osn_san_mikr
.pdf163
Глава 12
12.1.Отходы лечебно-профилактических учреждений
12.1.1.Правила сбора и хранения отходов лечебно-профилактических
учреждений
Настоящие правила (СанПиН 2.1.7.728-99) предназначены для всех лечебно-профилактических учреждений (ЛПУ), организаций, занимающихся сбором, хранением, транспортировкой отходов органов здравоохранения, а также проектированием и эксплуатацией установок переработки, обезвреживания и полигонов захоронения твердых отходов.
Под отходами ЛПУ понимают все виды отходов, образующихся в больницах, поликлиниках, диспансерах, станциях скорой медицинской помощи, станциях переливания крови, научно-исследовательских институтах и учебных заведениях медицинского профиля, ветеринарных лечебницах, аптеках, фармацевтических производствах, оздоровительных учреждениях, санитарно-профилактических учреждениях, медицинских лабораториях.
Классификация медицинских отходов.
Все отходы здравоохранения разделяются по степени их эпидемиологической, токсикологической и радиационной опасности.
Класс А – неопасные отходы ЛПУ.
Класс Б – опасные (рискованные) отходы ЛПУ. Класс В – чрезвычайно опасные отходы ЛПУ.
Класс Г – отходы ЛПУ, по составу близкие к промышленным. Класс Д – радиоактивные отходы ЛПУ.
Морфологический состав соответствующего класса отходов может быть охарактеризован следующим образом.
Вотходы класса А включаются неопасные отходы, не имеющие контакта
сбиологическими жидкостями пациентов, инфекционными больными; нетоксичные отходы; пищевые отходы всех подразделений ЛПУ, кроме инфекционных; мебель, инвентарь, неисправное диагностическое оборудование, не содержащее токсичных элементов; неинфицированная бумага, строительный мусор.
Вотходы класса Б включаются потенциально инфицированные отходы; материал и инструменты, загрязненные выделениями, в т. ч. кровью; выделения пациентов; патолого-анатомические отходы (органы, ткани); все отходы из операционных отделений; отходы из микробиологических лабораторий, работающих с микроорганизмами III-IV группы патогенности (согласно СанПиНу 1.2.036-95 «Порядок учета, хранения, передачи и транспортировки микроорганизмов I-IV группы патогенности»); биологические отходы вивариев.
Вотходы класса В включаются материалы, контактирующие с больными особо-опасными инфекциями; отходы из лабораторий, работающих с
164
микроорганизмами I-IV-ой группы патогенности; отходы фтизиатрических, микологических больниц; отходы от пациентов с анаэробной инфекцией.
Вотходы класса Г включаются просроченные лекарственные средства, отходы от лекарственных и диагностических препаратов, лекарства, не подлежащие использованию; цитостатики и другие химиопрепараты; ртутьсодержащие предметы, приборы и оборудование.
Вотходы класса Д включаются все виды отходов, содержащие радиоактивные компоненты.
Порядок проведения дезинфекции, хранения и удаления отходов.
1.Отходы класса Б и В обязательно дезинфицируют погружением в дезраствор, а затем помещают в одноразовую упаковку непосредственно на местах первичного сбора.
2.Дезинфекция отходов класса А производится ежедневно силами ЛПУ.
3.Дезинфекцию контейнеров для сбора отходов класса Б и В производят один раз в неделю.
4.Хранение и транспортировка отходов классов А, Б, В по территории лечебно-профилактических учреждений допускается только в герметичных многоразовых контейнерах. Отходы классов А, Б, В допускается хранить не
более 1-х суток в естественных условиях. Пищевые отходы всех классов необходимо хранить в холодильниках при температуре не выше + 50С. Вывоз отходов этих классов должен производиться ежедневно.
5.Транспортировка отходов классов А, Б, В вне территории ЛПУ допускается только в закрытых кузовах специально применяемых автомашин.
