8.5. Род микобактерий

Род Mycobacteriumвключает много патогенных и непатоген­ных для человека и животных видов, среди которых для практи­ческой медицины и ветеринарии имеют значение М.tuberculosis, М.bovis,M.aviumи М.paratuberculosis.

Первичное исследование микобактерий предполагает куль­тивирование и определение биохимической активности после выделения: синтез никотиновой кислоты, наличие каталазы, ни-тратредуктазы, уреазы; чувствительность к гидразиду тиофен-2-карбоксиловой кислоты и к циклосерину (TorlotinJ., 1986).

В последнее время отмечается снижение высеваемости ми­кобактерий туберкулеза, бактериологические методы позволя­ют выявить микобактерий лишь у 50—70% больных (Голышев-ская В. И. и соавт., 1997) и, в связи с этим, отдельные авторы (Николаева Г. М., 1995; DuncanК., 1997 и др.) рекомендуют больше внимания уделять другим современным методам: моле-кулярно-генетическим и иммунологическим.

Тем не менее, выделение и идентификация возбудителя из патологического материала посевом на различные среды тради­ционно остается основой лабораторной диагностики туберкуле­за, особенно у животных. По сравнению с другими инфекцион­ными агентами, бактериология М. tuberculosisдо сих пор явля­ется наиболее трудоемкой и сложной (Финкель Е. А., 1985), что определяется как его особенностями, так и сложностью состава питательных сред, трудностями их стандартизации. В большин­стве современных микобактериологических лабораторий для выделения чистой культуры возбудителя используют плотные среды, что (учитывая длительный срок репродукции микобакте­рий, равный 18—24 ч), требует в среднем 34 суток для выделения и идентификации М.tuberculosisи дополнительно не менее 2—3 недель для определения лекарственной чувствительности (Shin-nickТ.,GoodR, 1995). По даннымDuncanК. (1997) получение культуры микобактерий и верификация диагноза туберкулеза охватывает срок от 8 до 17 недель. Соответственно, одним из важных направлений бактериологической диагностики тубер­кулеза является поиск и создание более эффективных и менее сложных по составу сред для ускоренного выделения возбудите­ля (Финн Э. Р., 1970, 1972, 1973), которые на сегодня недоста­точно совершенны (Гольшеская В. И. и соавт., 1987). Основная масса работ, естественно, касается изучения плотных агаровых и яичных питательных сред. Агаровые среды характеризуются, вследствие их прозрачности, более ранним видимым ростом ко­лоний. Яичные среды включают различные ингредиенты, спо­собствующие ускоренному росту микобактерий туберкулеза, а следовательно и их выделению (этанол, сидений, пировино-градную кислоту, глюкозу и другие препараты) (Malski M., 1980; BogdanescuV.etal., 1981;JaqwessP.etal., 1981).

Еще StonebrinkB. (1951, 1952, 1958) предложил среды с пиро-виноградной кислотой для выделения, в основном, М.bovis. В дальнейшем эту среду модифицировали в различных направле­ниях. Leslie I. (1959) заменил пировиноградную кислоту пирува-том натрия для создания более стабильного значения рН и, тем самым, устранил необходимость дополнительной нейтрализации среды в процессе ее приготовления.Dixon J., Cuthbert E. (1967), Viznerova A., Polansky F. (1972), Fanea E. et al. (1972) подтвердили стимулирующее действие пирувата натрия на микобактерий ту­беркулеза. Dubos R. (1953) установил наличие более широкого диапазона оптимального для роста микобактерий рН среды углутаминовой кислоты (5,5—6,9), в отличие от пировиноградной (6,4—6,9). Ковалев Г. К., Александров Н. А. (1969), используя оба эти преимущества предложили среду ПГ-30, в состав которой входят как пируват натрия, так и глутаминовая кислота.

Увеличившееся число инфекций, вызванных нетуберкулез­ными бактериями (М. fortuitum, M. smegmatis, M. avium, M. phley, М.kansasii,M.cheloneiи М.butyricum) ставит перед службами

262

263

СОДЕРЖАНИЕ

ВВЕДЕНИЕ 3

1. ОСНОВНЫЕ ПРЕДСТАВЛЕНИЯ О МИКРОБИОЛОГИ­ ЧЕСКИХ СРЕДАХ И ИХ КОМПОНЕНТАХ 5

1. Классификация сред, терминология 5

2. Питательные основы 8

3. Агар-агар и его заменители 10

4. Сыворотка крови животных и человека 13

5. Твины 18

6. Минеральные соли 21

7. Селективные агенты 27

Красители 27

Антибиотики 38

2. ГРАМОТРИЦАТЕЛЬНЫЕ АЭРОБЫ 55

1. Род Псевдомонады 55

2. Сем. Нейссерии 72

3. Род Бордетеллы 87

4. Род Бруцеллы 92

5. Возбудитель туляремии 99

6. Легионеллы 103

3. ГРАМОТРИЦАТЕЛЬНЫЕ ФАКУЛЬТАТИВНЫЕ АНА­ ЭРОБЫ 106

3.1. Сем. Энтеробактерии 106

Род Сальмонеллы 108

Род Шигеллы 121

Род Эшерихии 124

Род Иерсинии 136

Род Цитробактеры 146

Род Клебсиеллы 146

2. Сем. Вибрионы 152

3. Сем. Пастереллы 164

Род Пастереллы 164

Род Хемофилус 165

3.4. Род Кампилобактерии 170

4. Сем. СПИРОХЕТЫ 186

1. Род Лептоспиры 187

2. Род Трепонемы 192

3. Род Борреллии 194

5. ГРАМОТРИЦАТЕЛЬНЫЕ АНАЭРОБЫ 195

5.1. Сем. БАКТЕРОИДЫ 195

6. Сем. МИКОПЛАЗМЫ 197

7. ГРАМПОЛОЖИТЕЛЬНЫЕ КОККИ 209

1. Род Стафилококки 2W

2. Род Стрептококки 220*

3. Род Микрококки 230

4. Род Энтерококки 230

397

8.ГРАМПОЛОЖИТЕЛЬНЫЕ ПАЛОЧКИ 232

8Л. Род Клостридии 232

2. Род Коринебактерии 240

3. Род Листерии 243

4. Род Бациллы 253

5. Род Микобактерии 262

9.ГРИБЫ : 291

10.ПЕРЕЧЕНЬ НОРМАТИВНЫХ ДОКУМЕНТОВ И ОР­ ГАНИЗАЦИЙ РОССИИ, ИМЕЮЩИХ ОТНОШЕНИЕ К ИЗГОТОВЛЕНИЮ И РЕАЛИЗАЦИИ МИКРОБИО­ ЛОГИЧЕСКИХ СРЕД 311

10.1.Методические указания, разработки и рекомен­ дации 311

Министерство здравоохранения 311

Министерство сельского хозяйства и продо­ вольствия 335

2. ГОСТы, ОСТы, ТУ, ВФС и ФС 341

3. Фирмы и организации, изготавливающие и реа­лизующие микробиологические среды и их ком­поненты на территории России 354

ЗАКЛЮЧЕНИЕ 361

СПИСОК ОСНОВНОЙ ЛИТЕРАТУРЫ 362