Сходство и отличие методов проводки
|
Тип |
Карусельный |
Вакуумный |
Ручной метод |
|
(STP120) |
(Excelsior) |
||
Опции |
|
22.5 мл/касс |
||
|
15 мл/касс |
16.7 мл/касс |
||
|
|
|
||
Подогрев |
|
Станции с |
Да, каждая |
Термостат |
|
парафином |
станция |
||
|
|
|
Перемешивание |
Да |
Да |
Нет |
Вакуум/ |
Нет |
Да |
Нет |
|
Давление |
||||
|
|
|
Ночная работа |
Да |
Да |
Нет |
Расход реагентов на 1000 блоков этанол-ксилол
Тип |
Карусельный |
Вакуумный |
Ручной |
|
|
(STP120) |
(Excelsior) |
метод |
|
Аспект |
15 мл/касс |
16.7 мл/касс |
22.5 мл/касс |
|
Кол-во дней |
10 |
3 |
25 |
|
Этанол |
10 смен |
3 смены |
25 смен |
|
(18л) |
(15 л) |
(22,5л) |
||
|
||||
Ксилол |
3 смены |
1 смена |
8 смен |
|
(5,4 л) |
(5 л) |
(7,2 л) |
||
|
||||
Парафин |
2 смены |
0,5 смены? |
5 смен |
|
(3.6 л) |
(2, 5 л) |
(4,5 л) |
||
|
Расход реагентов на 1000 блоков в методе изопропанол-минеральное масло
Тип |
Карусельный |
Вакуумный |
Ручной |
||
метод |
|||||
|
(STP120) |
(Excelsior) |
|||
|
22.5 |
||||
Аспект |
15 |
мл/касс |
16.7 мл/касс |
||
мл/касс |
|||||
|
|
|
|
||
Кол-во дней |
|
10 |
3 |
25 |
|
Изопропанол |
10 смен |
3 смены |
25 смен |
||
|
(18л) |
(14.1 л) |
(22,5л) |
||
|
|
||||
Промежуточная |
3 |
смены |
1 смена |
8 смен |
|
смесь I |
|
(5,4 л) |
(5 л) |
(7,2 л) |
|
Промежуточная |
3 |
смены |
1 смена |
8 смен |
|
смесь II |
|
(5,4 л) |
(5 л) |
(7,2 л) |
|
Минеральное |
3 |
смены |
1 смена |
8 смен |
|
масло |
|
(5,4 л) |
(5 л) |
(7,2 л) |
|
Парафин |
2 |
смены |
0,5 смены? |
5 смен |
|
|
(3.6 л) |
(2, 5 л) |
(4,5 л) |
||
|
|
||||
Проводка ткани: Миф 7 Не важен тип парафина для проводки
Можно применять любой парафин.
Тип и точка плавления парафина радикально влияют на качество микротомии.
Парафины с точкой плавления 52-54-56оС гораздо хуже поддерживают ткани при микротомии, чем парафины с точкой плавления 58-60-62оС.
Добавки в парафин должны помогать формировать ленту при резке, делать парафин гомогенным и твердым.
Длительный прогрев парафинов в термостате при температуре выше 65оС не улучшает его качества.
Парафин перед заливкой обязательно нужно перемешивать.
Тепловой эффект микротомии
При резке тонких срезов возникает нагрев от трения, даже если блок и нож холодные. При резке парафин превратится в пластический поток. Срезы заметно укоротятся. Парафин с высокой точкой плавления дольше сохраняет свойства, пригодные для резки тонких срезов.
Сдавливание срезов при резке 1
13. Слабо сдавленный парафиновый срез (до 17%). Видны поперечные срезы кристаллов с выступающими осевыми участками и гексагональными границами. Серый участок внизу – остаток до оригинального размера блока.
Парафин с т. пл. 50-52°С; температура резки 24°С; X 100.
14. Сильнее сдавленный срез (до 25%).
Сдавливание срезов при резке 2
15. Срез, сдавленный до 55% длины блока. Кристаллы поперек среза все еще различимы. Срезы образуют ленту, соединяясь поперек в серединах срезов. Деформации лучше заметны в конце первого среза (нижний), чем в начале второго
16. Сильно сжатый срез, 82%. Потеряны все структуры, кроме сердцевин трех или четырех кристаллов и прилежащих пластинок.
Диаграмма напряжений при резке |
A. Диаграмма |
|
напряжений |
|
режущего |
|
инструмента |
|
дробильной |
|
машины |
|
(модификация |
|
из Coker and |
|
Filon). Темные |
|
области |
|
вблизи 0 |
|
показывают |
|
участки |
|
пластической |
|
деформации. |
|
B. Основные |
|
линии |
|
разрезов в |
|
области края |
|
ножа (из |
|
Okoshi and |
|
Fukui). |
Обратимые и необратимые этапы приготовления гистопрепаратов
Вырезка
Фиксация
Дегидратация
Просветление
Пропитывание
Заливка
Микротомия
Окраска ГХ, ИГХ
Заключение
Возможна ли стандартизация гистологических методов?
Понимание всего процесса в целом и отдельных этапов.
Работа с одними и теми же объектами.
Использование одинаковых реактивов, оборудования и приемов работы.
Участие в работе систем контроля качества.