6.Хранение отходов класса Г производится в специально отведенных для этой цели вспомогательных помещениях.
7.Отходы класса А могут быть захоронены на обычных полигонах по захоронению твердых бытовых отходов. Отходы классов Б и В необходимо уничтожать на специальных установках по обезвреживанию отходов ЛПУ термическими методами.
165
12.2. Тесты для самоконтроля
(один ответ правильный)
1.Правила сбора, хранения и удаления отходов лечебно-профилактических учреждений изложены в:
а) СанПиНе 2.1.7.728-99 б) МУКе 4.2.1018-01 в) СанПиНе 2.1.4.1074-01
2.Все отходы ЛПУ по степени их эпидемической, токсикологической и радиационной безопасности делятся на пять классов опасности:
а) Класс В. Неопасные отходы. б) Класс Б. Опасные отходы ЛПУ.
в) Класс Г. Радиоактивные отходы.
3.Отходы класса А –
а) все виды отходов, содержащие радиоактивные компоненты б) отходы от пациентов с анаэробной инфекцией
в) пищевые отходы всех подразделений ЛПУ, кроме инфекционных
4. Отходы класса образуются:
а) в операционных, реанимационных б) диагностических подразделениях
в) центральных пищеблоках, буфетных отделениях
5.Какие группы отходов должны быть подвергнуты обязательному термическому обеззараживанию:
а) группа А, группа С б) группа Б, группа В в) группа А, группу С
6.Хранение отходов класса Г проводят в:
а) контейнерах б) специальных бутылях
в) специально отведенных вспомогательных помещениях
7. Отходы класса В дезинфицируют: а) в сухожаровом шкафу
б) погружают в дезраствор, а затем помещают в одноразовую упаковку непосредственно на местах первичного сбора
в) в автоклаве.
166
8.Отходы класса В уничтожают, используя: а) химические методы б) фильтрование
в) термическую обработку
9.Отходы класса Д –
а) неопасные отходы.
б) потенциально инфицированные отходы.
в) все виды отходов, содержащие радиоактивные компоненты.
10. Отходы из лабораторий, работающих с микроорганизмами 1-4 группы патогенности, относятся к классу:
а) Б б) В в) Г
167
Глава 13. Приложения
13.1. Схемы начальных этапов санитарно-микробиологического исследования
Таблица 25 Начальные этапы санитарно-микробиологического исследования проб воды
|
|
|
|
Споры |
|
|
ОМЧ |
БГКП |
сульфитредуцирующих |
Колифаги |
|||
|
|
|
|
клостридий |
|
|
Исследуемую |
|
|
|
|
|
|
пробу воды |
|
|
|
|
100,0 мл разливают |
|
(300,0мл) |
|
|
|
|
||
|
|
|
|
по 20,0мл в чашки |
||
разбивают на |
|
Пробы объемом 20,0мл |
||||
|
Петри с МПА и с |
|||||
3 объема по |
При анализе |
прогревают на водяной бане |
||||
культурой E.сoli. |
||||||
100,0мл и |
засевают 3-4 |
и фильтруют, фильтры |
||||
Чашки с застывшим |
||||||
фильтруют. |
десятикратных |
помещают в чашки Петри с |
||||
агаром помещают |
||||||
Фильтры |
объема (3,0; |
|
|
тонким слоем |
||
|
|
дном вверх в |
||||
помещают на |
30,0; 300,0мл) |
железосульфитного агара. |
||||
термостат и |
||||||
мясопептонный |
на среду Эндо |
Посевы культивируют при |
||||
инкубируют |
||||||
агар. Чашки |
|
44 |
0 |
С в течение 16-18 часов |
||
|
|
при 370С в течение |
||||
инкубируют |
|
|
|
|
18-24 часов |
|
при 370С в течение |
|
|
|
|
||
24 часов |
|
|
|
|
|
|
|
|
Таблица 26 |
|
Начальные этапы санитарно-микробиологического исследования воздуха |
|||
ОМЧ |
