При дисбактериозе происходят количественные и качественные изменения бактерий, входящих в состав нормальной микрофлоры.

Дисбиозы классифицируют по этиологии (грибковый, стафилококковый, протейный и др.) и по локализации (дисбиоз рта, кишки, влагалища и т.д.). Различают дисбиоз тонкой (синдром избыточного роста бактерий — СИБР, Bacterial overgrowth syndrome) и толстой кишки. Изменения нормальной микрофлоры сопровождаются различными нарушениями: развитием инфекций, диареи, запора, синдрома мальабсорбции, гастрита, колита, язвенной болезни, злокачественных новообразований, аллергии, мочекаменной болезни, гипо- и гиперхолестеринемии, гипо- и гипертензии, кариеса, артрита,

поражений печени и др.

Диагностика нарушений микробиоценоза проводится с помощью бактериологического метода, ПЦРдиагностики, хроматомасс-спектрометрии и исследования метаболитов. Перспективен метод газожидкостной хроматографии, основанный на определении короткоцепочечных жирных кислот — метаболитов, в основном анаэробов.

Определение видового и количественного состава представителей микробиоценоза некоторого биотопа (кишки, рта, влагалища, кожи и т.д.) проводится путем высева из разведений исследуемого материала или путем отпечатков, смыва на соответствующие питательные среды (среда Блаурокка — для бифидобактерий; среда МРС-2 — для лактобактерий; анаэробный кровяной агар — для бактероидов; среда Левина или Эндо — для энтеробактерий; желчно-кровяной агар — для энтерококков; кровяной агар — для стрептококков и гемофилов; мясопептонный агар с фурагином —

для синегнойной палочки, среда Сабуро — для грибов и др.).

*Возможно определение в исследуемом материале микробных метаболитов — маркеров дисбиоза (жирных кислот, гидроксижирных кислот, жирнокислотных альдегидов, ферментов и др.). Например, обнаружение в фекалиях E-аспартил-глицина и E-аспартил-лизина свидетельствует о нарушении кишечного микробиоценоза, так как в норме эти дипептиды метаболизируются кишечной анаэробной микрофлорой.

Для восстановления нормальной микрофлоры проводят селективную деконтаминацию и назначают per os различные препараты:

·пребиотики — вещества немикробного происхождения или компоненты микробов, стимулирующие рост нормальной микрофлоры человека; обычно основой пребиотика служат низкомолекулярные углеводы (олигосахариды, фруктоолигосахариды), содержащиеся в грудном молоке и в некоторых пищевых продуктах;

·пробиотики (эубиотики) — препараты, содержащие живые бактерии, представителей нормальной микрофлоры кишечника, оказывающие нормализующее действие на организм человека и его микрофлору: бифидобактерии (бифидумбактерин), кишечные палочки (колибактерин), лактобактерии (лактобактерин) и др. Другая группа пробиотиков — самоэлиминирующиеся антагонистические микроорганизмы, в норме не обитающие в организме человека (Bacillus subtilis, B. licheniformis, Saccharomyces boulardii);

·синбиотики — комбинированные препараты, состоящие из пробиотиков и пребиотиков;

·энтеросорбенты — препараты, удаляющие из кишечника токсичные метаболиты и условнопатогенные бактерии (активированный уголь, энтеросгель и др.).

17 Иммунодиагностика (серодиагностика) инфекционных заболеваний. Принципы и диагностические критерии.

Серодиагностика – выявление антител в сыворотке (парных сыворотках) обследуемого. Относится к непрямым методам диагностики инфекционных заболеваний. (Выявление антигенов – прямой метод – экспресс-диагностика).

В основе любых иммунологических реакций – взаимодействие АГ и АТ.

Антиген - любое вещество, которое организм рассматривает как чужеродное или потенциально опасное и против которого организм обычно начинает вырабатывать собственные антитела (иммунный ответ).

Строение АГ – белковая молекула или простое в-во, соединенное с белками организма (гаптен). Свойства АГ – антигенность, специфичность, иммуногенность Иммуногенность – способность АГ вызывать иммунный ответ в макроорганизме.

Специфичность – способность АГ реагировать с определенными АТ или клоном лимфоцитов АГ микроорганизмов:

Группоспецифические – есть у разных видов одного рода или семейства Видоспецифические – есть у различных представителей одного вида

Типоспецифические – образуют серологические варианты – серовары и антигеновары внутри одного вида

Серовар – группа МО со сходной антигенной структурой (определяется серологическими методами)

Антитела – это крупные глобулярные белки плазмы крови, выделяющиеся плазматическими клетками иммунной системы и предназначенные для нейтрализации клеток патогенов (бактерий, грибов, многоклеточных паразитов) и вирусов, а также белковых ядов и некоторых других чужеродных веществ.

Моноклональные АТ – иммуноглобулины синтезируемые одним клоном клеток (из одной плазматической клетки-предшественницы) Связываются только с 1 АГ детерминантой на поверхности белка.

Поликлональные антитела — антитела, образующиеся в сыворотке крови в разных клонах B-лимфоцитов и связываются с различными антигенными детерминантами (эпитопами) молекулы-мишени (антигена). Специфичность АТ определяется аминокислотной последовательностью вариабельных областей иммуноглобулинов.

Тут видимых проявлений нет! Но она специфична!

Аффинность иными словами – прочность, авидность – жадность (для запоминания).

Не специфична, но чувствительная и быстрая!

Чувствительность реакций – минимальное кол-во в-ва, которое может быть ей обнаружено. Специфичность – способность НЕ давать ложноположительные результаты. Серодиагностика – выявление антител в сыворотке (парных сыворотках) обследуемого. КРИТЕРИИ СЕРОДИАГНОСТИКИ:

1)Диагностический титр – максимальное разведение сыв-ки пациента, в котором реакция еще положительна. Титр пациента сравнивается с диагностическим.

Достоинства – быстрый, легкий, количественный Недостатки – может отражать постинфекционный или поствакцинный периоды

2)Нарастание титра АТ – повышение содержания АТ в сыв-ке пациента, что говрит о текущем заболевании. Исследуются парные сыв-ки.

Достоинства – говорит о текущем заболевании Недостатки – долгое время исследования

3)Авидность иммуноглобулинов G (как-то мы про это не очень говорили, но оно есть)

Высокая авидность говорит о длительно текущем заболевании. Задачи решаемые при помощи серодиагностики:

-Обнаружение IgM, IgG, IgA, авидности АТ

-Диагностика инфекционного заболевания

-Определение его периода

-Дифференцировка свежего от перенесенного заболевания

-Контроль эффективности лечения

Кратко о насущном Развернутая РА – готовят серию разведений сыворотки больного (с АТ). К каждой пробирке добавляют

диагностикум (взвесь убитых микробов – АГ). Инкубация. Положительная реакция – агглютинация. Отрицательная – равномерная муть.

Развернутая РНГА – аналогично. Эритроцитарный диагностикум – эритроциты с нагруженными на них АГ. «+» - зонтик, «-« - пуговка.

РСК – исследуемая сыв-ка (АТ) + известный АГ + комплемент (сыв-ка морских свинок) Если в сыв-ке больного были АТ, тогда образуется комплекс АГ-АТ-комплемент.