Praktikum_gistologia
.pdfвырост в форме барабанной палочки. Это так называемое тельце Барра (половой хроматин), выявляемое только в клетках женщин.
Препарат 2. «Кислая фосфатаза в моноцитах» (окраска по методу Гомори). Обратите внимание, что на присутствие фермента в моноцитах указывают черные гранулы, выявляемые под большим увеличением микроскопа.
Препарат 3. «Мазок лимфы» (окраска - азур-II и эозин). В препарате в большом количестве видны лимфоциты и плазматические клетки (их можно узнать по «светлому дворику» – неокрашенному округлому участку цитоплазмы вблизи ядра).
Материалы для самоконтроля
1.Мезенхима, ее строение и значение.
2.Цитоморфология и цитофизиология эритроцитов.
3.Классификация, строение и функции лейкоцитов.
4.Лейкоцитарная формула.
5.Тромбоциты.
6.Что такое гемограмма?
7.Клеточный состав лимфы.
Контрольные тесты
Вопрос 1. Для базофильных гранулоцитов характерно:
1.Метахромазия гранул.
2.Наличие гепарина и гистамина в гранулах.
3.Слабо сегментированное ядро.
4.Выраженная сегментация ядра.
Вопрос 2. Для моноцита характерно:
1.Диаметр клетки в мазке крови - 16-20 мкм.
2.Сегментированное ядро.
3.Бобовидное ядро.
4.Много лизосом.
Вопрос 3. Эритроцит крови человека:
1.Содержит ядро.
2.Базофильно окрашивается.
3.Оксифильно окрашивается.
4.Не содержит ядра.
Вопрос 4. Гранулы с кристаллоидом характерны для:
1.Кровяных пластинок.
2.Эозинофильных гранулоцитов.
3.Нейтрофильных гранулоцитов.
4.Лимфоцитов.
– 61 –
Учебно-исследовательские задачи
1.В мазке крови видна клетка с двудольчатым ядром и крупной оксифильной зернистостью в цитоплазме. Что это за клетка?
2.В мазке крови видна округлая клетка с крупным круглым ядром. Вокруг ядра имеется узкий ободок базофильной цитоплазмы. Какая это клетка?
3.Определить лейкоцитарную формулу. Для этого, передвигая ступенчатой линией препарат, подсчитать 100 лейкоцитов, считая в каждом поле зрения все лейкоциты и определяя среди них отдельно число нейтрофильных, эозинофильных, базофильных гранулоцитов, лимфоцитов и моноцитов. Из результатов подсчета вывести лейкоцитарную формулу - процентное соотношение различных форм лейкоцитов.
Задания для самостоятельной работы
1.Написать формулу крови (гемограмму).
2.Написать лейкоцитарную формулу.
3.Нарисовать схематично ультраструктуру нейтрофильного гранулоцита.
4.Нарисовать схему строения эозинофильного гранулоцита по данным электронной микроскопии.
Литература
1.Данилов Р.К. Гистология. Эмбриология. Цитология. Учебник для студентов медицинских вузов. – М.: ООО «Медицинское информационное агентство», 2006. – С.118-130.
2.Гистология, эмбриология, цитология: учебник / Ю.И.Афанасьев, Н.А.Юрина, Е.Ф.Котовский и др.; под ред. Ю.И.Афанасьева, Н.А.Юриной. – 6-е изд. перераб. и доп. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2013.
– С.138-161.
– 62 –
КРОВЕТВОРЕНИЕ. КРОВЕТВОРНЫЕ ТКАНИ
Цель занятия
Знать строение кроветворных тканей, развитие крови, особенности миелоидного и лимфоидного кроветворения, регенерацию крови. Уметь определять на гистологических препаратах клетки эритроцитарного, гранулоцитарного, тромбоцитарного и лимфоцитарного дифферонов. Быть ознакомленным с реактивными изменениями миелоидной и лимфоидной кроветворных тканей при действии ионизирующего излучения.
Работа с препаратами. Ориентировочная основа действий
Задание 1. Препарат (рис. 21) «Мазок красного костного мозга (окраска - азур-II и эозин). При малом увеличении рассмотреть общий вид препарата. При большом увеличении рассмотреть различные клетки костного мозга. Найти клетки эритроидного ряда (эритробласты, эритроциты). Обратить внимание на вид и цвет ядра и цитоплазмы эритробластов различной степени зрелости. Отыскать миелоциты, рассмотреть форму их ядер, а также обратить внимание на количество, величину и окраску гранул в цитоплазме. Найти и изучить структуру мегакариоцитов (крупных многоядерных клеток). Зарисовать препарат под большим увеличением и сделать соответствующие обозначения.