Staphylococcus aureus |
Дрожжи, грибы |
|
Проводят забор 1,0м3 |
3 |
3 |
|
воздуха и засевают на 2% |
Проводят забор 1,0м |
Проводят забор 1,0м воздуха |
|
воздуха и засевают на |
и засевают на среду Сабуро. |
||
питательный |
|||
желточно-солевой агар. |
Посевы инкубируют |
||
мясопептонный агар. |
|||
Посевы инкубируют |
при 370С |
||
Посевы инкубируют |
0 |
в течение 120 часов |
|
при 370С в течение |
при 37 С |
||
24 часов |
в течение 24-48 часов |
(5 дней) |
|
|
|
||
Таблица 27 Начальные этапы санитарно-микробиологического исследования проб почвы
Показатель |
Алгоритм исследования |
|
Из пробы готовят суспензию почвы, берут по 1,0мл 2-х различных |
ОМЧ |
разведений и засевают в чашки Петри с МПА. |
|
Посевы инкубируют при 370С в течение 24 часов |
|
Из первого разведения почвенной суспензии (1:10) берут 10,0мл и |
БГКП |
засевают во флаконы с 50,0мл лактозного бульона или среды Кесслера- |
|
Свенертона. Посевы инкубируют при 370С в течение 24 часов. |
Энтерококки |
В чашки Петри вносят по 0,01мл разведений почвенной суспензии на среду |
|
Калины. Посевы инкубируют при 370С в течение 24 часов. |
168
Таблица 28 Начальные этапы санитарно-микробиологического исследования
пищевых продуктов
Показатель |
Алгоритм исследования |
|
Для их определения выбирают разведения, при посевах которых на |
|
чашках вырастает не менее 30 и не более 300 колоний. Из каждой пробы |
КМАФАнМ |
делают посев на 2-3 чашки из различных разведений в количестве 1,0см3 в |
|
одну чашку с МПА. |
|
Посевы инкубируют при 300С в течение 72 часов. |
БГКП |
Посев проводят в среду Кесслера с лактозой и поплавком с соблюдением |
|
соотношения 1:10. |
|
Посевы инкубируют при 300С в течение 24 часов. |
|
Навеску продукта помещают в фосфатный буфер, учитывая соотношение |
Патогенные, в |
1:10 (среды для обогащения), добавляют 0,1% раствор бриллиантового |
том числе |
зеленого и перемешивают, затем инкубируют при 370С в течение |
Salmonella |
24-26 часов, после чего 10,0см3 переносят в пробирку с 10,0см3 магниевой |
|
среды. |
|
Посевы инкубируют при 370С в течение 24 часов. |
|
Навеску исследуемого продукта массой 25,0г или объемом 25,0см3 вносят |
Listeria |
в 225,0см3 среды для обогащения (соотношение 1:10). Посевы инкубируют |
monocytogenes |
при 370С в течение 24-26 часов, после чего 1,0г обогащенной навески |
|
засевают в бульон Фразера с эскулином в соотношении 1:9. |
|
Посевы инкубируют при 370С в течение 48 часов. |
|
0,5мл анализируемой взвеси вносят в конденсационную воду |
Proteus spp. |
свежескошенного МПА. |
|
Посевы инкубируют при 370С в течение 24 часов. |
|
10,0г продукта разводят в фосфатном буфере для обогащения и |
Staphylococcus |
инкубируют при 370С в течение 18-24 часов, после чего 1,0см3 из |
aureus |
пробирки переносят в солевой бульон. |
|
Посевы инкубируют при 370С в течение 24 часов. |
Clostridium |
Навеску продукта массой 20,0-25,0г засевают в пробирку с высоким |
botulinum |
столбиком среды (анаэробные условия) агара для анаэробов. |
|
Посевы инкубируют при 370С в течение 24-48 часов. |
Pseudomonas |
100,0см3 исследуемого материала из разведений 1:10 вносят в стеклянный |
aeruginosa |
флакон объемом 200,0см3, содержащий 100,0см3 МПБ с глюкозой. |
