- •Методы общей бактериологии
- •Предисловие
- •Введение
- •Бактерии рода Bacillus
- •Bacillus anthracis
- •Распространение
- •Морфология возбудителя
- •Культуральные свойства
- •Профилактика
- •Bacillus cereus
- •Диагностика
- •Прочие виды, имеющие значение
- •Питательные среды для культивирования бактерий рода Bacillus
- •Бактерии рода Clostridium
- •Распространение
- •Морфология и культуральные свойства возбудителя
- •Морфология колоний
- •Антигенная структура
- •Метаболическая активность
- •Патогенность
- •Токсины и клинические проявления
- •Лабораторная диагностика
- •Столбнячная палочка
- •Распространение
- •Морфология возбудителя
- •Антигенная структура
- •Биохимия
- •Патогенность
- •Клинические проявления
- •Иммунитет
- •Лабораторная диагностика
- •Clostridium botulinum
- •Распространение
- •Морфология возбудителя
- •Антигенный состав
- •Биохимические свойства
- •Патогенность
- •Иммунитет
- •Лабораторная диагностика
- •Clostridium novyi
- •Морфология и культуральные свойства
- •Антигенная структура
- •Биохимические свойства
- •Патогенность
- •Лабораторная диагностика
- •Прочие возбудители анаэробной раневой инфекции
- •Clostridium histolyticum
- •Clostridium septicum (палочка Гона-Сакса)
- •Clostridium chavoei
- •Clostridium sporogenes
- •Clostridium sordellii
- •Clostridium fallax
- •Clostridium bifermentans
- •Clostridium difficile
- •Питательные среды для культивирования клостридий
- •Грамположительные, аэробные и факультативные кокки.
- •Микроорганизмы рода Staphylococcus
- •Staphylococcus aureus
- •Патогенез поражений
- •Лабораторная диагностика
- •S. Epidermidis
- •S. Saprophyticus
- •Питательные среды для культивирования стафилококков
- •Молочно-солевой агар
- •Желточно-солевой агар Чистовича
- •Среда Чаплина-Бернса
- •Среда Чемпена (для выделения патогенных стафилококков)
- •Микроорганизмы рода Streptococcus
- •Стрептококки группы а.
- •Распространение
- •Патогенез поражений
- •Лабораторная диагностика
- •Стрептококки группы в
- •S. Pneumoniae (пневмококк)
- •Распространение
- •Морфология и культуральные свойства
- •Патогенез поражений
- •Клинические проявления
- •Лабораторная диагностика
- •Негемолитические стрептококки
- •Патогенез
- •Лабораторная диагностика
- •Прочие стрептококки
- •Распространение
- •Клинические проявления
- •Лабораторная диагностика
- •Питательные среды для культивирования стрептококков
- •Бактерии рода Listeria Общая характеристика возбудителя
- •Дифференциация листерий от микроорганизмов других родов
- •Внутривидовая дифференциация листерий.
- •Listeria monocytogenes
- •Listeria innocua
- •Listeria welshimeri
- •Listeria seeligeri
- •Listeria ivanovii
- •Listeria grayi
- •Listeria murrау
- •Лабораторная диагностика
- •Общие положения
- •Материалы для исследования
- •Рецепты и способы приготовления питательных сред для выделения листерий
- •Триптозный агар.
- •Сывороточный агар.
- •Кровяной агар.
- •Бульон Левинталя с трипафлавином и налидиксиновой кислотой
- •Среда с ацетатом таллия и налидиксовой кислотой (tn).
- •Среда с тиоцианатом и налидиксовой кислотой (ptn).
- •Агар с триптофлавином и налидиксовой кислотой.
- •Мак Брайда листериозный агар mla
- •Модифицированный листериозный агар Мак Брайда
- •Селективный агар Мак Брайда
- •Обогащенная среда для выделения листерий
- •Агаровая среда для выделения листерий
- •Среда для выделения листерий (lpm)
- •Селективная среда pal cam
- •Селективная среда для выделения листерий (pal cam)
- •Селективная среда для листерий
- •Селективная среда для листерий
- •Селективная среда cnpa
- •Селективная среда
- •Листериозная селективная среда feindt
- •Селективная среда для выделения листерий Oxford
- •Бактерии рода Erysipelothrix
- •Распространение
- •Морфология и культуральные свойства
- •Антигенная структура.
