Бактериоскопическое исследование: Материалом для исследования служит гнойное отделяемое из уретры, влагалища, примой кишки, глотки, сыворотки крови. Готовят мазки, окраска по Граму, При «+» результате – обнаруживают гонококки – грам+ диплококки бобовидной формы., находятся внутри лейкоцитов. Положительный диагноз ставится при острой форме гонореи до применения антибиотиков.

Бактериологическое исследование. Материал засевают на чашки Петри со специальными питательными средами — КДС, сывороточным агаром. Среда КДС содержит питательный агар с добавлением в определенной концентрации казеина, дрожжевого экстракта и сыворотки крови. Посевы инкубируют при 37°С в течение 24—72 ч. Гонококки образуют круглые прозрачные колонии, напоминающие капли росы, в отличие от более мутных колоний стрептококков или пигментированных колоний стафилококков, которые также могут расти на этих средах. Подозрительные колонии пересевают в пробирки на соответствующие среды для получения чистых культур, которые идентифицируют по сахаролитическим свойствам на средах «пестрого» ряда (полужидкий агар с сывороткой и углеводом). Гонококк ферментирует только глюкозу с образованием кислоты..

Серодиагностика. В некоторых случаях ставят РСК Борде — Жангу. В качестве антигена используют взвесь убитых гонококков. Реакция Борде—Жангу имеет вспомогательное значение при диагностике гонореи. Она положительна при хронической и осложненной гонорее.

4. Какая форма заболевания возникает у новорожденного, рожденного от больной гонореей матери?

Бленнорея - острое гнойное воспаление слизистой оболочки. Профилактика – по 2 капли 30% AgNO3 в конъюнктивальные мешки.

С какой целью применяется гоновакцина, что она собой представляет?

Гоновакцина – вакцина гонококковая инактивированная. Используется для специфической иммунотерапии.

Повышает специфическую реактивность организма (стимулирует выработку антител с нейтрализующим, опсоническим и защитным действием

ЗАДАЧА 5.

В кожно-венерологический диспансер к врачу-венерологу обратилась девушка, у которой врач на слизистой нижней губы обнаружил безболезненную язву, с плотным дном и подрытыми плотными краями. Из анамнеза было выяснено, что она занималась оральным сексом с незнакомым мужчиной. На основании клинических данных и основываясь на анамнезе, врач поставил диагноз: «первичный сифилис».

Вопросы:

1.Назовите возбудителя сифилиса. К какой морфологической группе относится возбудитель сифилиса?

Возбудитель сифилиса (Бледная трепонема, T. pallidum) – род Treponema, сем. Spirochaetaceae, отд. Gracilicutes. Морфологически относится к извитым бактериям (спирохетам), грамотрицательные.

2.Как называется первичный аффект при сифилисе и место его локализации.

Твердый шанкр (безболезненные язвочки с твердыми краями на месте внедрения возбудителя – слизистых оболочек половых органов, рта, ануса). Также отмечается регионарный лифаденит. Первичный период длится 6-7 недель.

3. Опишите морфологические, тинкториальные и культуральные свойства возбудителя сифилиса.

Морфология. ЖЦ: спиралевидная форма, зернистая стадия, стадия кистоподобных сферических тел (цисты). Тонкие спиральноизвитые бактерии (4-14 мкм) с равномерными мелкими завитками (8-12 завитков). Завитки расположены друг от друга на одинаковом расстоянии около 1 мкм, высота по направлению к концам уменьшается. В электронном микроскопе имеют вид змеи или дождевого червя. Цисты – формы устойчивого выживания в неблагоприятных условиях. + L-формы и фильтрующиеся формы. Зернистые формы проходят через бактериальные фильтры. Спор и капсул не имеют. В организме животных может возникать капсулоподобный чехол мукополисахаридной природы.

Три пути движения: вращение вокруг прямой оси, изгибание под углом, поступательные волнообразные перемещения. Передвигаются при помощи аксиальной нити, расположенной между ЦПМ и клеточной стенкой и состоящей из блефаропласт и прикрепленных к ним жгутиков.

