44. Способы доказательства кроссинговера.

Генетическое доказательство кроссинговера стало возможным благодаря открытию ряда генетических явлений: мутаций, гетерозиготного состояния и сцепления генов.

Первым генетическим объектом, на котором было установлено явление кроссинговера, была дрозофила. Опыты проводились с учетом двух пар альтернативных признаков – серый и черный цвет тела, нормальные и короткие крылья. При скрещивании гомозиготных особей с серым телом и нормальными крыльями с особями с черным телом и короткими крыльями получено единообразие гибридов первого поколения, особи которого имели доминантные признаки: ВВVgVg + bbvgvg. Гибриды первого поколения – BbVgvg. В – серое тело, в – черное тело; Vg – нормальные крылья, vg – короткие крылья.

Для выяснения генотипа гибридов 1 поколения Морган провел анализирующее скрещивание. Он взял рецессивную гомозиготную самку и скрестил ее с гетерозиготным самцом, затем провел реципрокное скрещивание: bbvgvg + BbVgvg/ F1 – BbVgvg, bbvgvg в отношении 1:1 ( 50% : 50% )

При свободном комбинировании генов согласно третьему закону Менделя в поколении должны были появляться мухи четырех разных фенотипов по 25%. Но гены разных аллельных пар могут находиться в одной паре гомологичных хромосом. Одна из пары гомологичных хромосом содержит два доминантных гена (BVg), а другая – 2 рецессивных (bvg). В процессе мейоза одна хромосома с генами –BV попадает в одну гамету, а другая с генами bvg – в другую. Таким образом у дигетерозиготного организма образуется не четыре а только два типа гамет и потомки будут иметь такое же сочетание признаков, как и родители. В данном случае сцепление будет полным.

При изучении результатов второго скрещивания было обнаружено нарушение полного сцепления генов: BbVgvg + ddvgvg – F1 BbVgvg Bbvgvg bbVgvg bbvgvg, что составило соответственно: 41,5%, 8,5%, 8,5%, 41,5%. В данном случае взяли дигетерозиготную самку и скрестили ее с рецессивным самцом. Получили расщепление – 4 разновидности фенотипов потомков: 41,5% с серым телом и нормальными крыльями, 41,5% с черным телом и короткими крыльями и по 8,5% гибридных форм – с серым телом и короткими крыльями и с черным телом и нормальными крыльями. В этом случае сцепление оказывается неполным, т.е. происходит перекомбинация генов, локализованных в одной хромосоме. Это объясняется кроссинговером.

45. Методы определения групп крови. Получение реагентов для определения групп крови.

Методы определения групп крови:

1) Определение группы крови цоликлонами анти-а, анти-в.

Нанести цоликлоны анти-А, анти-В на специальный планшет по одной большой капле.

Рядом с ними капнуть исследуемую кровь по одной маленькой капле. Перемешать их и наблюдать за наступлением или отсутствием реакции агглютинации в течение 3 мин. При сомнительном результате добавить 1 каплю 0,9% физиологического раствора.

Расшифровка результатов:

• если реакция агглютинации наступила с анти-А цоликлоном, то исследуемая кровь относится к группе А (II);

• если реакция агглютинации наступила с анти-B цоликлоном, то исследуемая кровь относится к группе B (III);

• если реакция агглютинации не наступила с анти-А и с анти-B цоликлонами, то исследуемая кровь относится к группе 0 (I);

• если реакция агглютинации наступила с анти-А и с анти-B цоликлонами, то исследуемая кровь относится к группе AB (IV).