- •Лабораторная диагностика
- •Питательные среды для культивирования е. Rhusiopathiae
- •Микроорганизмы рода Actinomyces
- •Распространение
- •Морфология и культуральные свойства возбудителя
- •Патогенез поражений
- •Клинические проявления
- •Лабораторная диагностика
- •A. Bovis
- •A. Viscosus
- •A. Hordeovutaeris
- •A. Pyogenes
- •A. Suis
- •A. Humiferis
- •Питательные среды для культивирования актиномицетов
- •Микроорганизмы рода Pseudomonas
- •Pseudomonas aeruginosa (синегнойная палочка)
- •Распространение
- •Морфология и тинкториальные свойства возбудителя
- •Культуральные свойства
- •Биохимические свойства
- •Пигментообразование
- •Патогенез
- •Антигенная структура
- •Патогенез
- •Лабораторная диагностика
- •Pseudomonas (Burkholderia) cepacia
- •Pseudomonas (Burkholderia) mallei
- •Распространение
- •Морфология и тинкториальные свойства
- •Культуральные свойства
- •Биохимия
- •Патогенез поражений
- •Клинические проявления
- •Лабораторная диагностика
- •Pseudomonas (Burkholderia) pseudomallei (палочка Уитмора)
- •Распространение
- •Морфология и тинкториальные свойства
- •Культуральные свойства
- •Биохимическая активность
- •Патогенез
- •Клинические проявления
- •Лабораторная диагностика
- •Питательные среды для культивирования и идентификации псевдомонад
- •Микроорганизмы рода Frаncisella
- •Распространение
- •Морфология
- •Культуральные свойства
- •Патогенез
- •Лабораторная диагностика
- •Питательные среды для культивирования франциселл
- •Микроорганизмы рода Yersinia Общая характеристика
- •Морфология
- •Антигенная структура
- •Патогенез
- •Клинические проявления у человека
- •Лабораторная диагностика
- •Общие положения.
- •Материалы для исследования
- •Порядок исследования материала
- •Оценка результатов бактериологического исследования.
- •Питательные среды для культивирования иерсиний Фосфатно-буферный раствор (фбр)
- •Буферно-казеиново-дрожжевая среда (бкд)
- •Дифференциально- диагностическая среда Серова
- •Среда с индикатором бромтимоловым синим (бтс)
- •Универсальный скошенный столбик
- •Щелочной раствор
- •Среда Кларка для аутоагглютинации
- •Микроорганизмы рода Pasteurella
- •Патогенез
- •Лабораторная диагностика
- •Питательные среды для культивирования пастерелл
- •Микроорганизмы рода Brucella
- •Распространение
- •Морфология
- •Антигенный состав
- •Биохимические характеристики
- •Патогенез
- •Лабораторная диагностика
- •Питательные среды для культивирования бруцелл
- •Микроорганизмы рода Haemophilus
- •Haemophilus influenzae (палочка Афанасьева-Пфейффера)
- •Морфология
- •Культуральные свойства
- •Антигенная структура
- •Н. Pleuropneumoniae
- •Н. Parasuis
- •H. Paracuniculis
- •H. Paragallinarum
- •H. Avium
- •H. Somnus
- •H. Agni
- •H. Equigenitalis
- •Питательные среды для культивирования гемофильных бактерий
- •Микроорганизмы рода Campylobacter
- •Группа Campylobocter jejuni (с. Jejuni, с. Coli, с. Lari) Культуральные свойства
- •Антигенная структура
- •Патогенез
- •Лабораторная диагностика
- •Распространенность
- •С. Fetus подвид fetus
- •С. Coli
- •С. Sputorum sb. Mucosalis
- •Spirillum pulli
- •Питательные среды для культивирования и идентификации кампилобактерий
- •Бактерии рода Leptospira
- •L. Interrogans
- •Морфология и культуральные свойства
- •Распространенность
- •Патогенез поражений
- •Лабораторная диагностика
- •Питательные среды для культивирования лептоспир
- •Бактерии рода Mycobacterium
- •Патогенез поражений и клинические проявления
- •Лабораторная диагностика
- •Выделение возбудителя
- •Биологическая проба
- •Серологические исследования
- •Кожные пробы с туберкулином
- •Дополнительные лабораторные методы
- •Лечение
- •Профилактика туберкулеза
- •Mycobacterium bovis
- •Мycobacterium africanum
- •Мycobacterium avium
- •Мycobacterium paratuberculosis
- •Мycobacterium intracellulare
- •Питательные среды для культивирования патогенных микобактерий
- •Микрорганизмы рода Mycoplasma
- •Морфология
- •Культуральные свойства
- •Биохимические свойства
- •Антигенная структура
- •Факторы патогенности
- •Патогенез
- •Питательные среды для культивирования микоплазм
- •Группа Rickettsiaceae
- •Морфология патогенных риккетсий (род Rickettsia)
- •Размножение
- •Культуральные свойства
- •Принципы лабораторной диагностики
- •Род Coxiella
- •Род Rochalimaea
- •Род Еhrlichia
- •Список литературы
- •Содержание
- •Методы частной бактериологии
Лабораторная диагностика
Предположительный диагноз основывают на соответствующем анамнезе и клинических проявлениях.
Наиболее достоверные результаты дает выделение Francisella tularensis (рис. 14), однако культивирование возбудителя сопряжено не только с трудностями, но и с угрозой заражения персонала и разрешено только в лабораториях особо опасных инфекций.
Рисунок 14. Принципиальная схема бактериологического выделения возбудителя туляремии
При отсутствии возможности выделения возбудителя используют биологический метод, основанный на заражении лабораторных животных (мышей или морских свинок) патологическим материалом (пунктат бубона, слизь из зева, гнойное отделяемое слизистой оболочки глаза, кровь и т.д.) с последующей идентификацией микроба агглютинирующей сывороткой. Материал из бубона следует брать до 14-20 суток болезни, из слизистой оболочки глаза — до 17 суток, кровь — до 6 дня заболевания.