Тинкториальные свойства. Окрашиваются с трудом анилиновыми красителями, в бледные тона, граммотрицательные. По Романовскому-Гимзе окрашиваются в слабо-розовый цвет. Восстанавливают нитрат серебра в металлическое серебро, которое откладывается на поверхности и делает их видимыми в тканях: при окраске по Морозову выглядят коричневыми или почти черными. При окраске по Бурри осуществляют негативное контрастирование. Наиболее эффективно изучение в темнопольном или фозовоконтрастном микроскопе.

Культуральные свойства. Облигатный паразит, хемоорганотроф, микроаэрофил (непатогенные трепонемы – строгие анаэробы), оптимальная температура – 35-370С, рН 7,2. Не культивируется на искусственных питательных средах, хотя при добавлении к питательным средам почечной, мозговой ткани или асцитической жидкости на 3-5 сутки вырастают мелкие колонии, но “культуральные” штаммы трепонем изменяют свою морфологию (становятся более грубыми, короткими, полиморфными), утрачивают иммуногенность и патогенность. Хорошо растут в куриных эмбрионах или на культурах клеток. Накопление культуры – путем заражения яичка кролика (экспериментальный орхит).

4. Эпидемиология сифилиса: источник инфекции, механизм и пути передачи инфекции.

Строго антропонозная инфекция. В эксперименте возможно заражение обезьян, хомячков, кроликов. Источник – больной человек; бактерионосительства не бывает. Механизм передачи: контактный и вертикальный. Пути передачи: контактно-половой (преимущественно; возможно через поцелуй), контактно-бытовой (через предметы домашнего обиходы – стаканы, зубные щетки, сигареты), возможно при инвазивныз мероприятиях (переливание крови, собранной у инфицированных лиц на ранних этапах инфекции). При вертикальном механизме пути передачи: трансплацентарный (инфицирование плода) и врожденный сифилис (при прохождении по половым путям).

Входные ворота: слизистые оболочки половых органов, ротовой полости, кожа с нарушением целостности и т.д.

Инкубационный период – 3-4 недели (21-24 дня, max 90 дней). Возбудитель размножается во входных воротах и регионарных лимфатических узлах.

Методы диагностики сифилиса в зависимости от стадии заболевания

Бактериоскопическое исследование – при первичном сифилисе и в период высыпаний при вторичном сифилисе. Трепонемы наблюдают в живом виде в темном поле, иногда используют окраску по Романовскому-Гимзе. Материал для исследования – отделяемое твердого шанкра, пунктаты ЛУ, материал из кожных высыпаний, сыворотка крови больного.

Серологическое исследование:

1. Отборочные неспецифические тесты для обследования населения. К ним относятся реакции преципитации или ее аналоги: VDRL, RPR – флоккуляционные тесты и РПГА с кардиолипиновым АГ

(экстракт из мышц сердца быка + спиртовой раствор ХС).

Флокуляционные тесты: реакция Кана и Закса-Витебского (спиртовые экстракты из бычьего сердца), реакция Мейнике (из лошадиного сердца), цитохолевая проба – образование хлопьевидных осадков после добавления к сыворотке больного липоидного АГ.

Раннее ставилась РСК (реакция Вассермана) с кардиолипиновым и трепонемальным АГ. Для контроля эффективности лечения используют тест с кардиолипиновым АГ в количественном варианте,

позволяющий выявить титр АТ. Недостатки: ложноположительные результаты у лиц, страдающих заболеваниями, которые сопровождаются деструкцией тканей организма (малярия, онкологические заболевания, коллагенозы).

2. Диагностические тесты для подтверждения диагноза с трепонемальным специфическим АГ (ультразвуковой экстракт трепонем, выращенных в яичке кролика). К ним относятся ИФА, РПГА, РИФ (непрямая), иммуноблот. Недостатки: специфические АТ длительно сохраняются, что не позволяет использовать тесты для контроля эффективности лечения; положительны также у больных фрамбезией и беджель.

