- •Методы общей бактериологии
- •Предисловие
- •Введение
- •Бактерии рода Bacillus
- •Bacillus anthracis
- •Распространение
- •Морфология возбудителя
- •Культуральные свойства
- •Профилактика
- •Bacillus cereus
- •Диагностика
- •Прочие виды, имеющие значение
- •Питательные среды для культивирования бактерий рода Bacillus
- •Бактерии рода Clostridium
- •Распространение
- •Морфология и культуральные свойства возбудителя
- •Морфология колоний
- •Антигенная структура
- •Метаболическая активность
- •Патогенность
- •Токсины и клинические проявления
- •Лабораторная диагностика
- •Столбнячная палочка
- •Распространение
- •Морфология возбудителя
- •Антигенная структура
- •Биохимия
- •Патогенность
- •Клинические проявления
- •Иммунитет
- •Лабораторная диагностика
- •Clostridium botulinum
- •Распространение
- •Морфология возбудителя
- •Антигенный состав
- •Биохимические свойства
- •Патогенность
- •Иммунитет
- •Лабораторная диагностика
- •Clostridium novyi
- •Морфология и культуральные свойства
- •Антигенная структура
- •Биохимические свойства
- •Патогенность
- •Лабораторная диагностика
- •Прочие возбудители анаэробной раневой инфекции
- •Clostridium histolyticum
- •Clostridium septicum (палочка Гона-Сакса)
- •Clostridium chavoei
- •Clostridium sporogenes
- •Clostridium sordellii
- •Clostridium fallax
- •Clostridium bifermentans
- •Clostridium difficile
- •Питательные среды для культивирования клостридий
- •Грамположительные, аэробные и факультативные кокки.
- •Микроорганизмы рода Staphylococcus
- •Staphylococcus aureus
- •Патогенез поражений
- •Лабораторная диагностика
- •S. Epidermidis
- •S. Saprophyticus
- •Питательные среды для культивирования стафилококков
- •Молочно-солевой агар
- •Желточно-солевой агар Чистовича
- •Среда Чаплина-Бернса
- •Среда Чемпена (для выделения патогенных стафилококков)
- •Микроорганизмы рода Streptococcus
- •Стрептококки группы а.
- •Распространение
- •Патогенез поражений
- •Лабораторная диагностика
- •Стрептококки группы в
- •S. Pneumoniae (пневмококк)
- •Распространение
- •Морфология и культуральные свойства
- •Патогенез поражений
- •Клинические проявления
- •Лабораторная диагностика
- •Негемолитические стрептококки
- •Патогенез
- •Лабораторная диагностика
- •Прочие стрептококки
- •Распространение
- •Клинические проявления
- •Лабораторная диагностика
- •Питательные среды для культивирования стрептококков
- •Бактерии рода Listeria Общая характеристика возбудителя
- •Дифференциация листерий от микроорганизмов других родов
- •Внутривидовая дифференциация листерий.
- •Listeria monocytogenes
- •Listeria innocua
- •Listeria welshimeri
- •Listeria seeligeri
- •Listeria ivanovii
- •Listeria grayi
- •Listeria murrау
- •Лабораторная диагностика
- •Общие положения
- •Материалы для исследования
- •Рецепты и способы приготовления питательных сред для выделения листерий
- •Триптозный агар.
- •Сывороточный агар.
- •Кровяной агар.
- •Бульон Левинталя с трипафлавином и налидиксиновой кислотой
- •Среда с ацетатом таллия и налидиксовой кислотой (tn).
- •Среда с тиоцианатом и налидиксовой кислотой (ptn).
- •Агар с триптофлавином и налидиксовой кислотой.
- •Мак Брайда листериозный агар mla
- •Модифицированный листериозный агар Мак Брайда
- •Селективный агар Мак Брайда
- •Обогащенная среда для выделения листерий
- •Агаровая среда для выделения листерий
- •Среда для выделения листерий (lpm)
- •Селективная среда pal cam
- •Селективная среда для выделения листерий (pal cam)
- •Селективная среда для листерий
- •Селективная среда для листерий
- •Селективная среда cnpa
- •Селективная среда
- •Листериозная селективная среда feindt
- •Селективная среда для выделения листерий Oxford
- •Бактерии рода Erysipelothrix
- •Распространение
- •Морфология и культуральные свойства
- •Антигенная структура.