2
1
8 
3
5 4
6
7
Рис.21. Мазок красного костного мозга. 1 – мегакариоцит, 2 – метамиелоцит, 3 – малодифференцированные клетки-
предшественники, 4 – базофильный эритробласт, 5 – базофильный метамиелоцит, 6 – оксифильный метамиелоцит, 7 – оксифильный эритробласт, 8 – нейтрофильный сегментоядерный гранулоцит.
– 63 –
Задание 2. Электронная микрофотография ретикулоцита. Рассмотреть особенности строения ретикулоцита, являющегося непосредственным предшественником эритроцита. Обратить внимание на наличие рибосом, митохондрий, комплекса Гольджи.
Задание 3. Электронная микрофотография мегакариоцита. Рассмотреть ультраструктуру предшественника кровяных пластинок, обратить внимание на его ультраструктуру.
ДЕМОНСТРАЦИОННЫЕ ПРЕПАРАТЫ
Препарат 1. «Кровяные островки в зародыше курицы на стадии образования туловищной и амниотической складок» (окраска - гематоксилин). Рассмотреть кровяные островки, периферические клетки которых дифференцируются в эндотелиоциты, а центрально расположенные – в клетки крови.
Препарат 2. «Ретикулоциты крови человека» (окраска - бриллианткрезилблау). При этой окраске в ретикулоцитах видны сетчатые структуры ярко-синего цвета. Эритроциты имеют голубую окраску.
Препарат 3. «Ретикулярная ткань лимфатического узла» (рис. 22) (окраска – гематоксилин и эозин). При большом увеличении изучить участки лимфатического узла, образованные ретикулярной тканью (лимфоидные узелки и мозговые тяжи). Обратить внимание в мозговом веществе на ретикулярные клетки отростчатой формы, соприкасающиеся друг с другом отростками. Между ретикулярными клетками видны округлые лимфоциты.
Составить протокол описания препарата.
1
4
3 
2
Рис.22. Ретикулярная ткань лимфатического узла. 1 – лимфоидный узелок, 2 – ретикулярная ткань, 3 – лимфоциты, 4 – соединительная ткань
– 64 –
Материалы для самоконтроля
1.Этапы кроветворения в онтогенезе
2.Дать характеристику стволовой кроветворной клетки. Унитарная теория кроветворения. Вклад профессора А.А. Максимова в учение о гемопоэзе.
3.Что такое миелоидная и лимфоидная ткани?
4.Какова роль микроокружения в процессе гемоцитопоэза?
Контрольные тесты
Вопрос 1. Эмбриональный источник развития кроветворных тканей:
1.Мезодерма.
2.Кожная эктодерма.
3.Миотом.
4.Мезенхима.
Вопрос 2. Основоположником унитарной теории кроветворения является.
1.Н.Г. Хлопин.
2.А.А. Заварзин.
3.С.И. Щелкунов
4.А.А. Максимов.
Вопрос 3. Стволовая кроветворная клетка сходна, по строению с:
1.Большим лимфоцитом.
2.Малым лимфоцитом.
3.Моноцитом.
4.Мегакариоцитом.
Вопрос 4. Метамиелоцит – это предшественник:
1.Гранулоцита.
2.Лимфоцита.
3.Моноцита.
4.Эритроцита.
Вопрос 5. Для мегакариоцита характерно все, кроме:
1.Оксифилии цитоплазмы.
2.Базофилии цитоплазмы.
3.Полиплоидии.
4.Гигантского размера.
Вопрос 6. Свойство самоподдержания характерно для:
1.Эритробластов.
2.Мегакариоцитов.
3.Лейкоцитов.
4.Стволовых клеток.
– 65 –
Учебно-исследовательские задачи
1.В миелоидной ткани обнаружена мелкая шаровидная клетка с темным сферическим ядром и узким ободком оксифильной однородной цитоплазмы. Что это за клетка?
2.В красном костном мозге количественно преобладают клетки V и VI классов гемоцитопоэза. С чем это может быть связано?
Задания для самостоятельной работы
1.Зарисовать с учебной таблицы схему развития клеток крови. Обозначить классы гемопоэза и названия клеток в дифферонах.
2.Нарисовать схематично мегакариобласт.
