- •Фотоизображения клеток при помощи конфокального микроскопа.
- •Окислительный стресс. Свободные радикалы.
- •Окислительный стресс. Свободные радикалы.
- •Окислительный стресс. Свободные радикалы. Классификация.
- •Правила номенклатуры радикалов.
- •Классификация радикалов.
- •Активные формы радикалов.
- •Окислительный стресс. Свободные радикалы.
- •Окислительный стресс. Свободные радикалы.
- •Окислительный стресс. Свободные радикалы.
- •Окислительный стресс. Свободные радикалы.
- •Окислительный стресс. Свободные радикалы. Механизм. Определение.
- •Основные понятия. Оксидативный стресс (ОС).
- •Оксидативный стресс. Классификация.
- •ПРИЧИНЫ ВОЗНИКНОВЕНИЯ СВОБОДНОРАДИКАЛЬНЫХ РЕАКЦИЙ.
- •Окислительный стресс . Гипоксия.
- •Окислительный стресс. Гипергликемия.
- •АКТУАЛЬНОСТЬ ИЗУЧЕНИЯ ОКИСЛИТЕЛЬНОГО СТРЕССА В
- •ПАТОГЕНЕЗ АКТИВАЦИИ ПРОЦЕССОВ ПЕРЕКИСНОГО ОКИСЛЕНИЯ ЛИПИДОВ В ПЕРИОПЕРАЦИОННОМ ПЕРИОДЕ.
- •Патологическая роль гипоксии в ходе проведения анестезиологического
- •Методика исследования системы свободно-радикального окисления
- •Стадии кинетической кривой хемилюминенсенции.
- •Параметры кинетики кривой хемилюминесценции.
- •Параметры кинетической кривой ХЛ.
- •Параметры кинетической кривой ХЛ.
- •Результаты исследования окислительного стресса
- ••На пике травматического момента выполнения оперативного вмешательствва происходит
- ••Исследуя динамику показателей кинетической кривой прооксидантов ХЛ у больных, которым проводилась стресс-протективная и
- ••Исследуя динамику показателей собственной антиоксидантной защиты кинетической кривой ХЛ отмечено, что у больных
- ••Анализируя изменения коэффициента антиоксидантной активности K (мВ/ S, мв*с)
- •Резюме:
Методика исследования системы свободно-радикального окисления
Забирают |
Центрифугируют |
Вносят |
3-5 |
||
мл |
15 минут |
в |
крови из |
при |
измерительную |
кубитальной |
скорости |
кювету |
вены |
2000 об/ мин |
|
• 0,1 мл сыворотки крови |
Инициация |
• 0,4 мл фосфатного буфера (КН2РО4 – |
СРО |
0,272г/100мл, KCl – 0,780 г/100мл, рН=7,5 |
0,05 мл 1% |
• 0,1 мл раствора сульфата железа (0,01 мМ |
Н2О2 . |
-0,7г/100мл)
•0,1 мл люминола (приготовленного на 1н
раствора КОН). |
Регистрация |
|
30-60 сек. |
Стадии кинетической кривой хемилюминенсенции.
четыре стадии вспышки хемилюминесценции (ХЛ)I нарастание вспышки.
II максимальное свечение.III - спад вспышки.
IV – затухание.
Параметры кинетики кривой хемилюминесценции.
ХЛ, мВ |
250 |
|
|
|
|
|
200 |
|
|
|
|
|
|
|
150 |
|
|
|
|
|
|
100 |
|
I max |
|
|
|
|
50 |
|
|
|
|
|
|
|
S |
|
|
|
|
|
0 |
1 |
|
|
α |
|
|
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
4 |
5 |
|
|
|
|
|
|
6 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Время, *10 сек. |
Параметры кинетической кривой ХЛ.
Амплитуда вспышки I max (мВ)
прямопропорциональна содержанию гидроперекисей в пробе
Светосумма S max(мВ*с)
основной параметр ХЛ свидетельствует о скорости расходывания свободных радикалов
ПРООКСИДАНТНЫЙ
ПОТЕНЦИАЛ
Параметры кинетической кривой ХЛ.
Коэффициент антиоксидантной активности Tg α (у.е.)
характеризует общую антиоксидантную активность
Тангенс угла альфа
K= I max, мВ/ S, мв*с
показатель скорости спада свободнорадикального окисления
АНТИОКСИДАНТНЫЙ
ПОТЕНЦИАЛ
Результаты исследования окислительного стресса
ухирургических больных.
•Анализ показателей характеризующий систему прооксидантного потенциала сыворотки крови
показал , что у больных гнойно-септической патологией с высоким анестезиологическим риском в контрольной и исследуемых группах перед оперативным вмешательством, наблюдается активация процессов свободнорадикального окисления с увеличением прооксидантного потенциала сыворотки крови (в 4,1 раза по показателю I max, в 13,1 раза по показателю светосуммы) на фоне синдрома системно-воспалительного ответа и эндотоксикоза.
•На пике травматического момента выполнения оперативного вмешательствва происходит
усиление интенсивности вспышки ХЛ у больных 1 группы, I max возрастает в среднем значении в 7 раз; прослеживая дальнейшую динамику показателей прооксидантной системы на момент перевода из операционной, на 1-е сутки наблюдалась тенденция к высокой концентрации содержания гидроперекисей липидов в плазме, показатели I max, (мВ) превышали нормальное значение в 2 раза, S max, (мВ*с) в 3 раза соответственно.
•
•Исследуя динамику показателей кинетической кривой прооксидантов ХЛ у больных, которым проводилась стресс-протективная и антиоксидантная терапия интраоперационно, отмечено, что комбинированное использование мексидола и даларгина, эффективнее нивелирует содержание гидроперекисей липидов в плазме, по сравнению с моноприменением мексидола, не только на «высоте» хирургического стресса, что доказывает динамика показателей прооксидантного потенциала, показатель I max (мВ) у увеличивался примерно в 3 раза на этапе извлечения желчного пузыря, с последующим плавным снижением в обеих группах, достигая физиологической нормы у больных уже в раннем послеоперационном периоде.
•Исследуя динамику показателей собственной антиоксидантной защиты кинетической кривой ХЛ отмечено, что у больных с высоким анестезиологическим риском во всех группах исследования, наблюдается угнетение антиоксидантной активности примерно в 5 раз по сравнению возрастной нормой по показателю тангенса угла падения кинетической кривой , далее, в интраоперационном периоде на пике хирургической агрессии, когда отмечается усиление гиперпродукции активных форм кислорода, в отсутствии антиоксидантной
коррекционной терапии, регистрируется напряжение собственной системы антиоксидантной защиты, что свидетельствует увеличение тангенса угла падения кинетической кривой, Tg α, (у.е.) практически в 18 раз в контрольной группе. В двух исследуемых группах, наблюдалась тенденция к сохранению потенциала системы антиоксидантной защиты, показатель тангенса угла
•Анализируя изменения коэффициента антиоксидантной активности K (мВ/ S, мв*с)
можно сделать заключение, что на фоне периоперационного введения синтетических антиоксидантов, наблюдается с одной стороны, эффективное «гашение пожара» патологических реакций окислительного стресса, с другой стороны, именно комбинированное применение мексидола и даларгина позволяет не «растрачивать» организму собственные резервы компонентов системы АОЗ, K(мВ/ S, мв*с) приближается к норме к концу 1-х суток после оперативного вмешательства. У больных контрольной группы прослеживается динамика