|
Первичный посев инкубируют при 370С в течение 24-48 часов. |
|
10,0г продукта растворяют в колбе с 90,0см3 разбавленного фосфатного |
Escherichia coli |
буфера для обогащения и выдерживают в термостате при 370С в течение |
|
24 часов, после чего 1,0см3 из колбы засевают в 9,0см3 среды Кесслера с |
|
лактозой (посевы инкубируют при 440С в течение 24 часов). |
169
Таблица 29 Начальные этапы санитарно-микробиологического исследования
продуктов детского питания
Показатель |
Алгоритм исследования |
|
По 1,0см3 каждого соответствующего разведения пробы продукта вносят |
КМАФАнМ |
в 2 чашки Петри с МПА. |
|
Выбирают те разведения, при которых вырастает не менее 30 и не более |
|
300 колоний. |
|
Посевы инкубируют при 370С в течение 24 часов. |
|
10,0г сухого продукта детского питания растворяют в колбе в 90,0см3 |
БГКП |
фосфатного буфера для обогащения. На следующий день 1,0см3 |
|
засеивают в колбу с 9,0см3 среды Кесслера с поплавком. |
|
Посевы инкубируют при 440С в течение 24 часов. |
|
Из каждой пробы продукта делают посев по 1,0см3 продукции или 1,0см3 |
Плесневые |
разведений 1:10 и 1:100 на 2 чашки Петри на среду Сабуро. |
грибы, дрожжи |
Посевы инкубируют при температуре 240С в течение 120 часов (5 суток) |
|
10,0г сухого продукта детского питания растворяют в колбе в 90,0см3 |
|
фосфатного буфера для обогащения. Навеску выдерживают в термостате |
E.coli |
при 370С в течение 24 часов, после чего по 1,0см3 из колб засевают в |
|
9,0см3 среды Кесслера с лактозой. |
|
Посевы инкубируют при 440С в течение 24 часов. |
|
10,0г или 1,0г продукта помещают в колбы с 90,0см3 или 9,0см3 |
|
фосфатного буфера для обогащения и инкубируют при 370С в течение 24 |
S.aureus |
часов, после чего по 1,0см3 смеси переносят в пробирку с солевым |
|
бульоном. |
|
Посевы инкубируют при 370 в течение 24 часов. |
|
При посеве продукта соблюдают соотношение массы продукта и |
Патогенные, в |
буферного раствора 1:10. Смесь помещают в термостат при 370С до 24 |
том числе |
часов. Затем 1,0см3 выдержанной в термостате смеси переносят в |
Salmonella |
пробирку с 10,0см3 магниевой среды или среды Мюллера и инкубируют |
|
при 370С в течение 24 часов. |
|
0,1см3 сухого продукта детского питания из разведения 1:10 засевают на |
B.cereus |
поверхность питательной среды Донована. |
|
Посевы инкубируют при 370С в течение 24-26 часов. |
170
Таблица 30 Начальные этапы санитарно-микробиологического исследования
парфюмерно-косметической продукции
Показатель |
Алгоритм исследования |
|
1,0см3 исследуемого материала из средней пробы (15,0см3) высевают |
|
параллельно в 2 чашки Петри из 2-х разведений. |
КМАФАнМ |
1-ым разведением считается то, в посеве из которого вырастает не |
|
более 15 колоний, а 2-ым – то, в посеве из которого вырастает не |
|
более 300 колоний. Посевы инкубируют при 370С в течение 24 часов |
|
1,0см3 исследуемого материала из средней пробы (15,0см3) высевают |
|
параллельно в 2 чашки Петри из 2-х разведений. Первое разведение |
Дрожжи и плесневые |
подбирают так, чтобы в посеве из него выросло не более 15 колоний, |
грибы |
второе – чтобы в посеве из него выросло не более 30 колоний. |
|
Посевы инкубируют при 320С в течение 120 часов. |