Серологические методы. Наличие AT к Francisella tularensis в сыворотке больного определяют в реакции агглютинации с туляремийным диагностикумом; положительной считают видимую глазом реакцию при разведении сыворотки 1:100 и больше (положительные результаты на 1 неделе выявляют у 12,5% больных, на 4 — у 93,2%). Возможна экспресс-диагностика, основанная на идентификации Аг в мазках из очагов поражений AT, меченными флюоресцеинами.
Для ранней диагностики эффективна аллергическая кожная проба. В качестве Аг используют тулярин — взвесь бактерий, убитых нагреванием до 70°С.
Питательные среды для культивирования франциселл
Пептон-цистеиновый агар. В 1 л дистиллированной воды растворяют 20 г пептона, 10 г натрия хлорида, 1 г глюкозы, 1 г хлористоводородного цистеина. Добавляют 20 г агар-агара. Нагревают до закипания и кипятят 1 минуту. Разливают в чашки, проверяют на стерильность выдерживанием чашек при 37°С 24 ч.
Свернутая желточная среда (МакКой-Чепин). К 20 мл изотонического раствора натрия хлорида рН 7—7,2 добавляют 20 мл аутолизата пивных дрожжей и 60 мл желтка куриных яиц. Перемешивают, разливают в чашки или пробирки и выдерживают 1 ч при 80°С.
Приготовление аутолизата пивных дрожжей. Пивные дрожжи отмывают от сусла водопроводной водой. Сливают в колбу и помещают на 24 ч в водяную баню при 56-58°С. Кипятят 20 минут. Подщелачивают гидроокисью натрия до слабощелочной реакции. К 1 части аутолизата дрожжей добавляют 2 части воды, кипятят 40 минут, фильтруют через бумажный фильтр. Разливают в колбы и стерилизуют при 120°С 30 минут.
Мартеновский дрожжевой агар. К 930 мл мартеновского бульона добавляют 70 мл аутолизата пивных дрожжей, 10 г глюкозы, 1 г цистеина, 0,4 г хлорида калия, 3 г хлорида натрия, 0,1 г натрия бикарбоната, 0,3 г магния сульфата, 0,8 г натрия фосфата двуосновного. Доводят рН смеси раствором гидроокиси натрия до 7,2-7,4. Добавляют 30 г агар-агара, кипятят до его расплавления. Разливают в пробирки и стерилизуют 20 минут при 120°С.
Среда Емельяновой. К 1 л дистиллированной воды добавляют 20 мл гидролизата свежей рыбы, 10 мл гидролизата желатина, 2,5 мл аутолизата пивных дрожжей, 0,5 г натрия хлорида, 1 г глюкозы, 0,1 г цистеина и 2 г агар-агара. Нагревают до расплавления агара. Разливают в колбы и стерилизуют 20 минут при 120°С. Перед употреблением в расплавленную среду добавляют 10% дефибринированной крови кролика и разливают в чашки.
Полужидкая среда Дрожевкиной. К 90 мл стерильного изотонического раствора натрия хлорида рН 7,0-7,2 асептически добавляют 10 мл суспензии желтка куриных яиц, перемешивают и разливают в пробирки. После проверки на стерильность используют.
Среда Ухалова-Михалевой. К 100 мл основного перевара Хоттингера добавляют 250 мл сычужного пептона, 4 г натрия хлорида и кипятят 3 мин. Устанавливают рН 7,2-7,4, вновь кипятят 3 минуты и фильтруют через бумажный фильтр. К фильтрату добавляют 20 г предварительно замоченного агар-агара и нагревают до его расплавления. Разливают в колбы, стерилизуют 20 минут при 120°С.
Приготовление сычужного пептона. К 400 г свежеприготовленного фарша из обезжиренного сычуга крупного рогатого скота добавляют 1 л 1%-ного раствора соляной кислоты. Встряхивают и оставляют на 2-3 суток при 46-48°С до образования на дне бутылки порошкообразной массы и появления положительной реакции на триптофан. Смесь прогревают 10 минут при 80°С на водяной бане. Отстоявшийся от осадка прозрачный раствор пептона декантируют, добавляют 2% хлороформа. Хранят при 10°С.
Среда Анциферова. К 100 мл расплавленной и охлажденной до 45°С среды Ухалева-Михалевой добавляют 5 мл (3:2) желтка куриных яиц в 0,5% растворе хлорида натрия. Разливают по пробиркам и скашивают при нагревании до 65°С.
Среда Френсиса. К 100 мл мясного настоя добавляют 1 г пептона, 0,5 г натрия хлорида, 1,5-2% агар-агара и нагревают его до расплавления. Вносят 0,1 г цистеина, 1 г глюкозы. Устанавливают рН 7,2-7,4. Стерилизуют при 110°С 30 минут. В расплавленную после стерилизации и охлажденную до 45°С среду добавляют 5-10% дефибринированной крови кролика. Разливают по пробиркам и чашкам.