- •Принципы систематики:
- •11. Классификация патогенных прокариот по Берджи.
- •12. Принципы устройства иммерсионного, люминесцентного, электронного микроскопов. Типы микроскопических препаратов.
- •13. Основные формы микроорганизмов. Этапы приготовления микроскопических препаратов. Способы фиксации.
- •14. Методы микробиологических исследований. Бактериоскопический метод диагностики инфекционных заболеваний.
- •16. Характеристика клеточной стенки микробов.
- •17. Защитные приспособления микроорганизмов. Способы выявления капсул. Капсульные бактерии. Способы выявления спор. Спорообразующие бактерии. Окраска по Бурри-Гинсу:
- •Микро- и макрокапсула бактерий
- •Спора и спорообразование у бактерий
- •18. Жгутики бактерий. Определение подвижности.
- •19. Волютиновые зёрна. Химический состав. Функции. Способы окраски.
- •20. Простые и сложные методы окраски. Механизм окраски по Граму.
- •Окраска по Граму (механизм)
- •21. Морфология и ультраструктура спирохет. Методы микроскопии.
- •22. Актиномицеты. Систематическое положение. Роль в природе. Идентификация.
- •23. Морфология, классификация и способы обнаружения грибов.
- •24. Риккетсии. Таксономия патогенных риккетсий. Особенности размножения. Способы выявления.
- •25. Хламидии. Таксономия патогенных риккетсий. Особенности морфологии и развития. Способы выявления.
- •26, 27. L-трансформанты. Характеристика. L-формы бактерий. Морфология, биологические свойства.
- •28. Микоплазмы. Таксономия. Особенности строения и размножения. Методы обнаружения.
- •29. Метаболизм бактерий. Транспорт питательных веществ. Типы питания.
- •30. Основные принципы конструирования питательных сред. Классификация.
- •31. Бактериологический метод диагностики.
- •32. Ферменты бактерий. Классификация. Практическое использование биохимической активности микроорганизмов для видовой идентификации.
- •33. Рост и размножение бактерий. Фазы размножения бактерий в закрытых системах.
- •34, 35 Классификация микроорганизмов по типу дыхания. Культивирование анаэробных бактерий. Этапы выделения культур анаэробных бактерий.
- •Культивирование и выделение чистых культур анаэробных бактерий.
- •Физические методы.
- •Биологические методы.
- •Особенности выделения чистых культур анаэробных микроорганизмов.
33. Рост и размножение бактерий. Фазы размножения бактерий в закрытых системах.
Рост – координированное воспроизведение всех компонентов бактериальной клетки и увеличение ее биомассы.
Размножение – воспроизводство и увеличение количества клеток, приводящее к образованию бактериальной популяции.
Стадии роста периодической бактериальной культуры:
Фаза (стадия) |
Характеристика |
Лаг-фаза |
Деления клеток не происходит |
Положительного ускорения |
Скорость деления клеток увеличивается |
Логарифмического роста (экспоненциальная) |
Скорость деления клеток максимальная |
Отрицательного ускорения |
Скорость деления клеток снижается |
Стационарная фаза максимума |
Количество живых клеток постоянно |
Ускоренной гибели |
Количество живых клеток начинает снижаться (убывает с увеличивающейся скоростью) |
Логарифмической гибели |
Количество живых клеток убывает с максимальной скоростью |
Уменьшения скорости гибели |
Количество живых клеток убывает с уменьшающейся скоростью |
Стационарная фаза минимума |
Количество живых клеток минимально |
34, 35 Классификация микроорганизмов по типу дыхания. Культивирование анаэробных бактерий. Этапы выделения культур анаэробных бактерий.
В зависимости от того, какую роль кислород играет в процессах получения энергии, все микроорганизмы подразделяются на 6 групп:
1) облигатные аэробы - им необходимо большое количество кислорода;
2) микроарофилы - кислород необходим в небольших количествах, меньше, чем в атмосферном воздухе;
3) капнофилы - при культивировании необходимы O2 и CO2;
4) облигатные анаэробы - не могут расти в присутствии кислорода;
5) аэротолерантные анаэробы - могут расти в присутствии небольшого количества кислорода;
6) факультативные анаэробы - используют как аэробное, так и анаэробное дыхание, или ферментирование. Это зависит от доступности кислорода.
Культивирование и выделение чистых культур анаэробных бактерий.
Культивирование анаэробов производят в бескислородных условиях или создают сниженное парциальное содержание кислорода в среде или в воздухе. Отношение бактерий к кислороду можно определить, произведя посев культуры уколом в столбик агаризованной питательной среды. Аэробы вырастут на поверхности столбика, анаэробы - в глубоких слоях ПС. Факультативные анаэробы будут расти как на поверхности среды, так и в ее глубине.
Необходимые условия для культивирования анаэробных микроорганизмов создаются физическими, химическими и биологическими методами.
Физические методы.
1. Регенерация (кипячение) жидких питательных сред.
После посева их заливают сверху слоем парафинового или вазелинового масла для разобщения от атмосферного воздуха.
2.Посев в «высокий столбик».
Кислород воздуха диффундирует обычно на расстоянии 1,5-2,0 см от поверхности среды, а в глубине создаются благоприятные условия для роста облигатных анаэробов.
3.Выращивание культур в анаэростатах.
Анаэростаты представляют собой металлические цилиндрические сосуды с герметически закрывающейся крышкой, в которой имеется ниппель для соединения его с насосом с помощью вакуумной резиновой трубки. Из анаэростата вакуумным насосом откачивается воздух. Степень разреженности воздуха контролирует манометр.
Аппарат Киппа. Более старый способ замены воздуха индифферентным газом, например водородом.
Химические методы.
1. Добавление в среду редуцирующих и легко окисляемых веществ.
Добавляют кусочки паренхиматозных органов ( печень, селезенка и др. ), глюкозу, аскорбиновую кислоту, цистеин. Применяют и неорганические восстановители: сульфиды, сероводород, цитраты.
2.Химическое поглощение кислорода воздуха происходит при добавлении, например щелочного раствора пирогаллола в особых приборах, примером которого может служить свеча Омелянского - стеклянный прибор в форме свечи. Внутрь помещают одну пробирку с жидкой средой с посевом анаэробов (среда Китта-Тароции). На дно прибора наливают щелочной раствор пирогаллола. Сверху прибор закрывают стеклянным колпачком и парафинируют;
3. Для образования водорода и углекислого газа, необходимых для роста облигатных анаэробов используются специальные пакеты, при добавлении воды в которые происходит активация с выделением соединений, которые связывают кислород воздуха (газогенераторные пакеты).