Молекулярно-биологическое исследование: ПЦР, основанная на детекции ДНК. Амплификация участка гена поверхностного АГ с молекулярной массой 47 кД; выявление 16S РНК.

ЗАДАЧА 6.

Девушка 18 лет, во время мытья крыльца на даче, занозила палец. Занозу удалила не полностью и не провела обеззараживание ранки. Через 2 недели появились первые признаки заболевания в виде спазма жевательных мышц, затруднения глотания. При обращении к врачу на основании клинических симптомов был поставлен диагноз «столбняк».

Вопросы:

1. Назовите род и вид возбудителя столбняка.

Род Клостридии (Clostridium), вид Tetani

2. Каковы морфологические и тинкториальные свойства возбудителя столбняка?

Морфология: грамположительные, крупные, подвижные (перитрихи) палочки. Образуют терминально расположенные споры округлой формы (поэтому палочку со спорой на конце сравнивают с «барабанной палочкой»). Капсулу не образует. В мазках располагаются поодиночке или короткими цепочками.

3. Эпидемиология: источник инфекции, механизм, факторы, пути передачи инфекции.

Источник инфекции – окультуренная почва и кишечник многих животных и человека. Из кишечника животных с фекалиями возбудители попадают в почву. В почве палочки превращаются в споровую форму. Споры возбудителя способны проникать в организм контактным (механизм передачи) путем только при повреждениях кожного покрова и слизистых оболочек. Пути передачи – посттравматический и артифициальный (постоперационный, инъекционный, постабортный и т.д.).

Сезонность заболевания – весенне-летняя, чаще болеют жители сельской местности.

4. Метод микробиологического исследования и его цель.

Материал – кусочки иссеченной ткани, раневое отделяемое.

1.Бактериоскопический метод – ориентировочный: берут кусочки иссеченной ткани, окрашивают

имикроскопируют. Если крупные, грам + палочки, то инфекция.

2.Бактериологический метод

·Засев в среду Китта-Тароцци (обогащение). Инкубация в аэростате.

·Среда Китта-Тароцци помутнела, кусочки паренхиматозных органов покрыты пузырьками газа. Пересев на среду Цейсслера для выведения чистой культуры.

·На среде Цейсслера рост колоний – плоские серовато-белые с зоной альфа-гемолиза. Делаем из колоний препарат, окрашиваем по Граму, микроскопируем и видим крупные, грам + палочки. Откол остатка чистой колонии опять на среду Китта-Тароцци для накопления чистой культуры.

·Накоплена чистая культура. Изучаем: биохимические свойства на пёстром ряду среды Гиса (разлитые высокие столбики), токсигенность

3.Серодиагностика не используется

4.Биологический – проба на белых мышах. Исследуемый материал или фильтрат изучаемой культуры делят на две фракции. Одну из них смешивают с антитоксической сывороткой и оставляют смесь при комнатной температуре на 40 минут. После этого заражают белых мышей нативным материалом и смесью его с антитоксической сывороткой. При наличии в нативном материале столбнячного токсина опытные мыши погибают, контрольные мыши, которым вводят смесь нативного материала с антитоксином, остаются живыми. Для обнаружения столбнячного токсина может быть использована РПГА с антительными эритроцитарным диагностикумом.

5.Аллергологический – не используется

6.Современные методы – ИФА, МИФ

5.Специфическая профилактика столбняка

Столбнячный анатоксин (заблаговременная профилактика) и противостолбнячная сыворотка (экстренная профилактика). Противостолбнячную сыворотку вводят для немедленной нейтрализации токсина (но инкубационный период у заболевания может быть большим, долгим, для этого вводят еще столбнячный анатоксин).

Плановая специфическая профилактика проводится столбнячным анатоксином, начиная с 3-х месячного возраста и до 17 лет. Далее ревакцинация должна повторяться через каждые 10 лет. Детям до 7 лет столбнячный анатоксин вводят в составе АКДС-вакцины, более старших детей и взрослых иммунизируют АДС-М анатоксином.