Добавил:
Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Легенды и мифы фиксации и проводки ткани Екатеринбург.ppt
Скачиваний:
1
Добавлен:
10.04.2024
Размер:
9.98 Mб
Скачать

Минеральное масло

Не содержит ароматических углеводородов. Это смесь предельных длинноцепочечных углеводородов. Совершенно безопасно для персонала. Входит в состав многих косметических средств.

Не все виды масла смешиваются с дегидратантом. Смешивание происходит в определенных соотношениях и при разных температурах. Готовые смеси должны быть абсолютно прозрачны и не расслаиваться.

Полное отсутствие запаха.

Высокий коэффициент преломления позволяет визуально контролировать окончание процесса пропитывания маслом (ткани становятся прозрачными, как в ксилоле)

Не делает ткани жесткими. Ткани можно задерживать в масле на неопределенно долгий срок без любого вреда для последующих тестов, включая ГХ, ИГХ, ISH.

Масло не растворяет жиры подобно ксилолу, а замещает их.

Промежуточные смеси (изопропанол-минеральное масло)

Прозрачность. Могут становиться прозрачными при подогреве до 50оС или при комнатной температуре.

Возможность оставить ткани в любой смеси на неопределенно долгий срок без любого ущерба для морфологии и молекулярной структуры тканей.

Безопасность для персонала и окружающей среды

В этих смесях одновременно завершается удаление несвязанной тканями воды, липидов и начинается пропитывание маслом (или парафином, жидким при комнатной температуре). Если все происходит при комнатной температуре

– нет риска изменения конформации некоторых антигенных участков и это позволяет успешно провести ИГХ-исследования.

Смеси очень важны, они позволяют мягко перейти от полярного изопропанола к неполярному маслу и парафину.

Батареи для проводки с изопропанолом и минеральным маслом

Основные этапы проводки ткани (традиционная схема)

Фиксация

10% формалин, менее 24 часов

 

 

Этанол сильно

 

Дегидратация

уплотняет ткани

 

5 смен этанола 95% по 1 часу

 

 

 

Ксилол делает ткани

 

 

 

Просветление

 

хрупкими

 

 

 

3 смены ксилола по 1 часу

 

 

 

Недостаточное

 

 

 

 

пропитывание не

 

Пропитывание

 

Парафин 60оС, 2 смены по 1 часу

дает тонких срезов

 

 

 

 

Общее время без фиксации: 10 часов

 

 

Схема проводки тканей (ручная) в реагентах Блик

Реагент

Для хирургических

Для эндобиоптатов

образцов

 

 

 

 

 

Дегидратант

5 смен по 1 часу

2 смены по 15 минут

Блик

 

 

 

 

 

Промежуточная

1,5 часа

30 минут

смесь I Блик

 

 

 

 

 

Промежуточная

1.5 часа

30 минут

смесь II Блик

 

 

 

 

 

Минеральное

1.5 часа

30 минут

масло Блик

 

 

 

 

 

Парафин Блик

4 смены по 1 часу

2 смены по 15 минут

(при 60оС)

 

 

Общее время

13,5 часов

2 часа 30 минут

 

 

 

Проводка ткани: Миф 6 При смене реагентов результаты проводки хуже

Однажды и дважды использованные реагенты лучше свежих.

Абсолютное заблуждение. Похоже на предыдущий миф, когда каждый последующий реагент содержит примесь предшествующего.

Вместе с примесью чистого вещества в них еще заносится грязь, жиры, а они никак не улучшают проводку.

При соблюдении всех рекомендаций по фиксации и вырезке с любого момента замены реагентов всегда получаются хорошие препараты.

Полный цикл смены реагентов этанол - ксилол

Ф

Э

Э

Э

Э

Э

К

К

К

К:П

П

П

П

П

Ф

 

Э

 

 

 

 

 

 

 

 

Ф

 

Э

 

К

 

 

 

 

 

Ф

 

Э

 

 

 

 

 

 

 

 

Ф

 

Э

 

К

К:П

 

П

Ф

 

Э

 

 

 

 

 

 

 

 

Ф

 

Э

 

К

 

 

 

 

 

Ф

 

Э

 

 

 

 

 

 

 

 

Ф

 

Э

 

К

К:П

 

П

Ф

 

Э

 

 

 

 

 

 

 

 

Ф

 

Э

 

К

 

 

 

 

 

Ф

 

Э

 

 

 

 

 

 

 

 

Ф

 

Э

 

К

К:П

 

П

13

 

13

 

 

7

2:2

 

 

 

4

Полный цикл смены реагентов изопропанол – минеральное масло

Ф

И

И

И

И

И

I

II

M

П П П П

Ф

 

И

 

 

 

 

Ф

 

И

I

II

M

 

Ф

 

И

 

 

 

 

Ф

← ← ←

И

I

II

M ← ← П

Ф

 

И

 

 

 

 

Ф

 

И

I

II

M

 

Ф

 

И

 

 

 

 

Ф

← ← ←

И

I

II

M ← ← П

Ф

 

И

 

 

 

 

Ф

 

И

I

II

M

 

Ф

 

И

 

 

 

 

Ф

← ← ←

И

I

II

M ← ← П

13

 

13

7

7

7

4

Принципы смены реагентов

10% формалин

 

Дегидратант

Свежий для каждой

 

Последняя смена

 

свежая каждую

партии

 

партию. Остальные

 

 

«передвинуть влево»

Парафин

 

Смеси и масло

Последняя смена свежая

Свежие

через каждые 2

1 раз в неделю.

Остальные «передвинуть

 

партии

влево»

 

 

Как рассчитать объем реагентов для закупки?

 

Карусельный

Вакуумный

 

Тип процессора

процессор

процессор

Ручной метод

 

(STP120)

(Excelsior)

 

Объем емкости с

1.8 л

5 л

реагентами

0,9л реагента

 

 

Кол-во кассет в

120

300

40

одной емкости

 

 

 

Объем реагента/

15

16,7

22,5

кассета

мл/кассета

мл/кассета

мл/кассета