Литература
1. http://www.finer.ru/?show=06_s4
2. http://refs.redban.ru/ref_634623.html;
3. http://www.ucheba.ru/referats/9473.html;
4. http://www.bibliotekar.ru/447/184.htm
5.http://plavniki.com.ua/pages.php?name=articles&mhnews_id=232&mhnews_newsid=2088&mhnews_page=1
6. http://www.morphology.dp.ua/_pub/KARPOV/k06025.php?lang=uk
7. Мельник Б. Е., Кахана М. С. Медико-биологические формы стресса. -Кишинев, «Штиинца», 1981. - 176 с.
8. http://www.gazeta.ru/science/2006/08/28_a_749723.shtml
9. Материалы VI съезда физиологов Казахстана с международным участием – Караганда: изд-во КГМ, 2 – 3 июля 2007 года – 372 с; стр. 354.
10. www.mosmedclinic.ru/conf_library/2003/4/449
Особенности метаболИческих изменений лимфоцитов и опухолевых клеток у мышей с асцитной карциномой Эрлиха в процессе роста опухоли
Е.В. Инжеваткин, Е.Ю. Фоменко, Е.А. Шкапова, Е.В. Слепов,
А.А. Савченко
Красноярский научный центр Сибирского отделения Российской академии наук
Целью нашей работы было исследование метаболических изменений, происходящих в лимфоцитах крови и опухолевых клетках у мышей в процессе роста асцитной карциномы Эрлиха (АКЭ) и построение наглядной схемы этих изменений.
Клетки АКЭ инокулировали в брюшную полость мышей в количестве 3×106 на одно животное в 0,2 мл физиологического раствора. Взятие лимфоцитов крови и клеток АКЭ осуществляли на 5, 7, 9, 11, 13 и 15 дни после прививки опухоли, считая день прививки первым днем роста опухоли. Кроме этого, лимфоциты забирались у интактных мышей. Лимфоциты выделяли из крови в градиенте фиколл-урографина (ρ=1,083 г/мл) и отмывали от плазмы в охлажденном физиологическом растворе путем трехкратного чередования циклов центрифугирования и последующего ресуспендирования. Опухолевые клетки отмывали от асцитической плазмы аналогичным образом. Полученные клеточные суспензии гомогенизировали.
Всего в работе использованы 144 лабораторные мыши ICR обоих полов (в равном соотношении) в возрасте около 2,5 мес, полученные в питомнике Государственного научного центра вирусологии и биотехнологии «Вектор» (Новосибирская область).
Биолюминесцентным методом определяли активность глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы (Г6ФДГ), глицерол-3-фосфатдегидрогеназы (Г3ФДГ), лактатдегидрогеназы (ЛДГ), малатдегидрогеназы (МДГ), малик-фермента - НАДФ-зависимой малатдегидрогеназы (НАДФМДГ), НАДФ-зависимой глутамататдегидрогеназы (НАДФГДГ), НАД-зависимой глутамататдегидрогеназы (ГДГ), НАД-зависимой изоцитратдегидрогеназы (ИЦДГ), НАДФ-зависимой изоцитратдегидрогеназы (НАДФИЦДГ), глутатионредуктазы (ГР), а также концентрации лактата, пирувата, малата, глутамата, оксалоацетата, НАД+ [1; 2; 3]. Уровни ЛДГ, МДГ, НАДФГДГ и НАДГДГ определяли как для прямых реакций, по восстановлению НАД(Ф) до НАД(Ф)Н, так и для обратных, по окислению НАД(Ф)Н до НАД(Ф) (соответственно Обр. ЛДГ, Обр. МДГ, Обр. НАДФГДГ и Обр. НАДГДГ). Активность ферментов выражали в ферментативных единицах на 1 мг белка. Концентрацию субстратов также относили к 1 мг белка.
Для всех полученных данных определяли среднее арифметическое значение и ошибку средней арифметической. Проверку гипотезы о статистической достоверности различия выборок проводили с помощью критерия Манна-Уитни. Для изучения закономерностей функционирования биохимических систем клеток проводился анализ корреляционных связей между исследуемыми параметрами.
На рисунке показана смертность мышей с привитой опухолью. Как следует из представленных данных, максимальная продолжительность жизни животных составляет 24 суток, 15 суткам соответствует 20 % смертность животных.
Рис. Смертность мышей после прививки АКЭ
В результате проведенных исследований в динамике роста опухоли в клетках АКЭ и в лимфоцитах выявлен ряд метаболических изменений, более подробно с которыми можно познакомиться в работе [4]. Так, схожая динамика характерна для ключевых дегидрогеназ гликолиза, цикла трикарбоновых кислот, малат-аспартатного шунта и транспорта пирувата, т.е. схожим образом, и в опухолевых клетках и в лимфоцитах, работают те пути, которые обеспечивают клетки энергией в экстремальных условиях. Схожая динамика характерна и для активности ключевого фермента пентозо-фосфатного пути – Г6ФДГ. Одним из главных продуктов этого метаболического пути является НАДФН – кофермент, необходимый для восстановления глутатиона – важнейшего внутриклеточного антиоксиданта, необходимого для защиты клеточных структур от повреждений, связанных с рассматриваемым патологическим процессом.
Следовательно, восполнение энергии и защита от экстремальных воздействий важны для обеих рассматриваемых популяций клеток. Разнонаправленная динамика, характерная для Г3ФДГ, может быть связана с тем, что опухолевые клетки, из-за высокой пролиферативной активности, испытывают потребность в большом количестве липидов для построения мембран.
В настоящей работе, на основании полученных данных, мы предлагаем схему метаболических изменений лимфоцитов и клеток АКЭ в процессе роста опухоли. На схеме обозначены направления изменений активности ферментов и метаболических путей в течение обозначенной фазы.
Таким образом, нами исследована динамика метаболических изменений в лимфоцитах и опухолевых клетках у мышей в процессе роста АКЭ и предложена наглядная схема обнаруженных изменений.