27. Возбудитель дифтерии. Характеристика. Лабораторная диагностика. Выявление антитоксического иммунитета. Специфическая профилактика. Принципы лечения

Возбудитель дифтерии Corynebacterium diphtheria (только токсигенные штаммы).

Острое антропонозное инфекционное заболевание, передающееся воздушно-капельным или воздушнопылевым путем.

Характеризуется фибринозным воспалением в месте входных ворот и интоксикацией организма с преимущественным поражением сердца, почек, нервной системы.

Характеристика:

Источник инфекции – человек, больной или носитель.

Таксономия возбудителя дифтерия: порядок (Actinomycetales), семейство (Corynebacteriaceae), род (Corynebacterium), вид (Corynebacterium diphtheria).

Дополнительная характеристика биовара: способность к продукции дифтерийного экзотоксина (гистотоксина).

Морфология:

·Грамположительные палочки длиной 1-8 мкм с с булавовидными утолщениями на концах.

·В мазках располагаются римскими V, X.

·Неподвижные

·Имеют микрокапсулу

·Споры не образуют

Физиология:

Тип питания: гетеротроф

Тип дыхания: факультативный анаэроб

Требовательность к пит среде: требователен, т.к. растёт только на специальных средах

Характер роста на плотной среде: На среде Клауберга -II (кровь+теллурит калия) 3 типа колоний: крупные серые неровные, напоминающие маргаритки; мелкие чёрные выпуклые и ровные; колонии смешанного вида

Характер на жидкой среде: Не растёт. засевают в полужидкую среду обогащения на 16ч, но потом пересаживают

Ферменты:

Нелиполитические, как и большинство в семействе. Большинство штаммов не ферментирует крахмал, декстрин и гликоген.

Токсины: очень сильный экзотоксин (главный фактор вирулентности, который обладает литическим действием), поражающий миокард, почки, надпочечники и нервные ганглии. В комплекс, определяющий патогенность входят также гиалуронидаза, нейраминидаза, поверхностно расположенный липид кордфактор, фактор В, гипотетический эндотоксин [Фробишер (М. Frobisher), 1950], антифагоцитарные факторы.

·Факторы адгезии и защиты от фагоцитоза (микрокапсула, пили)

·Экзотоксин (гистотоксин: субъединица А – это токсичный полипептид (продукция определяется бактериальным геном), субъединица В – это транспортный полипептид (продукция определяется геном умеренного бактериофага))

Антигенные свойства:

Наличие антигенных разновидностей: На основании культуральных свойств выделяют 3 биовара: gravis, mitis, intermedius

O-ag – группоспецифический полисахаридный антиген клеточной стенки, прекрасно реагирующий с антигенами микобактерий и нокардий

K-ag – полисахаридный антиген микрокапсулы – 58 сероваров.

Вид Cor. diphtheriae неоднороден. Он подразделяется на токсигенные и нетоксигенные разновидности, а также на различные культурально-биохимический, серологические и фаготипы. Дифтерию вызывают

только токсичные штаммы, обладающие способностью продуцировать экзотоксины.

* Corynebacterium pseudodiphtheria “ближайший родственник” Corynebacterium diphtheria. входит в состав нормальной микрофлоры человека. Отличается только тем, что не продуцирует экзотоксин.

Устойчивость к факторам внешней среды:

Устойчивость возбудителя во внешней среде: средняя устойчивость. весьма чувствителен к действию многих антибиотиков, но устойчив к высушиванию и низким температурам.

- Чувствительны к стандартным дезинфицирующим процедурам

Биохимические свойства:

·Расщепляют цистин с образованием H2S

·Продуцирует экзотоксин

·Каталаза (+)

·Не расщепляет мочевину

·Расщепляет глюкозу, мальтозу и не расщепляет сахарозу

·Восстанавливает нитраты в нитриты

·Расщепление крахмала различается у разных биоваров

Эпидемология:

Источник: больной человек или носитель.

Механизм передачи: основной - аспирационный. Пути передачи: воздушно-капельный, но возможен и контактно-бытовой (бельё, игрушки).

Патогенез:

Входные ворота – слизистые носа, зева, дых.путей. По локализации процесса принято различать Дифтерия зева, носа, гортани, трахеи и бронхов, глаз, наружных половых органов, кожи и пр-

Дифтерия зева — наиболее частая форма; она наблюдается в 85—90% и более всех случаев Дифтерия. Различают три основные формы: локализованную, распространённую и токсическую.

