Кк (креатинкиназа) существует в виде 3 изоферментов, которые к тому отличаются электрофоретической подвижностью:

1. ВВ (КК – 1)– в значительных количествах в головном мозге, простате, желудке, щитовидной железе. Для него характерно максимальное продвижение к аноду при электрофорезе.

2. МВ (КК -2) – в сердечной мышце, обладает средней подвижностью.

3. ММ (КК – 3) – прежде всего в скелетных мышцах также в сердечной мышце. Самый медленный.

( М – muscle (мышца) и В - brain (мозг) – субъединицы КК).

Подобным свойством обладает и лдг (лактатдегидрогеназа), имеющая 5 изоферментов:

1. ЛДГ1 (4Н-субъединицы) – эритроциты, лейкоциты, миокард и корковое вещество почек.

2. ЛДГ2 (3Н1М) – в тех же самых органах, что и ЛДГ1.

3. ЛДГ3 (2Н2М) – лимфоидная ткань, тромбоциты, опузоли.

4. ЛДГ4 (1Н3М) – печень, скелетная мускулатура, неопластические ткани.

5. ЛДГ5 (4М) – в тех же самых органах, что и ЛДГ4.

20. Применение ферментов как аналитических реагентов при лабораторной диагностике (определение глюкозы, мочевой кислоты, холестерина,

триацилглицеринов).

Высокоочищенные ферменты применяются в качестве избирательных реагентов для количественного определения нормальных и аномальных химических веществ в

биологических жидкостях.

1. Определение глюкозы проводят с помощью фермента глюкозооксидазы, принцип

метода основан на специфическом окислении глюкозы под влиянием этого фермента. ФАД фермента переносит атомы водорода на кислорода, образуется Н2О2 (перекись водорода), которая определяется реакцией, характеризующиеся разной

интенсивностью окраски для различных концентраций Н2О2.

2. Определение мочевой кислоты основано на ее гидролизе в присутствии уратоксидазы.

3. Определение холестерина проводится с помощью холестеролоксидазы, холестеролэстеразы и пероксидазы, которые последовательно используют в реакциях.

4. Определение ТАГ (триациалглицеринов) используется липаза в реакции гидролитического расщепления.

Биохимия 4. Биологические мембраны.

1. Структурная организация мембран, строение и свойства основных компонентов мембран. Структурная организация мембран:

Согласно жидкостно-мозаичной модели (Сенджер и Николсон, 1972 г.) основу мембран составляет двойной липидный слой, в формировании которого участвуют фосфолипиды и гликолипиды. Липидный бислой образован двумя рядами липидов, гидрофобные радикалы которых спрятаны внутрь, а гидрофильные группы обращены наружу и контактируют с водной средой.

Белковые молекулы как бы растворены в липидном бислое и относительно свободно

«плавают» в липидном море в виде айсбергов. Биологические мембраны таким образом представляют собой «ансамбли» липидных и белковых молекул, удерживаемых вместе с помощью нековалентных взаимодействий.

Химический состав - здесь вроде строение и свойства компонентов мембран: В состав плазматической мембраны входят липиды, холестерин, белки и углеводы:

1. Липиды (фосфолипиды, сфинголипиды, гликолипиды) составляют до 45% массы мембран.

А) Фосфолипиды. Молекула фосфолипида состоит из полярной (гидрофильной) части (головка) и аполярного (гидрофобного) двойного углеводородного хвоста. В водной фазе молекулы фосфолипидов автоматически агрегируют хвост к хвосту, формируя каркас

биологической мембраны в виде двойного слоя (бислой). Таким образом, в мембране хвосты фосфолипидов направлены внутрь бислоя, а головки обращены кнаружи.

Б) Сфинголипиды - липиды, одна из разновидностей фосфолипидов, содержащие основание с длинной цепью (сфингозин или сходную с ним группу); сфинголипиды в значительном количестве находятся в миелиновых оболочках нервных волокон, слоёв модифицированной плазмолеммы шванновских клеток и олигодендроглиоцитов ЦНС. В) Гликолипиды – молекулы содержащих олигосахариды липидов, присутствующие в наружной части бислоя, а их остатки сахаров ориентированы к поверхности клетки.

Гликолипиды составляют 5% липидных молекул наружного монослоя.

2. Холестерин имеет чрезвычайно важное значение не только как компонент

биологических мембран, на основе холестерина происходит синтез стероидных гормонов

• половых, глюкокортикоидов, минералокортикоидов.

3. Белки составляют более 50% массы мембран. Белки плазмолеммы подразделяют на интегральные и периферические.

Интегральные мембранные белки прочно встроены в липидный бислой. Примеры интегральных мембранных белков - белки ионных каналов и рецепторные белки

(мембранные рецепторы). Молекула белка, проходящая через всю толщу мембраны и выступающая из неё как на наружной, так и на внутренней поверхности, -

трансмембранный белок.

Периферические мембранные белки (фибриллярные и глобулярные) находятся на одной из поверхностей клеточной мембраны (наружной или внутренней) и нековалентно связаны с интегральными мембранными белками.

Примерами периферических мембранных белков, связанных с наружной поверхностью мембраны, могут служить рецепторные и адгезионные белки.

Примеры периферических мембранных белков, связанных с внутренней поверхностью мембраны, - белки, ассоциированные с цитоскелетом (например, дистрогликаны, белок полосы 4.1, протеинкиназа С), белки системы вторых посредников.

4. Углеводы (преимущественно олигосахариды) входят в состав гликопротеинов и гликолипидов мембраны, составляя 2-10% её массы. С углеводами клеточной

поверхности взаимодействуют лектины.

Цепи олигосахаридов, ковалентно связанных с гликопротеинами и гликолипидами пламолеммы, выступают на наружной поверхности мембран клетки и формируют поверхностную оболочку толщиной 5 - нм – гликокаликс. Гликокаликс участвует в

процессах межклеточного узнавания, межклеточного взаимодействия, пристеночного пищеварения.