- •Теоретические основы микротомии
- •Ручной микротом
- •Режущая машина Adams, 1798
- •Ручные режущие машины
- •Микротомы Quickett и Schanze
- •Санные микротомы 1
- •Микротом с особым типом движения ножа
- •Микротомы со стационарным ножом
- •Основные типы современных микротомов
- •Санный микротом
- •Ротационный микротом
- •Расправление срезов 1
- •Расправление срезов 2
- •Типы ножей для микротома
- •Типы одноразовых лезвий
- •Одноразовые лезвия Shandon
- •Одноразовые лезвия Surgipath
- •Одноразовые лезвия Feather
- •Одноразовые лезвия Sturkey
- •Лезвия ERMA, Richard-Allan-Scientific, Microm
- •Какой тип лезвия лучше?
- •Преимущества многоразового микротомного ножа
- •Преимущества одноразовых лезвий
- •Проверка качества режущей кромки
- •Заточка ножа 1
- •Заточка ножа 2
- •Заточка ножа 3
- •Заточка ножа 4
- •Заточка ножа 5
- •Заточка ножа 6
- •Артефакты режущей кромки ножа 1
- •Артефакты режущей кромки ножа 2
- •Геометрия углов края ножа
- •Установка ножа в микротоме
- •Оптимальный угол наклона лезвия в ротационном микротоме
- •Зачем нужна ретракция блока?
- •Аспекты края ножа
- •Определение угла наклона ножа
- •Аспекты микротомного ножа
- •Вид парафина
- •Диаграмма напряжений при резке
- •Изменения переднего угла резки
- •Деформации в парафине
- •Тепловой эффект микротомии
- •Деформации срезов при резке. Вид с боку. 1
- •Деформации срезов при резке. Вид с боку. 2
- •Деформации срезов при резке. Вид с боку. 3
- •Деформации срезов при резке. Вид с боку. 4
- •Деформации срезов при резке. Вид с боку. 5
- •Сдавливание срезов при резке 1
- •Сдавливание срезов при резке 2
- •Ткани, залитые в парафин 1
- •Ткани, залитые в парафин 2
- •Последовательность операций микротомии
- •Артефакты микротомии 1
- •Артефакты микротомии 2
- •Артефакты микротомии 3
- •Артефакты микротомии 4
- •Артефакты микротомии 5
- •Причины
- •Ленты закручиваются вбок
- •Неадекватная поддержка ткани
- •Сдавленные срезы в ленте
- •Чередование толстых и тонких сдавленных срезов
- •Середина срезов выбухает
- •Объект выпадает из блока или разбивается об нож
- •Разрезанные ленты
- •Ленты прилипают к блоку
- •Меры борьбы со статическим электричеством
- •Дефект
- •Сдавленные, сморщенные и сжатые срезы
- •Деформации угла поворота ножа на санном микротоме
- •Величина угла резки и угол поворота
- •Правила адекватной фиксации
- •Оптимальная скорость резки в потоке работы
- •Микротомия без участия человека?
- •Общие трудности в микротомии
- •Цитированная литература
- •Благодарю за внимание!
Артефакты режущей кромки ножа 1
Плохо заточенный край
Закругленный полировкой в линию |
31 |
|
Артефакты режущей кромки ножа 2
Старая зазубрина |
Зазубрина, закругленная |
|
полировкой |
Волнистый край |
Избыточная полировка |
32 |
|
|
Геометрия углов края ножа
В. Геометрия углов
A – угол клина
B – угол между фасетками C – верхний угол фасетки D – нижний угол фасетки E – угол резки
G – наклон (ниж. стороны) H – угол зазора
Скос 90o- E G=D+H F=A+G=A+D+H
C. Углы скоса и угол наклона в 5° для правильного размещения ножей с неодинаковыми фасетками.
А. Отпечаток ножа с неравными фасетками. |
33 |
Установка ножа в микротоме
А. Диаграмма, показывающая угол зазора и увеличение толщины среза из-за сжатия (компрессии).
В. Эффект клина при отсутствии угла зазора.
С. Настройка угла зазора.
34
Оптимальный угол наклона лезвия в ротационном микротоме
В ротационных микротомах при использовании одноразовых лезвий оптимальный угол наклона лезвия от 0 до 5о.
35
Зачем нужна ретракция блока?
Ретракция сохраняет срезаемую поверхность блока от лишнего контакта с микротомным ножом.
Х – толщина среза 1 – образец 2 – движение блока 3 – нож
4 – обратный ход R – ретракция
Ретракция – запрограммированное движение блока, исключающий контакт поверхности среза с ножом при возврате блока для следующего среза. При каждом новом движении для среза блок возвращается на необходимое количество микрон + толщина среза.
36
Аспекты края ножа
37
Определение угла наклона ножа
38
Аспекты микротомного ножа
1.Угол скоса фасетки (определяется при заточке)
2.Острота (определяется при заточке)
3.Полировка фасетки (определяется при заточке)
4.Угол наклона ножа (фиксация ножа в микротоме)
5.Передний угол резки (фиксация ножа в микротоме)
6.Угол поворота при использовании на санном микротоме (фиксация ножа в микротоме).
39
Вид парафина
Срез 20 мкм, т.пл. 53оС.
Косые, про- дольные и поперечные срезы – пластинки парафина.
Черные пятна и непрозрач- ные линии – оптические деформации.
Справа – срез с пластинча- той структу- рой, плавающий в амилацетате40.