96. Возбудитель пневмоцистной пневмонии. Биологические свойства, факторы вирулентности. Особенности патогенеза. Принципы лабораторной диагностики.

Пневмоцитоз – болезнь, вызванная условно-патогенными грибами-пневмоцистами.

ПНЕВМОЦИСТОЗ – оппортунистическая инвазия, обусловленная возбудителем грибковой природы, способным вызывать пневмонию со смертельным исходом у иммунокомпроментированных лиц.

Наиболее подвержены лица с ослабленным иммунитетом.

Pneumocystis (carinii) jiroveci относят к условно-патогенным дрожжевым грибам. До недавнего времени возбудитель пневмоцистоза относили к простейшим, однако биохимический анализ нуклеиновых кислот показал его таксономическую принадлежность к дрожжевым грибам – споровикам, аскомицетам

Пневмноцисты имеют широкое распростронение среди домашних, диких и лабораторных животных, но при этом они видоспецифичны и от животных к человеку не передаются.

Жизненный цикл включает образование трофозоитов, предцист, цист и внутрицистных телец.

1) Трофозоит – имеет овальную или амебиоидную форму, размером 1,5-5 мкм. Покрыт пелликулой или капсулой. С помощью выростов пелликулы прекрепляются к пневмоцистам первого порядка.

Округляясь трофозоиты образуют утолщенную клеточную стенку, превращаясь в 2) предцисту и 3) цисту

3) Циста – размером 4-8 мкм имеет толстую трехслойную стенку. Внутри розетка из 8 дочерних тел(сопрозоидов)

4) Сопрозоиды – диаметр 1-2 мкм, мелкое ядро и окружены двуслойной оболочкой. После выхода из цисты они превращаются во внеклеточные трофозоит

Эпидемиология.

1)Инкубационный период – 8-10 ДНЕЙ (MIN), ЧАЩЕ 20-25 ДНЕЙ

2)Источником инфекции является человек, больной пневмоцистной пневмонией, или носитель ( с ОРЗ). Основной механизм передачи возбудителя – аэрозольный.

3) Пневмоцитоз - оппортунистическая инфекция, поражающая легкие, протекает с отдышкой, лихорадкой и сухим кашлем. Смерть от Дыхательной недостаточности.

4) Весь свой жизненный цикл пневмоцисты осуществляют в просвете альвеол. При кашле образуется мелкодисперсный аэрозоль, его частицы не оседают, а находятся во взвешенном состоянии

5)Заражение пневмоцистами происходит при вдыхании воздуха, контаминированного возбудителем, при этом основным фактором передачи является воздух, а путь передачи – ВОЗДУШНО- КАПЕЛЬНЫЙ, редким путём передачи является ТРАНСПЛАЦЕНТАРНЫЙ

Лабораторная диагностика.

1) Микроскопический метод – микроскопия мазка из лаважной жидкости, биоптата, легочной ткани, мокроты. Окрашивание

------по Романовскому-Гимзе: цитоплазма паразита голубого цвета, а ядро красно-фиолетовое.

------по Гомори: специальный метод, для выявления клеточной стенки пневмоцист, окраска толуидиновым синим и серебрением.

+ по Цилю-Нильсону, по Папаниколау, по Грамму, по Лейшману.

2) Иммунобиологические методы – ИФА и РИФ

------ИФА используют сыворотку крови для выявления антител IgG и IgM

------РИФ используют бронхоальвеолярный лаваж, аспират, биоптат легкого для выявления Пневмоцист

97. Бактероиды, фузобактерии, превотеллы. Биологические свойства, факторы вирулентности. Значение в патологии человека.

Bacteroides - группа грамотрицательных анаэробных бактерий, которых в настоящее время насчитывают свыше 30 видов, объединенных в три основных рода: Prevotella, Porphyromonas и собственно Bacteroides.

Род Bacteroides семейства Bacteroidaceae, отдела Gracilicutes включены прямые или изогнутые палочковидные бактерии 0,5-0,8x1-2 мкм.

Большинство видов неподвижны, в мазках располагаются одиночно, парами или небольшими цепочками. Хемоорганотрофы, ферментируют углеводы с образованием кислоты, некоторые виды образуют индол и сероводород.

Все виды - строгие анаэробы и требуют внесения в среды гемина и витамина К. Анаэробные грамотрицательные бактерии представлены гетерогенной группой микроорганизмов, включающей 17 родов палочковидных и 3 рода кокковидных бактерий.

Большинство входит в состав микрофлоры полости рта, верхних отделов воздухоносных путей, ЖКТ и мочеполовой системы человека и млекопитающих. Грамотрицательные анаэробы проявляют сравнительно низкую патогенность. Бактероиды колонизируют толстый кишечник, полость рта и органы мочеполовой системы.