Инкубация 2-10 дней. Обычно в кровь не проникает. Идёт размножение возбудителя и выброс экзотоксина и прочих факторов патогенности. На месте ворот фиброзное воспаление(отёк эпителия, фибринозная плёнка), ведущее к лимфадениту (пат. Увеличение лимф. сосудов), при поражении гортани образуется круп и развивается асфиксия и смерть, возможны паралич дых. системы и недостаточность гипофизарно-надпочечниковый системы.

При токсической Дифтерия обнаруживаются изменения в надпочечниках: в мозговом и корковом веществе отмечаются резкая гиперемия, кровоизлияния и деструктивные изменения клеток вплоть до полного некроза и распада.

Особенно сильно страдает сердечно-сосудистая система. Поражение мелких сосудов сводится главным образом к их паретическому расширению с явлениями застоя, доходящего до стаза (смотри полный свод знаний), и повышению проницаемости (смотри полный свод знаний).

Наиболее глубокие дегенеративные изменения отмечаются в миокарде — паренхиматозное перерождение мышечных волокон вплоть до полного миолиза, глыбчатый распад (рисунок 3) или диффузное дегенеративное ожирение.

Клинические формы (по месту внедрения возбудителя): -дифтерия зева (до 5 дней, слабость,

гиподинамия, бледность кожи. Воспаление характеризуется неяркой гиперемией, синюшным оттенком, и с обязательным наличием пленки: сначала белого, затем серого цвета). Начинается, как ангина (горло красное - происходит некроз эпителия. Некротизированный эпителий челком сползает в трахеюи закупоревает ее. Развивается асфиксия - > больной погибает )

-дифтерия гортани («дифтерийный круг» у детей раннего возраста: последовательное появление сначала кашля, осиплости, их усилением, а затем появление фибринозных налетов на гортани, и присоединение стеноптического дыхания, 2-3 дня стеноз усиливается, на 5-6 день от начала заболевания у ребенка наступает асфиксия)

- др. формы: дифтерия носа, глаз, раны, наружных половых органов у девочек

Иммунитет – Приобретенный иммунитет – стойкий напряженный антитоксический

Диагностика:

бактериоскопический (ориентировочный: рассказываем о римской пятерке, которая позволяет предположить наличие бактерий в месте поражения => нормальная микрофлора или дифтерия), и

бактериологический метод (главный: 1 день исследуемый материал (соскоб с места поражения) посев на сложную среду с кровью => инкубация 2 день вырастают подозрительные колонии - черные,

напоминают цветки маргаритки => делают препарат: красят препарат по методу Нейссера (темно-

желтого-цвета и внутри них видны темно синие гранулы волютина) и по методу Грамма (+) -

римская пятерка) => откалывают такую колонию на скошенный сывороточный агар (для сохранения чистой культуры) и проводят идентификационные тесты (это посев на среду Пизу для определения фермента цистиназы и посев для определения токсигенности).

В среду Пизу делают укол до дна => 3 день - по ходу укола почернение (культура цистиназа +)

Определение токсигенности: чашка засевается исследуемой культурой и контролем, кладут бумажку смоченную антитоксической сывороткой противодифтерийной (АТ с этой бумажки диффундирует вода) = если культура продуцирует экзотоксин, то его тоже диффундирует вода - в месте их встречи выпадает полоска преципитата. Контрол абсолютно прозрачный, ничего не появляется - следим.

Таким образом определяют токсигенность в реакции преципитации по Оухтерлони.

При определении культуры цистиназа+ и токсигенные культуры выдают окончательный ответ, что это возбудители дифтерии.

Если нет четкой картины, то тогда изучают биохимические свойства (берут сывороточный агар, на котором откалывали культуру (см. бактериологич. метод) и изучают биохимические свойства)

Вакцинопрофилактика: Адсорбтивная Коклющно-Дифтерийно-Столбнячная вакцина (АКДС) заболеваемость Дифтерия в 1972 год по сравнению с 1958 год уменьшилась в 369 раз

Серопрофилактика: не применяется

Вакцинотерапия: не применяется

Серотерапия: применяется. Дифтерийная антитоксическая сыворотка в ранние сроки болезни — высокоэффективное средство.