3.Зарисовать схематично нейтрофильный миелоцит.
Литература
1.Данилов Р.К. Гистология. Эмбриология. Цитология. Учебник для студентов медицинских вузов. – М.: ООО «Медицинское информационное агентство», 2006. – С.130-137.
2.Гистология, эмбриология, цитология: учебник / Ю.И.Афанасьев, Н.А.Юрина, Е.Ф.Котовский и др.; под ред. Ю.И.Афанасьева, Н.А.Юриной. – 6-е изд. перераб. и доп. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2013.
– С.161-179.
– 66 –
РЫХЛАЯ СОЕДИНИТЕЛЬНАЯ ТКАНЬ. СОЕДИНИТЕЛЬНЫЕ ТКАНИ
СО СПЕЦИАЛЬНЫМИ СВОЙСТВАМИ
Цель занятия
Знать строение, функции, гистогенез и регенерацию рыхлой соединительной ткани и соединительных тканей со специальными свойствами. Уметь определять на гистологических препаратах различные клетки и структуры межклеточного вещества. Быть ознакомленным с реактивными изменениями клеток и межклеточного вещества рыхлой соединительной ткани при повреждении, воспалении и ее участии в заживлении ран.
Работа с препаратами. Ориентировочная основа действий Задание 1. Препарат «Рыхлая соединительная ткань, пленочный
препарат » (окраска - гематоксилин). При малом увеличении рассмотреть строение рыхлой соединительной ткани. Найти пучки коллагеновых волокон и эластические волокна, а между ними клетки. При большом увеличении изучить детали строения коллагеновых и эластических волокон. Изучить структуру фибробластов, макрофагов и других клеток соединительной ткани. Зарисовать участок ткани и обозначить коллагеновые и эластические волокна, основное аморфное межклеточное вещество, фибробласты и макрофаги (см. рис. 5).
Описание препарата
Рассматривая препарат при малом увеличении, мы видим, что в основном аморфном веществе (оно не окрашено) рыхлой соединительной ткани проходят в различных направлениях пучки коллагеновых волокон и эластические волокна. Пучки коллагеновых волокон имеют вид толстых длинных тяжей, они волнообразно проходят в различных направлениях. В отличие от пучков коллагеновых волокон эластические волокна имеют незначительную толщину. Во многих местах они разветвляются и образуют сети с широкими петлями. Эластические волокна легко растяжимы и обладают пружинящими свойствами. Основным видом клеток рыхлой соединительной ткани являются фибробласты. Они имеют неправильную форму, небольшие отростки. Тело клетки на препаратах не имеет резко очерченных границ. Ядро имеет овоидную форму и располагается в центре клетки. Другим часто встречающимся клеточным элементом является макрофаг. Это округлая клетка, иногда неправильной амебоидной формы, с четко обозначенными границами. Ядра макрофагов имеют округлую или бобовидную форму и окрашиваются значительно интенсивнее, чем у фибробластов. Кроме названных клеток встречаются также лимфоциты, гранулоциты и другие клетки.
– 67 –
Задание 2. Препарат «Срез рыхлой соединительной ткани пищевода» (окраска - гематоксилин и эозин). Препарат представляет собой поперечный срез пищевода. В центре препарата виден узкий неправильной формы просвет пищевода, выстланный многослойным плоским неороговевающим эпителием. Непосредственно под эпителием находится рыхлая соединительная ткань. Зарисовать при большом увеличении участок рыхлой соединительной ткани, обозначить клетки и оксифильное межклеточное вещество (см. рис. 20).
Задание 3. Рассмотреть электронную микрофотографию фибробласта. Обратить внимание на развитую гранулярную эндоплазматическую сеть.
Задание 4. Рассмотреть электронную микрофотографию макрофага. Обратить внимание на особенности его ультраструктуры, наличие фагосом и лизосом.
Задание 5. Рассмотреть электронную микрофотографию тканевого базофила. Обратить внимание на наличие крупных гранул в цитоплазме.
Задание 6. Рассмотреть электронную микрофотографию плазмоцита. Обратить внимание на хорошо развитые комплекс Гольджи и гранулярную эндоплазматическую сеть.
Задание 7. Рассмотреть электронную микрофотографию коллагеновых волокон. Обратить внимание на их исчерченность.
Задание 8. Рассмотреть электронную микрофотографию ретикулярной клетки и ретикулярных фибрилл. Обратить внимание на ультраструктуру клетки и волокон.
