трансторакальной пункции получают материал непосредственно из очага поражения и избегают его обсеменения посторонней микрофлорой.
2.2.4Материал из носоглотки, носовой полости
Материал забирают сухим стерильным тампоном, введенным в глубь носа. Материал из носоглотки берут стерильным заднеглоточным ватным тампоном. Тампон осторожно вводят через носовое отверстие в носоглотку. При начале кашля тампон из носоглотки удалять не нужно. Материал из носа и глотки берут разными тампонами.
2.2.5Кровь
Немаловажный исследуемый материал при инфекциях нижних дыхательных путей, особенно для выявления бактериемии, а также возникновения инвазивных форм пневмококковой и гемофилюсных инфекций; берется согласно общепринятым правилам - в период подъема лихорадки, до начала антибактериальной терапии.
2.2.6Особенности исследуемого материала при подозрении на гемофильную инфекцию
В связи с тем, что гемофильная палочка вызывает широкий спектр инфекций, для микробиологического исследования может направляться различный клинический материал. Наибольшую диагностическую ценность представляют исследования стерильных в норме биологических жидкостей: крови, плевральной, перикардиальной, синовиальной и спинномозговой жидкости (СМЖ).
Основным условием для доказательства этиологической роли H.influenzae в развитии инфекции НДП является предупреждение контаминации клинического материала микрофлорой ВДП (верхних дыхательных путей). Для этого желательно использовать методики, позволяющие избегать контакта с микрофлорой ВДП (бронхоальвеолярный лаваж, бронхоскопия с "защищенными" щетками).
Забор материала у пациентов с эпиглоттитом (мазок с надгортанника) имеет ограниченную диагностическую значимость и может представлять большую угрозу для жизни пациента (риск развития ларингоспазма). Поэтому это исследование должно проводиться только при наличии условий для оказания экстренной помощи по сохранению проходимости дыхательных путей.
Нецелесообразно микробиологическое исследование назофарингеальных мазков. Даже положительные культуры имеют сомнительную диагностическую ценность в связи с высокой частотой носительства гемофильной палочки здоровыми детьми и взрослыми.
В связи с тем, что гемофильная палочка отличается низкой жизнеспособностью во внешней среде, рекомендуется использовать транспортные среды и немедленно (не позднее 2 ч) доставлять материал в клиническую лабораторию.
Взятый материал помещают:
Мокроту- в стерильную банку со стерильными бусами или битым стеклом, или с добавлением 0,5 мл ацетилцистена для гомогенизации материала ;
ЖБАЛ- в стерильную пробирку;
кровь- в стерильную пробирку;
тампон – оптимально- в пробирку с триптозно-фосфатным бульоном (Tryptose-Phosphate Broth), транспортной средой Стюарта, в крайнем случае – в сухую стерильную пробирку для избежания контаминации из воздуха.