Наибольшее медицинское значение имеет B. fragilis, составляющий до 99% всех бактерий толстой кишки. В бронхиальном дереве, урогенитальном тракте и особенно в толстой кишке типичными обитателями являются представители собственно рода Bacteroides - Bacteroides fragilis, B. ruminicola, B. thetaiotaomicton, B. uniformis. В полости рта встречаются пигментообразующие и непигментированные виды, относящиеся в основном к родам Prevotella (P. melaninogenica P. nigrescens, P. intermedia, P. heparinolytica), Porphyromonas (Porphyromonas gingivalis).

Такое деление основано на том, что из пародонтальных карманов и полости рта выделяют пигментообразующие виды. Бактерии данной группы in vitro продуцируют различные ферменты агрессии: коллагеназу, гиалуронидазу, хондроитинсульфатазу, гепариназу, IgA-, IgG-, IgM- протеазы, что позволяет рассматривать их как важнейших потенциальных возбудителей одонтогенной инфекции.

Поражения у человека наиболее часто вызывают представители родов Bacteroides, Porphyromonas, Prevotella и Fusobacterium. Поражения, вызываемые анаэробными грамотрицательными бактериями, носят эндогенный характер. К развитию поражений предрасполагают: - нарушения целостности кожных покровов и слизистых оболочек, - травмы, - хирургические вмешательства, - метаболические расстройства, - болезни со злокачественным ростом, - некротические процессы в тканях, - наличие инородных тел, - предшествующие инфекции и др. В большинстве случаев поражениям способствует снижение содержания кислорода и уровня окислительно-восстановительных реакций в тканях.

Патогенез поражений обусловлен избыточной колонизацией эпителиальных поверхностей и выделением повреждающих продуктов.

Все бактероиды содержат эндотоксин, образуют нейраминидазу, гиалуронидазу и фибринолизин.

Бактероиды разделяют на группы B. fragilis и B. ureolyticus. Бактерии группы B. fragilis. Включают 9 видов неподвижных бактерий, образующих капсулу. Наиболее часто вызывают внутрибрюшинные и тазовые абсцессы, бактериемию, инфекции пролежней, артриты и остеомиелиты (основные возбудители B. thetaiotaomicron, B. ovatus, B. vulgatus, B. distasonis). В мазках из клинического материала представлены бледными полиморфными палочками с закруглёнными концами.

Часто неравномерно окрашиваются по Граму. На 5-7-е сутки образуют серовато-белые, прозрачные или мутноватые негемолизирующие S-колонии 1-3 мм в диаметре. На бульонах дают гомогенное помутнение. Ключевые признаки группы - способностъ расти на средах с 20% содержанием жёлчных солей; резистентностъ к канамицину (100 мкг), ванкомицину (5 мкг) и колистину (10 мкг). Чувствительны к действию производных имидазола.

Бактерии группы B. ureolyticus. Группу образуют B. ureolyticus и B. gracilis; основное их отличие - инертность к углеводам. Вызывают инфекции женских половых органов, поражения дыхательных путей, костей и мягких тканей. В мазках из клинического материала представлены тонкими палочками с закруглёнными концами. На КА образуют мелкие полупрозрачные колонии, у некоторых штаммов - распластанные на поверхности. Часто вызывают позеленение и коррозию сред, содержащих кровь. Ключевые признаки группы - неспособностъ к росту на средах с 20% содержанием жёлчных солей, резистентностъ к канамицину (100 мкг) и коли-стину (10 мкг), но чувствителъностъ к ванкомицину (5 мкг). Принципы микробиологической диагностики.

Принципы получения и транспортировки образцов аналогичны таковым при подозрении на анаэробную инфекцию - следует избегать контакта образца с атмосферным воздухом. Образование супероксид дисмутазы B. fragilis позволяет бактериям сохранять жизнеспособность при непродолжительном контакте с атмосферным воздухом. Бактероиды культивируют на КА, тиогликолевой среде. Оптимальны для роста анаэробные условия при 10% содержании СО2 в атмосфере, температура 37 °C, рН 7,6-7,8. Лечение. Бактероиды резистентны к пенициллинам, клиндамицину, цефалоспоринам 1- го и 2-го поколений.

Препараты выбора - левомицетин, метронидазол и имипенем. Бактероиды, как правило, являются доминирующей флорой в гнойном экссудате при абсцессах, флегмонах, остеомиелитах челюстно-лицевой области, содержимом пародонтального кармана при пародонтите и гингивите.

К основным пародонтопатогенным видам относят B. forsithus (выделен в новый род - Tannerella), Prevotella nigrescens, P. intermedia, Porphyromonas gingivalis. При инвазии в ткани пародонта они обычно окружены капсульным слоем.

