Результаты опыта заносить в таблицу:
Исследуемая печень |
Качественная реакция на гликоген |
1.Животных при рациональном
питании.
2.Животных в состоянии голода.
Сделать выводы.
Тема 17. Глюконеогенез.
Актуальность темы.
Главным источником глюкозы как метаболического топлива для организма является ее поступление с пищевыми продуктами. Существуют метаболические пути, которые обеспечивают организм глюкозой за счет ее синтеза из неуглеводных
биомолекул (пирувата, лактата, гликогенных аминокислот, глицерола).
Биосинтез глюкозы обеспечивает ее нормальную концентрацию в условиях
сниженного поступления моносахаридов и исчерпания главного аккумулированного источника глюкозы – гликогена печени. Глюконеогенез играет главную адаптационную роль при стресс-синдроме.
Цель и исходный уровень знаний.
Общая цель.
Уметь использовать знание о процессах глюконеогенеза при изучении
клинических дисциплин и для объяснения нарушений обмена веществ при заболеваниях (сахарный диабет, болезнь Иценко-Кушинга и другие). Уметь использовать показатели углеводного обмена для оценки состояния больных, выбора метода лечения.
Конкретные цели:
1.Трактовать функциональные особенности и биологическое значение биосинтеза глюкозы – глюконеогенеза.
2.Анализировать изменения уровня глюкозы крови, механизм ее гормональной
регуляции (инсулин, глюкагон, адреналин, кортизол, АКТГ).
Исходный уровень знаний-умений: уметь писать химическое строение гликогенных аминокислот, глицерола, пирувата, лактата. Уметь писать химизм реакций гликолиза.
Ориентировочная карта для самостоятельного изучения студентами учебной литературы при подготовке к занятию.
Содержание |
и |
Указания к учебным действиям |
|
||||
последовательность действий |
|
|
|
|
|
||
1. |
Практическое |
изучение |
1.1. Определение глюкозы в сыворотке |
||||
процесса глюконеогенеза. |
крови натощак. |
|
|
|
|||
2. |
Теоретическое |
изучение |
2.1. |
Какой |
процесс |
называется |
|
процесса глюконеогенеза. |
„глюконеогенез”? В каких тканях он активно |
||||||
|
|
|
проходит? |
|
|
|
|
|
|
|
2.2. |
Физиологичное |
|
значение |
|
|
|
|
глюконеогенеза. |
|
|
|
|
|
|
|
2.3. |
Метаболический |
|
путь |
|
|
|
|
глюконеогенеза; |
необратимые |
реакции |
||
|
|
|
гликолиза, |
реакции и ферменты, что |
|||
34
позволяют их обойти.
2.4.Компартментализация превращение пирувата в фосфоэнолпируват.
2.5.Субстраты глюконеогенеза. Лактат и аланин как субстраты глюконеогенеза.
2.6. Глюкозо-лактатный цикл (цикл Кори).
2.7.Глюкозо-аланиновый цикл.
2.8.Метаболическая и гормональная
регуляция глюконеогенеза. Регуляторные ферменты. Болезнь Иценко-Кушинга
(стероидный диабет).
Задание для индивидуальной самостоятельной работы студентов.
1.Создать схему регуляции обмена глюкозы.
2.Подготовить реферативное сообщение на тему: „Особенности углеводного обмена при условиях болезни Иценко-Кушинга”.
Алгоритм лабораторной работы.
Количественное определение глюкозы в крови натощак.
Принцип метода: глюкоза при взаимодействии с ортотолуидином образует продукт
сине-зеленого цвета. Интенсивность окраски прямопропорциональна количеству
глюкозы.
Внорме концетрация глюкозы крови: 3,3 – 5,5 ммоль/л.
Ход работы.
Всухую пробирку вносят 2,0 мл ортотолуидинового реактива (отмеряют
центрифужной мерной пробиркой) и добавляют к нему микропипеткой фильтрат крови
–0,2 мл (фильтрат получают путем смешивания 0,2 мл крови с 1,8 мл 3% раствора трихлоруксусной кислоты со следующим фильтрованием).
Вдругую сухую пробирку вносят 2,0 мл ортотолуидинового реактива и 0,2 мл
стандартного раствора глюкозы (4,5 ммоль/л).
Пробирки помещают на 8 минут в кипящую водяную баню; потом охлаждают и содержание пробирок фотометрируют на ФЭК в 5 мм кювете при красном светофильтре (длина волны = 620 нм).
По величинам экстинкций рассчитывают концентрацию глюкозы в крови.
Пример расчета: экстинкция фильтрата - 0,28
экстинкция стандарта - 0,25
концентрация глюкозы в фильтрате - Х концентрация глюкозы в стандарте – 4,5 ммоль/л
4,5 ммоль/л - 0,25
Х - 0,28
Х = |
4,5 ×0,2 8 |
= 5,0 ммоль/л |
0,2 5 |
35