|
10,0см3 исследуемого материала из разведения 10-1 средней пробы |
Семейство |
вносят в стерильный флакон объемом 200,0см3, содержащий 100,0см3 |
Enterobacteriaceae |
питательной среды. Посевы инкубируют при 370С в течение 24 часов |
|
10,0см3 исследуемого материала из разведения 10-1 средней пробы |
Pseudomonas |
вносят в стерильный флакон объемом 200,0см3, содержащий 100,0см3 |
aeruginosa |
питательной среды. Посевы инкубируют при 370С в течение 24 часов. |
|
10,0см3 исследуемого материала из разведения 10-1 средней пробы |
Staphylococcus aureus |
вносят в стерильный флакон объемом 200,0см3, содержащий 100,0см3 |
|
солевого бульона (или из него производят засев ЖСА). |
|
Посевы инкубируют при 370С в течение 24 часов. |
|
0,5мл анализируемой взвеси вносят в конденсационную воду свеже- |
Proteus |
скошенного МПА. Посевы инкубируют при 370С в течение 24 часов. |
Таблица 31 Начальные этапы санитарно-микробиологического исследования
аптечного оборудования и лекарств
Показатель |
Алгоритм исследования |
|
Проводят забор 1,0м3 воздуха и засевают на чашку с 2% питательным |
ОМЧ |
агаром. Посевы инкубируют при 370С в течение 24 часов. |
|
Делают ряд разведений навески и 10,0см3 исследуемого материала из |
БГКП |
разведения 10-1 засевают на среду Эндо. Посевы инкубируют при |
|
370С в течение 24 часов. |
|
По 0,1см3 навески или по 1,0см3 разведений 1:10 и 1:100 высевают на |
Дрожжи, грибы |
2 чашки Петри со средой Сабуро с добавлением антибиотиков. |
|
Посевы инкубируют при 240С в течение 5 суток. |
|
10,0см3 исследуемого материала из разведения 10-1 вносят в |
Семейство |
стеклянный флакон, содержащий 100,0см3 среды Эндо или среды |
Enterobacteriaceae |
обогащения для семейства Enterobacteriaceae. |
|
Смесь инкубируют при 370С в течение 24-48 часов. |
|
10,0г или 1,0г продукта помещают в колбу с 90,0см3 или 9,0см3 |
Staphylococcus aureus |
фосфатного буфера и инкубируют при 370С в течение 18-24 часов, |
|
после чего переносят 1,0см3смеси в пробирку с солевым бульоном. |
|
Посевы инкубируют при 370С в течение 24-48 часов. |
Pseudomonas |
10,0см3 исследуемого материала из разведений 1:10 вносят в |
aeruginosa |
стеклянный стерильный флакон объемом 200,0см3, содержащий |
|
100,0см3 МПБ с глюкозой. Посевы инкубируют при 370С в течение |
|
24-48 часов. |
171
13.2.Методы санитарно-микробиологического исследования
13.2.1.Санитарно-гигиенические нормативы исследования воды централизованного водоснабжения
(СанПиН 2.1.4.1074-01).
Определение ОМЧ аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов
Метод основан на определении общего микробного числа микроорганизмов, образующих колонии на питательном агаре при температуре 370С в течение 24 часов.
Методика проведения анализа.
Из каждой исследуемой пробы делают высев не менее двух объемов по 1,0мл в стерильные чашки Петри. После внесения пробы в каждую чашку вливают по 8,0-10,0мл расплавленного и остуженного до 45-490С питательного агара и перемешивают содержимое чашек, равномерно распределяя по всему дну, избегая при этом образования пузырьков. После застывания агара чашки с посевами помещают в термостат вверх дном и инкубируют при 37±10С в течение 24 часов.