Задание 9. Рассмотреть электронную микрофотографию эндотелиоцита. Обратить внимание на наличие пиноцитозных пузырьков, с помощью которых осуществляется транспорт веществ через клетку.
ДЕМОНСТРАЦИОННЫЕ ПРЕПАРАТЫ
Препарат 1. «Гликозаминогликаны и гликопротеины в основном веществе рыхлой соединительной ткани» (окраска - альциановый синий и ШИКреакция). Гликозаминогликаны окрасились альциановым синим в сине-зе- леный цвет, а гликопротеины окрасились ШИК-реактивом в розовый цвет.
Препарат 2. (рис. 23) «Тканевые базофилы в рыхлой соединительной ткани языка» (окраска - толуидиновый синий). При малом увеличении найти по ходу сосудов среди волокон рыхлой соединительной ткани крупные клетки сине-фиолетового цвета с зернистой цитоплазмой. Это тканевые базофилы. При большом увеличении изучить детали их строения (ядро, цитоплазма с метахроматичными зернами).
В альбоме составить протокол описания препарата.
– 68 –
1
2
3
4
Рис.23. Тканевые базофилы. 1 – тканевый базофил, 2 – ядро, 3 – гранулы в цитоплазме клетки, 4 – плазмолемма.
Описание препарата
Язык покрыт многослойным плоским эпителием. Под эпителием располагается рыхлая соединительная ткань. Глубже находятся поперечнополосатые мышечные волокна, между пучками которых также располагается рыхлая соединительная ткань. В этой ткани, окрашенной в светло-голубой цвет, встречаются крупные клетки с базофильно окрашенными гранулами в цитоплазме - тканевые базофилы. Обратите внимание, что гранулы окрашены метахроматично, в сине-сиреневый или сине-фиолетовый цвет. Количество гранул в тканевых базофилах может быть различно: иногда их так много, что они маскируют ядра. Чаще всего тканевые базофилы располагаются вблизи кровеносных сосудов.
Препарат 3. (рис. 24) «Накопление краски макрофагами рыхлой соединительной ткани» (окраска - прижизненный краситель - трипановый синий; окраска среза - гематоксилин-эозин). Найти макрофаги, изучить их цитоплазму с включениями частичек синей краски.
Описание препарата
Характерной особенностью макрофагов является их способность накапливать в цитоплазме витальный (прижизненно введенный) краситель (например, трипановый синий). После прижизненного фагоцитирования макрофагами частиц краски приготовлен гистологический препарат, срез окрашен гематоксилином и эозином. При малом увеличении найти на препарате рыхлую соединительную ткань. При большом увеличении в ней обнаруживаются макрофаги, представляющие собой клетки неправильной формы с цитоплазмой, заполненной большим количеством серо-голубых зерен трипановой сини, фагоцитированной клеткой.
– 69 –
1
2
3
Рис.24. Макрофаги, накопившие краску в цитоплазме. 1 – макрофаг, 2 – ядро, 3 – частицы краски в цитоплазме макрофага.
Препарат 4. «Жировая ткань, обезжиренная спиртом» (окраска - гематоксилин и эозин). Изучить при большом увеличении участок жировой ткани подкожной жировой клетчатки в коже пальца, найти жировые клетки – адипоциты. Обратить внимание на полости в клетках на месте растворившихся капель жира, периферически расположенные уплощенные ядра адипоцитов, прослойки рыхлой соединительной ткани между жировыми дольками.
В альбоме составить протокол описания препарата .
Описание препарата
Препарат представляет собой срез кожи пальца человека. Жировая ткань является одной из разновидностей соединительных тканей со специальными свойствами. Из нее состоит подкожная жировая клетчатка – гиподерма. При малом увеличении видны светлые жировые дольки, разграниченные соединительнотканными прослойками. Каждая жировая долька представлена адипоцитами, из которых в процессе приготовления препарата удален жир (при проводке материала жир растворился в спиртах, поэтому клетки выглядят светлыми, неокрашенными). При большом увеличении можно рассмотреть плоские ядра адипоцитов, смещенные к периферии клетки.
Препарат 5. «Плазмоциты в рыхлой соединительной ткани» (окраска - метиловый зеленый и пиронин). Хроматин (напоминающий по локализации расположение спиц велосипедного колеса) имеет светло-зеленую окраску, а ядрышки и цитоплазматическая РНК – ярко-красные.
– 70 –