2. Микробиота воды и методы определения санитарно-показательных микроорганизмов воды.

Особенно богаты микроорганизмами водоёмы густонаселенных районов. В закрытых водоемах наблюдается закономерность в распределении бактерий (обильно заселена микроорганизмами вода на глубине 10-100 см).

Микробиота воды активно участвует в процессе самоочищения от органических отходов. Утилизация органических отходов связана с деятельностью постоянно обитающих (аутохтонных) микроорганизмов. В пресных водоемах находятся различные бактерии. На дне водоемов, в иле увеличивается количество анаэробов. При загрязнении воды органическими веществами появляется большое количество непостоянных (аллохтонных) микроорганизмов, которые исчезают в процессе самоочищения воды.

Вместе с загрязненными ливневыми, талыми и сточными водами в озера и реки попадают представители нормальной микрофлоры человека и животных (кишечная палочка и т. д.) и возбудители кишечных инфекций (брюшного тифа, дизентерии, холеры и др.). Вода ключевых источников и артезианских скважин практически не содержит микроорганизмов.

При бактериальном загрязнении воды свыше допустимых норм следует провести дополнительное исследование на наличие бактерий — показателей свежего фекального загрязнения (фекальные кишечные палочки (ферментируют лактозу) и т. д.). Кроме того, загрязненность воды оценивается по обнаружению патогенных микробов с фекально-оральным механизмом передачи (сальмонеллы, холерные вибрионы и др.).

Исследованию подлежит вода централизованного водоснабжения, колодцев, открытых водоемов, бассейнов, сточные воды.

Отбор проб воды. Отбор проб воды производится специально подготовленным лицом в присутствии представителя организации или учреждения, в ведении которого находится исследуемый водоисточник/водопроводное сооружение.

О выемке составляется акт, в котором указывают местонахождение и наименование сооружения, точки забора и дают краткую характеристику источника или сооружения. Указывают, по чьему заданию производится исследование, цель последнего, время забора должность и фамилия выемщика проб. Пробу отбирают в стерильные емкости. Емкость открывают непосредственно перед отбором, удаляя пробку вместе со стерильным колпачком. Во время отбора пробка и края емкости не должны чего-либо касаться. При исследовании воды из распределительных сетей отбор проб из крана производят после предварительной его стерилизации обжиганием и последующего спуска воды не менее 10 мин при полностью открытом кране. При заполнении емкостей должно оставаться пространство между пробкой и поверхностью воды, чтобы пробка не смачивалась при транспортировке. После наполнения емкость закрывают стерильной пробкой и колпачком. На сосуд наклеивают этикетку с указанием номера пробы или делают надпись. Доставку проб питьевой воды осуществляют в контейнерах-холодильниках при 4-10°С. В холодный период года контейнеры должны быть снабжены термоизолирующими прокладками. При соблюдении указанных условий срок начала исследований от момента отбора проб не должен превышать 6 ч.

Определение общего микробного числа. Сущность метода заключается в определении в 1 см³ исследуемой воды мезофильных аэробов и факультативных анаэробов, способных расти на питательном агаре при температуре 37°С в течение 24 ч, образуя колонии, видимые при увеличении в 2-5 раз.

Определение общего микробного числа воды можно проводить методом серийных разведений с посевом на МПА и методом прямого микроскопического подсчета микроорганизмов в исследуемой воде.

Водопроводную воду засевают в объеме 1 мл, воду открытых водоемов - в объемах 1; 0,1 и 0,01 мл. Стерильной пипеткой взять 1 мл воды; внести в 2 чашки, приоткрыв крышку; залить 10-12 см³ остуженного питательного агара, смешать с агаром; чашки оставить на горизонтальной поверхности до застывания среды; поместить в термостат при 37°С на 24 часа.

Учет результатов. Колонии, выросшие на поверхности и в глубине агара, подсчитывают с помощью лупы с увеличением в 2-5 раз. Учитывают только те чашки, на которых выросло не более 300 изолированных колоний. Количество колоний на обеих чашках суммируют и делят на два. Результат выражают числом колониеобразующих единиц (КОЕ) в 1 мл исследуемой пробы воды. Если на двух чашках имеет место рост расплывчатых колоний или выросло более 300 колоний и анализ нельзя повторить, подсчитывают сектор чашки с последующим пересчетом на всю поверхность.

Прямой микроскопический метод заключается в концентрации бактерий на мембранных фильтрах (при пропускании через них исследуемой воды), последующем окрашивании эритрозином и микроскопировании.

Количество общих и термотолерантных колиформных бактерий выражают в виде коли-титра или коли-индекса.

Коли-титр воды - минимальное количество БГКП в 1 л воды.

Коли-индекс воды - количество БГКП в 1 л воды.

Для определения этих показателей используют метод мембранных фильтров и титрационный метод.