79. Методы оценки спермы.

Визуальная(цвет(красный оттенок – кровь, желтый – моча, бурый – застарелые травмы, зеленоватый – гной, наличие хлопьев – воспаление пузырьковидных желез), консистенция(. Зависит от степени насыщенности эякулята спермотозоидами), запах(В норме – специфический для каждого вида животных), объем эякулята((0,5)1-1,5(3-4), Бык (2)4-5(10-20)_, Жеребец (40-50)60-100(200-300), Хряк (100)200-300(800-1000))), концентрация сперматозоидов (онцентрация миллиард в 1 мл: Баран: 1 Бык 0,7 Хряк 0,1 Жеребец 0,15, концентрацию определяют с помощью ФЭК, с пом щетной камеры Горяева, с пом оптических стандартов), определение % сперматозоидов, определение % патологических форм,( Делают мазок разбавленной спермой на предметном стекле, окрашивают по Романовскома-Гимзе. Считают отдельно патологические и нормальные формы спермиев так, чтобы общее их количество было не менее 500 шт. Расчет производят по формуле: П=(N*100)/500, где П - % пат форм спермиев, N – количество подсчитанных форм.), Определение % живых сперматозоидов(Метод основан на неспособности живых спермиев окрашиваться лабораторными красителями. Делаем мазок из окрашенных эозином спермиев, микроскопируем. Считаем количество мертвых и живых до 500 штук. Расчет делаем по формуле: П = (ж-100)/500, где П- % живых, Ж-кол-во живых неокрашенных спермиев) Определение дыхания сперматозоидов(В основе метода лежит способность сперматозоидов при недостатке кислорода обесцвечивать раствор метиленового синего. Чем больше в сперме живых сперматозоидов и чем больше их дыхание, тем быстрее происходит обесцвечивание раствора. В основе данной реакции лежит анаэробный гликолиз.

Сперму с красителем набирают в стеклянный капилляр и ждут изменения цвета)

80. Разбавление спермы и разбавители.

Состав зависит от вида жив и способа хран. Разбавл чз 30 мин после получ. Разбавители: ГФ - глюкозофосфатный разбавитель, желатинированный, глюкозоцитарно-желточные среды. Разб. готовят на дист воде. Для быка: ГЦЖ, вода 100мл, глюкоза 3, цитрат Nа 1.4 , желток яйца 20, спермосан-3 75-90тыс ед. Для барана:ГЦЖ, вода 100мл, глюкоза 0.8, цитрат Nа 2.8 , желток яйца 20, спермосан-3 50-75тыс ед. Для жеребца: ЛХЦЖ, вода 100мл, лактоза 11, цитрат Nа 0.089, гидрокарбонат Nа 0.008, хелатон (трилон Б) 0.1, желток яйца 1.6, спермосан-3 25-30тыс ед. Для хряка: ГХЦС, вода 100мл, глюкоза 4, цитрат Nа 0.38, гидрокарбонат Nа 0.05, сульфат аммония 0.18, хелатон (трилон Б) 0.1, спермосан-3 25-30тыс ед.

81. Требования к разбавителям спермы.

Стерильные, готовятся непосредственно перед получением спермы, строго специфичные, Изотоничность, безвредность, атератогенность, способность облегчать замораживание, питание и дыхание сперматозоидов и тд

82. Хранение и транспортировка спермы,

Перед хранением сперму замораживают. После разбавления сперму выдерживают при температуре 2-5’С в течении 2-6 часов. Потом берут специальную пластинку с лунками, охлаждают ее до прекращения кипения жидкого азота. Далее с помощью шприца наносят сперму на лунки, и пластину помещают на 1-2 минуты в жидкий азот. После этого, вынув пластину, замороженные гранулы собирают в пластмассовые коробочки и хранят в жидком азоте. Хранят сперму в гранулированном виде в пластмассовых коробочках, помещенных в жидкий азот. В Польше гранулы покрывают желатиновыми капсулами. Во Франции сперму замораживают в «соломинках», которые одновременно служат инструментом для осеменения коров. Сперму перевозят в термосах. Необходимо предохранять сперму от колебаний температуры. Так же нужно следить за целостностью термосов. Замороженную сперму перевозят в сосудах Дьюара. Их необходимо тщательно закреплять. К каждой партии спермы прикладывают ордер, в котором указывают дату и часы получения спермы, кличку производителя, дозу и оценку спермы.