48.Осн. Понятия и термины генной инженерии. Этапы генной инженерии.

ГЕННАЯ ИНЖЕНЕРИЯ – метод изуч. и измен. ген. инструкций, закодированных в хромосомах растений и животных

Клон - группа генетич. идентичных кл-к, возн-их непол. путём от общ. предка.

Клонирование ДНК — процесс получения рекомбинантных молекул ДНК путем встраивания чужеродной ДНК в векторную молекулу ДНК или РНК и введение этого в фаговые, бактер-ые или эукариотич. клетки хозяина.

Клонирование клеток — их разделение путём рассева в питательной среде и получение колоний, содержащих потомство от изолированной клетки.

Кодон — тройка располож. подряд нуклеотидных остатков в ДНК или РНК, кодирующая опред. аминокис. или являющ. сигналом окончания трансляции.

ТРАНСГЕННЫЕ ЖИВОТНЫЕ, экспериментально полученные животные, содержащие во всех кл-ах своего организма доп-ую интегрированную с хромосомами и чужеродную ДНК, кот. передается по наследству по з. Менделя.

Трансгенные растения - гибриды с измененным набором генов. Изменения производят для того, чтобы придать растению полезные свойства: устойчивость к вредителям, морозостойкость, урожайность, калорийность и тому подобное.

Вектор — молекула ДНК, способная к включ. чужеродной ДНК и к автономной репликации, служащая инструментом для введения ген. информации в клетку.

Этап 1. Создание векторов.

Плазмиды часто наз-ют даром природы генным инженерам. Это кольцевые двухцепочные мол. ДНК, размером от 2-3 до десятков тысяч пар нуклеотидов.

Выделение плазмидной ДНК методом центрифугирования.

Помимо плазмид в качестве векторов используются бактериофаги, т.е. вирусы бактерий. Преимущество фагов - возможность получать большие фрагменты ДНК.

Этап 2. Получение гена для встраивания в вектор. Это один из трудных этапов в работе генных инженеров. Для этого используют следующие методы:

• метод «дробовика», основанный на разрезании ДНК специальными ферментами (рестриктазами) и поиск фрагмента, содержащего нужный ген;

• получ. копии гена на иРНК с помощью фермента обратной транскриптазы;

• искусственный синтез гена.

Этап 3. Встраивание гена в вектор. Используемые в кач. векторов плазмидная ДНК и фаговая ДНК «разрезаются» определенной рестриктазой с образованием однотяжевых «липких» концов.

Этап 4. Введение рекомбинантной ДНК в клетку бактерии. На данном этапе рекомбинантную ДНК вводят в бактериальную клетку, в которой она сможет размножаться.

Этап 5. Отбор трансформированных клеток и их клонирование.

Этап 6. Скрининг.

49. Генная инженерия эукариотических объектов.

Трансгенные орг-мы – генетич. перестроены с помощью методов генной инж.

Это альтернатива методам селекции растений и животных.

Генная инженерия эукариотических объектов. Проблемы.

• Повышение продуктивности

• Улучшение качества продукта (растительного масла, жира, белка и т.д.)

• Повышение устойчивости к вредителям и болезням

• Повышение устойчивости к стрессовым воздействиям внешней среды

• Повышение скорости роста

• Повышение устойчивости к гербицидам

Трансгенные растения

Методы переноса генов в растения:

• использование в качестве вектора почвенной бактерии.

• использование вирусов.

В норме растение в ответ на повреждение выделяет химические вещества, стимулирующие клеточное деление.