Эозин

•Самый общеиспользуемый краситель – эозин Y (желтоватый), Eosin (C. I. 45380), синтетический краситель, обладает флюоресценцией.

•Растворим в воде и в спирте. Рекомендуемая концентрация 0.1-2%.

•Можно окрашивать и регрессивно и прогрессивно (с дифференцировкой и без)

•Время окраски и желаемая интенсивность оттенков подбираются опытным путем.

•Подкисление 1 каплей ледяной уксусной кислоты на 100 мл подчеркивает окраску.

Варианты растворов эозина

•Водный эозин в концентрации 0.1-2% Быстро извлекается в воде

•Спиртовой эозин в концентрации 0.1-0.5% Быстро извлекается спиртами

•Водно-спиртовые растворы эозина 0.1-2% Дольше удерживается при воздействии воды и спиртов.

Имеются варианты с добавками к эозину других красителей для получения разных оттенков.

Окраска эозином

Dakocytomation. Education Guide. Special Stains and H&E, 2nd ed., р. 139.

Результаты окраски

Трудные моменты при окраске многих партий

1

Контроль качества (лучшие контроли: аппендикс и ворсинчатая оболочка плаценты)

2

Продление срока годности растворов

3

Возможность перекраски окрашенных Г-Э стекол другими методами

4

Восстановление окраски архивных стекол

5

Поддержание чистоты растворов на одном уровне

Управление окраской

1Гарантия надлежащей фиксации, адекватной проводки и достаточной толщины среза

2

Изменение формул красителей

3Уменьшение интенсивности окраски дифференцирующими агентами

4Подчеркивание ядерной окраски (бихромат калия, раствор Буэна, сульфат цинка и др.)

5

Изменение интенсивности окраски эозином

6Использование хорошего микроскопа

Ручная окраска гематоксилином и эозином

Длительность протокола 20 – 60 минут Партия стекол – 25 шт.

100 стекол будут окрашены через 1,2 – 4 часа

Все процедуры проводятся вручную.

Автоматизация окраски гематоксилин-эозин

Автоматизированная Г-Э окраска состоит из времени размещения/извлечения стекол из стайнера и всегда выполняется одним и тем же способом. Это устраняет задержки, существующие при ручном окрашивании, а также необходимость вмешательства лаборанта в этапы дифференцировки, и поэтому время на 1 стекло в 50% случаев меньше, чем ручная окраска с использованием аналогичного протокола. Рутинная окраска автоматизирована в 75% лабораторий США и у 32% лабораторий из других стран.

Автоматизация сокращает время окраски на 50%.

Лаборант при окраске в стейнере занимается только загрузкой/выгрузкой стекол и сменой реагентов.

Оценка конечных точек

контрольных стеклах

Конечная точка при любых вариантах красителей и процедурах одна и та же.

Хорошее или плохое стекло?

НЕТ «ПЛОХИХ» ИЛИ «ХОРОШИХ» СТЕКОЛ, ЕСТЬ АДЕКВАТНАЯ ИЛИ НЕАДЕКВАТНАЯ ОКРАСКА,

ПОСКОЛЬКУ:

•Предпочтения патологов могут отличаться

•Анатом может интересоваться чистотой структуры и красотой баланса, а патолога может интересовать какая-то определенная структура, определяющая диагноз

•Лаборант обязан учитывать предпочтения патологов

Правильно окрашенные стекла однозначно оцениваются всеми патологами в разных учреждениях:

главный критерий:

ДИАГНОСТИЧЕСКАЯ ПРИГОДНОСТЬ СТЕКЛА