Подготовить реферат на тему: ”Участие водорастворимых витаминов в углеводном обмене и их клиническое применение”.
Алгоритм лабораторной работы.
Количественное определение пировиноградной кислоты в моче.
Принцип метода: пировиноградная кислота (ПВК) при взаимодействии с 2,4- динитрофенилгидразином (2,4-ДФГ) в щелочной среде образует окрашенный комплекс жёлто-оранжевого цвета. Интенсивность окраски прямо пропорциональная
количеству ПВК. Ход работы.
(Использовать сухую посуду). В первую пробирку наливают 0,5 мл мочи; во вторую – 0,5 мл стандарта. Потом в обе пробирки добавляют по 1 мл раствора 2,4- ДФГ; и через 5 минут – по 4 мл концентрированного раствора KOH.
Перемешивают и через 5 минут определяют оптическую плотность (экстинкцию) растворов на ФЕК, в кювете на 5 мм с синим светофильтром. По величинам
экстинкций стандарта и опыта рассчитывают содержание ПВК в суточном объеме мочи.
В норме за сутки с мочой выделяется:
10 – 25 мг (114 – 284 мкмоль) ПВК.
Повышение экскреции отмечают при недостатке витамина B1 и гипоксиях разного происхождения.
Тема 15. Альтернативные пути обмена моносахаридов. Метаболизм фруктозы и галактозы.
Актуальность темы.
К альтернативным путям обмена моносахаридов относят пентозофосфатный и глюкуронатный пути обмена глюкозы, обмен фруктозы и галактозы.
Пентозофосфатный путь обмена глюкозы – источник пентоз для синтеза нуклеотидов, нуклеиновых кислот, коферментов, кроме этого является источником
восстановленного НАДФН, который используется при синтезе жирных кислот,
холестерола, стероидных гормонов и других соединений.
Глюкуронатный путь обмена глюкозы – источник глюкуроновой кислоты, которая используется для синтеза гликозаминогликанов (углеводных производных протеогликанов – белков соединительной ткани) и принимает участие в
обезвреживании токсинов в печени.
Фруктоза и галактоза включаются в путь обмена глюкозы. При нарушении превращения фруктозы и галактозы развивается фруктоземия и галактоземия.
Цель и начальный уровень знаний-умений.
Общая цель: изучить альтернативные пути обмена моносахаридов.
Конкретные цели: трактовать биохимические закономерности путей обмена
моносахаридов, пентозофосфатный путь окисления глюкозы, путь уроновых кислот. Исходный уровень знаний-умений: уметь писать строение моносахаридов,
гексуроновых кислот.
Ориентировочная карта для самостоятельного изучения студентами учебной литературы при подготовке к занятию.
Содержание и |
Указания к учебным действиям |
последовательность действий
30
1. Практическое изучение 1.1. Количественное определение пентоз в
метода определения пентоз в сыворотке в крови. крови.
2. |
Пентозофосфатный |
путь |
2.1. |
Биологическое |
значение |
и |
особенности |
||||||
(ПФП) обмена глюкозы. |
|
функционирования пентозофосфатного |
пути |
в |
|||||||||
|
|
|
разных тканях. |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
2.2. |
Последовательность |
|
ферментативых |
|||||||
|
|
|
реакций ПФП: |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
а) окислительная стадия; |
|
|
|
|
|
|||||
|
|
|
б) стадия изомерных превращений. |
|
|
||||||||
|
|
|
2.3. |
Нарушение |
пентозофосфатного |
пути |
|||||||
|
|
|
обмена глюкозы в эритроцитах: энзимопатия |
||||||||||
|
|
|
глюкозо-6-фосфат-дегидрогеназы. |
|
|
|
|
|
|||||
3. |
Глюкуронатный |
путь |
3.1. |
Объясните |
|
биологическую |
роль |
||||||
обмена глюкозы. |
|
глюкуpонатного |
пути |
окисления |
глюкозы; |
на |
|||||||
|
|
|
конкретных примерах объясните его структурную |
||||||||||
|
|
|
роль и роль в обезвреживании токсических |
||||||||||
|
|
|
веществ. |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
3.2. Hапишите строение глюкуpоновой кислоты, |
||||||||||
|
|
|
УДФ-глюкуpоновой |
кислоты, |
|
|
гексозамина |
||||||
|
|
|
(глюкозамина или галактозамина). |
|
|
|
|
|
|||||
4. Метаболизм фруктозы. |
|
4.1. |
Метаболический |
путь и |
ферментативные |
||||||||
|
|
|
реакции |
превращения |
фруктозы |
в |
организме |
||||||
|
|
|
человека. |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
4.2. Наследственные энзимопатии, связанные с |
||||||||||
|
|
|
генетическими |
дефектами |
синтеза |
ферментов |
|||||||
|
|
|
метаболизма |
фруктозы |
|
– |
непереносимость |
||||||
|
|
|
фруктозы (фруктоземия). |
|
|
|
|
|
|
|
|||
5. Метаболизм галактозы. |
5.1. |
Метаболический |
путь и |
ферментативные |
|||||||||
|
|
|
реакции |
превращения |
|
галактозы |
в |
организме |
|||||
|
|
|
человека. |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
5.2. Наследственные энзимопатии, связанные с |
||||||||||
|
|
|
генетическими |
дефектами |
синтеза |
ферментов |
|||||||
|
|
|
метаболизма галактозы – |
галактоземия. |
|
|
|||||||
Задание для индивидуальной самостоятельной работы студентов:
1.Построить схемы метаболических путей обмена углеводов.
2.Оценивать состояние углеводного обмена по биохимическим показателям при патологических процессах.
3.Клиническое значение галактозной пробы.
Алгоритм лабораторной работы.
1. Количественное определение пентоз в крови.
Принцип метода: метод базируется на цветной реакции между пентозой (рибозой или дезоксирибозой) и орцином в кислой среде в присутствии Fe3+. При их
взаимодействии образуется комплекс зеленого цвета. Интенсивность окраски зависит от количества пентоз.
Ход работы:
В пробирку к 0,5 мл исследуемых растворов добавить 0,5 мл 1% оpцина (приготовленного на 0,1% растворе FeCl3 в концентрированной HCl). Одновременно
31