ПРЕВОТЕЛЛЫ

Бактерии названы в честь французского бактериолога Э. Прево. Род Prevotella включает полиморфные, неподвижные палочки, ферментирующие или частично ферментирующие углеводы. На КА образуют коричнево-черные колонии. P. melaninogenica, P. loescheii и P. denticola образуют коричневато-чёрные или коричневые, гладкие и блестящие колонии (что обусловлено наличием капсул), а не образующие капсулу P. intermedia - сухие колонии.

Пигментообразование наблюдают не ранее 5-14 сут культивирования на агаре с кроличьей кровью. Колонии некоторых штаммов могут флюоресцировать ярко-красным цветом при проходящем УФ-облучении. Ключевые признаки превотелл - ингибирование роста жёлчными солями (20%), чувствителъностъ к колистину, но резистентны к ванкомицину и канамицину. У человека вызывают поражения мягких тканей головы и шеи, плевропневмонии, инфекции женских половых органов (особенно часто P. bivia и P. disiens) и остеомиелиты.

Патогенез поражений обусловливает эндотоксин, активность которого превышает действие ЛПС бактероидов (особенно у P. bivi'a). P. melaninogenica и P. intermedia также выделяют фосфолипазу А, нарушающую целостность мембран эпителиальных клеток, что вызывает их гибель.

Принципы микробиологической диагностики аналогичны таковым при других анаэробных инфекциях.

Лечение.

Бактерии высокорезистентны к пенициллинам и цефалоспоринам. Препараты выбора - метронидазол, левомицетин, имипенем и клиндамицин.

ФУЗОБАКТЕРИИ

Fusobacterium были впервые отмечены в 80-х годах XIX века при язвенном гингивите, а позже было обнаружено, что их присутствие связано с наличием спирохет при ангине Венсана Анаэробные неспорообразующие грамотрицательные с заостренным концом палочки. Они представляют собой парные палочки, что придает им вид веретена. В мазках располагаются одиночно, реже образуют короткие цепочки из 2, редко 3 клеток. Первоначально в полости рта было выделено 2 вида Fusobacterium: Fusobacterium nucleatum и Fusobacterium plauti. Первые образуют полупрозрачные колонии на агаре, а вторые - серо-белые колонии. В чистых культурах могут образовывать нитевидные или ветвящиеся формы. Фузбактерии растут на мясных и печеночных бульонах; рост стимулируют внесением в питательную среду сыворотки или асцитической жидкости. Рост сопровождается помутнением среды, образованием осадка, газообразованием и появлением «сырного» запаха. Утилизируют пептон и углеводы, но ферментативная активность в целом слабая. На КА образуют мелкие (1-2 мм) выпуклые желтоватые колонии, окруженные зоной a-гемолиза. Через 48 ч F. necrophorum формирует мелкие негемолизирующие колонии палевого цвета; иногда наблюдают зелёное окрашивание прилегающих участков среды после контакта с воздухом. Клетки колоний полиморфные, часто изогнутые и со вздутиями; по Граму окрашиваются неравномерно. Фузобактерии обитают в полости рта, кишечнике и органах мочеполовой системы млекопитающих. У человека вызывают гингивиты, периодонтиты, поражения мягких тканей головы и шеи, аспирационные пневмонии, плевропневмонии и остеомиелиты.

Основные возбудители - F. nucleatum (палочка Плау-та) и F. necrophorum (палочка Шмбрля). Патогенез поражений обусловлен способностью бактерий секретировать фосфолипазу А (облегчает инвазию бактерий в глубокие ткани), лейкоцидин (проявляет цитотоксическое действие на различные клетки).

Принципы бактериологической диагностики.

Характерные особенности фузобактерий - образование основными патогенными видами болъших количеств масляной кислоты (конечный метаболический продукт) и индола. Образование индола обусловливает гнилостный запах культур. Рост фузобактерий ингибируют жёлчные соли (20%), колистин и канамицин, но не ванкомицин. Фузобактерии F. nucleatum, F. necrophorum, F. mortiferum продуцируют мощные гистолитические ферменты - гиалуронидазу, хондроитинсульфатазу, лейцтиназу, имеют эндотоксин. Fusobacterium nucleatum может быть изолирован из верхних дыхательных путей, где он является самым распространенным видом. Увеличение числа Fusobacterium nucleatum в полости рта связывают с пародонтитом. При наличии спирохет Fusobacterium nucleatum быстро размножаются и занимают доминирующее положение в микрофлоре полости рта.

Лечение. Большинство штаммов чувствительно к цефокситину, левомицетину, клиндамицину, имипенему и метронидазолу.