- •Лабораторная диагностика
- •Питательные среды для культивирования е. Rhusiopathiae
- •Микроорганизмы рода Actinomyces
- •Распространение
- •Морфология и культуральные свойства возбудителя
- •Патогенез поражений
- •Клинические проявления
- •Лабораторная диагностика
- •A. Bovis
- •A. Viscosus
- •A. Hordeovutaeris
- •A. Pyogenes
- •A. Suis
- •A. Humiferis
- •Питательные среды для культивирования актиномицетов
- •Микроорганизмы рода Pseudomonas
- •Pseudomonas aeruginosa (синегнойная палочка)
- •Распространение
- •Морфология и тинкториальные свойства возбудителя
- •Культуральные свойства
- •Биохимические свойства
- •Пигментообразование
- •Патогенез
- •Антигенная структура
- •Патогенез
- •Лабораторная диагностика
- •Pseudomonas (Burkholderia) cepacia
- •Pseudomonas (Burkholderia) mallei
- •Распространение
- •Морфология и тинкториальные свойства
- •Культуральные свойства
- •Биохимия
- •Патогенез поражений
- •Клинические проявления
- •Лабораторная диагностика
- •Pseudomonas (Burkholderia) pseudomallei (палочка Уитмора)
- •Распространение
- •Морфология и тинкториальные свойства
- •Культуральные свойства
- •Биохимическая активность
- •Патогенез
- •Клинические проявления
- •Лабораторная диагностика
- •Питательные среды для культивирования и идентификации псевдомонад
- •Микроорганизмы рода Frаncisella
- •Распространение
- •Морфология
- •Культуральные свойства
- •Патогенез
- •Лабораторная диагностика
- •Питательные среды для культивирования франциселл
- •Микроорганизмы рода Yersinia Общая характеристика
- •Морфология
- •Антигенная структура
- •Патогенез
- •Клинические проявления у человека
- •Лабораторная диагностика
- •Общие положения.
- •Материалы для исследования
- •Порядок исследования материала
- •Оценка результатов бактериологического исследования.
- •Питательные среды для культивирования иерсиний Фосфатно-буферный раствор (фбр)
- •Буферно-казеиново-дрожжевая среда (бкд)
- •Дифференциально- диагностическая среда Серова
- •Среда с индикатором бромтимоловым синим (бтс)
- •Универсальный скошенный столбик
- •Щелочной раствор
- •Среда Кларка для аутоагглютинации
- •Микроорганизмы рода Pasteurella
- •Патогенез
- •Лабораторная диагностика
- •Питательные среды для культивирования пастерелл
- •Микроорганизмы рода Brucella
- •Распространение
- •Морфология
- •Антигенный состав
- •Биохимические характеристики
- •Патогенез
- •Лабораторная диагностика
- •Питательные среды для культивирования бруцелл
- •Микроорганизмы рода Haemophilus
- •Haemophilus influenzae (палочка Афанасьева-Пфейффера)
- •Морфология
- •Культуральные свойства
- •Антигенная структура
- •Н. Pleuropneumoniae
- •Н. Parasuis
- •H. Paracuniculis
- •H. Paragallinarum
- •H. Avium
- •H. Somnus
- •H. Agni
- •H. Equigenitalis
- •Питательные среды для культивирования гемофильных бактерий
- •Микроорганизмы рода Campylobacter
- •Группа Campylobocter jejuni (с. Jejuni, с. Coli, с. Lari) Культуральные свойства
- •Антигенная структура
- •Патогенез
- •Лабораторная диагностика
- •Распространенность
- •С. Fetus подвид fetus
- •С. Coli
- •С. Sputorum sb. Mucosalis
- •Spirillum pulli
- •Питательные среды для культивирования и идентификации кампилобактерий
- •Бактерии рода Leptospira
- •L. Interrogans
- •Морфология и культуральные свойства
- •Распространенность
- •Патогенез поражений
- •Лабораторная диагностика
- •Питательные среды для культивирования лептоспир
- •Бактерии рода Mycobacterium
- •Патогенез поражений и клинические проявления
- •Лабораторная диагностика
- •Выделение возбудителя
- •Биологическая проба
- •Серологические исследования
- •Кожные пробы с туберкулином
- •Дополнительные лабораторные методы
- •Лечение
- •Профилактика туберкулеза
- •Mycobacterium bovis
- •Мycobacterium africanum
- •Мycobacterium avium
- •Мycobacterium paratuberculosis
- •Мycobacterium intracellulare
- •Питательные среды для культивирования патогенных микобактерий
- •Микрорганизмы рода Mycoplasma
- •Морфология
- •Культуральные свойства
- •Биохимические свойства
- •Антигенная структура
- •Факторы патогенности
- •Патогенез
- •Питательные среды для культивирования микоплазм
- •Группа Rickettsiaceae
- •Морфология патогенных риккетсий (род Rickettsia)
- •Размножение
- •Культуральные свойства
- •Принципы лабораторной диагностики
- •Род Coxiella
- •Род Rochalimaea
- •Род Еhrlichia
- •Список литературы
- •Содержание
- •Методы частной бактериологии
Оценка результатов бактериологического исследования.