При учете посевов предыдущего дня подсчитывают все выросшие на чашке колонии, наблюдаемые в объектив с увеличением в два раза; количество колоний на обеих чашках суммируют и делят на два. Результат выражают числом колониеобразующих единиц (КОЕ) в 1,0мл исследуемой пробы.
Определение общих и термотолерантных колиформных бактерий
методом мембранных фильтров.
Метод основан на фильтровании установленного объема воды через мембранные фильтры, выращивании посевов на дифференциальнодиагностической питательной среде с лактозой и последующей идентификацией культур из выросших колоний по культуральным и биохимическим свойствам.
Методика проведения анализа.
Пробу исследуемой воды разбивают на три объема по 100,0мл и фильтруют. Затем фильтры помещают на среду Эндо в чашки Петри, которые ставят в термостат дном вверх и инкубируют при 370С и при 44,50С в течение 24 часов.
Если на фильтрах через 24 часа (конец анализа) нет роста или выросли колонии пленчатые, губчатые, плесневые, то дают отрицательный ответ: отсутствие общих колиформных бактерий (ОКБ) и термотолерантных колиформных бактерий (ТКБ) в 100,0мл исследуемой воды.
Если на фильтрах обнаружен рост изолированных типичных лактозопозитивных колоний – темно-красных или красных с металлическим блеском или без него, или других подобного рода колоний, то подсчитывают число колоний каждого типа отдельно и приступают к подтверждению их принадлежности к ОКБ и ТКБ.
172
С этой целью каждую колонию исследуют на:
–морфологию бактерий и отношение бактериальных клеток к окраске по
Граму;
–наличие оксидазной активности;
–способность к ферментации глюкозы, лактозы до кислоты и газа при 370С и 44,50С.
Как ОКБ учитываются грамотрицательные бактерии при отрицательном оксидазном тесте, ферментации глюкозы, лактозы при 370С с образованием кислоты и газа.
Как ТКБ учитываются грамотрицательные палочки при отрицательном оксидазном тесте и ферментации глюкозы и лактозы при 44,50С с образованием кислоты и газа.
При отсутствии общих колиформных бактерий и термотолерантных колиформных бактерий на всех фильтрах результат записывают как «не обнаружено КОЕ ОКБ в 100,0мл» и «не обнаружено КОЕ ТКБ в 100,0мл».
В случаях идентификации всех выросших подозрительных колоний число колониеобразующих единиц ОКБ и ТКБ подсчитывают на всех фильтрах и выражают результат анализа в 100,0мл воды, вычисляя его по формуле:
Х= (а ×100) / V , где
Х– число колоний в 100,0мл;
а – число подсчитанных колоний;
V – общий объем воды, профильтрованной через фильтр.
Например, при посеве 3-х фильтров с профильтрованных объемов по 100,0мл, на 1-ом выросло две колонии, а на остальных двух фильтрах – роста нет. В этом случае число общих или термотолерантных колиформных бактерий будет определяться таким образом:
(2 х 100) / 300 = 0,7 КОЕ ОКБ (ТКБ) в 100,0мл воды.
Определение общих и термотолерантных колиформных бактерий
титрационным методом.
Титрационный метод может быть использован в следующих случаях:
–при отсутствии материалов и оборудования, необходимых для выполнения анализа методом мембранных фильтров;
–при анализе воды с большим содержанием взвешенных веществ;
–при наличии в воде посторонней микрофлоры, препятствующей получению на фильтрах изолированных колоний общих колиформных бактерий.
Титрационный метод основан на накоплении бактерий при посеве установленного (определенного) объема воды в жидкую питательную среду с последующим пересевом на среду Эндо.
Учет результатов анализа (рост колоний) проводится после инкубации
посевов на среде Эндо при 38±10С в течение 18-20 часов.
Если нет роста, то посевы оставляют в термостате и повторно просматривают через 48 часов.