При соответствии полученных результатов по тестированию выделенной культуры с вышеуказанными данными полученный бактериальный штамм определяют как бактериальную культуру вида Yersinia enterocolitica.
В случае, если изучаемая бактериальная культура не типируется как бактерии вида Yersinia enterocolitica, возможен вариант повторного использования бактериальной суспензии со средой накопления, хранящейся в холодильнике при +4°С.
Оптимальным решением является постановка на исследование не одной пробы исследуемого образца, а целой серии проб.
Общие сроки бактериологического исследования материала - в пределах 7 суток.
Идентификация вида осуществляется биохимическими и серологическими методами.
Для проведения ускоренной диагностики заболевания можно использовать чумной бактериофаг. Бактериофаг Y. pestis выделяют из различных источников, включая ткани больного человека и животных, а также блох. Многие авторы связывают естественное быстрое угасание заболевания в очаге с наличием бактериофага. Его высокая специфичность и вирулентность для чумной палочки позволяют применять его для идентификации чумы внесением в исследуемый материал перед посевом либо по увеличению титра бактериофага в среде.
Для быстрого обнаружения также применяют AT, меченные флюоресцинами (позволяют обнаружить Y. pestis в различных объектах в течение первых 2 ч исследования), реакцию нейтрализации AT, реакцию преципитации в стандартных агаровых пластинках и метод ускоренного роста Y. pestis на средах обогащения.
Также разработаны методы, ускоряющие биологическую пробу, например, введение зараженным животным глюкокортикоидов или куриного желтка, что позволяет ускорить диагностику чумы в случаях снижения вирулентности или при применении малой заражающей дозы.
Основные биохимические свойства, дифференцирующие Y.pseudotuberculosis и Y. enterocolitica, представлены в таблицах 15 и 16. Дополнительными признаками могут служить результаты реакции Фoгеса-Проскауэра: всегда отрицательные у Y. pseudotuberculosis и положительные при 22-28°С у Y. enterocolitica. В последнее время для выделения Y.enterocolitica из фекалий предложена селективная среда, содержащая цефсулодин, иргазан и новобиоцин (CIN-агар).
Питательные среды для культивирования иерсиний Фосфатно-буферный раствор (фбр)
Раствор А: KH2PO4 – 9,08 г в 1,0 л дистиллированной воды; раствор Б: Na2HPO4 2H2O – 11,87 г в 1 л дистиллированной воды (pH 7,6-7,8). 150 мл раствора А соединить с 850 мл раствора Б. Разлить по 5 мл в пробирки, стерилизовать при 1 атм. в течение 1 часа.
Буферно-казеиново-дрожжевая среда (бкд)
Гидролизат казеина средней степени расщепления – 2,0 мл (Дагестанский НИИ питательных сред); экстракт пекарских дрожжей – 5,0 мл; фосфатно-буферный раствор (pH 7,6-7,8) – до общего объема 1 л. Экстракт пекарских дрожжей: к 500 г дрожжей, предварительно размельченных до гомогенной массы в фарфоровой ступке в малом объеме дистиллированной воды добавить до 1 л дистиллята. Взвесь слить в колбу и кипятить в течение 60 минут на медленном огне при помешивании. Взвесь охладить при 5°С в течение 16-18 часов. Затем надосадочную жидкость слить и профильтровать через широкопористый бумажный фильтр. Приготовленный дрожжевой экстракт разлить во флаконы, простерилизовать под давлением 0,5 атм. 30 минут; хранить при температуре 5-8°С в течение 12 месяцев.
К 0,5 л фосфатно-буферного раствора добавить 2,0 г гидролизата казеина (предворительно подготовленного согласно указаниям на этикетке) и 5,0 мл экстракта дрожжей. Смешать встряхиванием, добавить фосфатно-буферный раствор до общего объема 1 л и проверить pH готовой среды (должен быть 7,6-7,8). Далее смесь разлить в пробирки по 5,0 мл и автоклавировать под давлением 0,5 атм. в течение 20 минут. Среду можно использовать в течение 7-10 суток при хранении в условиях холодильника.